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家蚕和二化螟两个乙酰胆碱酯酶的RNA干扰及功能分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
第一章 文献综述第10-26页
 1 昆虫体内存在两个乙酰胆碱酯酶基因第10-15页
   ·多种昆虫体内存在两个ace基因第11-14页
   ·昆虫两个乙酰胆碱酯酶基因的定量分析第14-15页
 2 RNA干扰及其应用第15-20页
   ·RNAi的定义第15页
   ·RNAi的研究历程第15-16页
   ·RNAi的作用机制第16-19页
   ·RNAi技术的应用第19-20页
 3 家蚕及二化螟研究简介第20-23页
   ·家蚕研究简介第20-21页
   ·二化螟的研究简介第21-23页
 4 本研究目的和意义第23-24页
 5 研究内容及技术路线第24-26页
第二章 家蚕和二化螟体内RNA干扰方法建立第26-34页
 摘要第26页
 1 材料与方法第26-30页
   ·昆虫饲养及试虫材料提取第26页
   ·主要试剂和仪器第26-27页
   ·家蚕及二化螟ace1/ace2干扰片段的位置第27-29页
   ·活体显微注射第29页
   ·注射后数据统计第29-30页
 2 结果与分析第30-31页
   ·显微注射法将siRNA导入试虫体内第30-31页
   ·siRNA导入试虫体内后死亡率分析第31页
 3 讨论第31-34页
第三章 干扰前后乙酰胆碱酯酶在五龄试虫不同组织的表达水平分析第34-46页
 摘要第34页
 1 材料与方法第34-38页
   ·昆虫饲养及试虫材料提取第34-35页
   ·主要试剂和仪器第35页
   ·总RNA提取和cDNA合成第35-36页
   ·定量PCR引物第36-37页
   ·家蚕和二化螟ace基因的定量PCR分析第37-38页
 2 实验结果第38-43页
   ·两种乙酰胆碱酯酶在家蚕和二化螟特异组织中表达量分析第38-40页
   ·沉默的有效时间观察第40-41页
   ·五龄家蚕和二化螟RNA干扰后不同组织中目标基因mRNA的qRT-PCR检测第41-43页
 3 讨论第43-46页
第四章 RNA干扰后三龄家蚕中乙酰胆碱酯酶基因表达水平、酶活力、行为学分析第46-56页
 摘要第46页
 1 材料与方法第46-48页
   ·供试材料第46页
   ·试验仪器及试剂第46-47页
   ·家蚕ace基因的定量PCR分析第47页
   ·酶动力学参数测定第47页
   ·行为学实验第47-48页
   ·家蚕体长体重及死亡率统计第48页
   ·统计方法第48页
 2 实验结果第48-54页
   ·RNA干扰后目标基因mRNA的qRT-PCR检测第48-49页
   ·酶活力测定第49-50页
   ·行为学实验结果第50-51页
   ·死亡率统计第51页
   ·注射后不同时间体长体重统计分析第51-54页
 3 讨论第54-56页
全文总结第56-58页
参考文献第58-70页
附录第70-72页
致谢第72页

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