摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1 昆虫体内存在两个乙酰胆碱酯酶基因 | 第10-15页 |
·多种昆虫体内存在两个ace基因 | 第11-14页 |
·昆虫两个乙酰胆碱酯酶基因的定量分析 | 第14-15页 |
2 RNA干扰及其应用 | 第15-20页 |
·RNAi的定义 | 第15页 |
·RNAi的研究历程 | 第15-16页 |
·RNAi的作用机制 | 第16-19页 |
·RNAi技术的应用 | 第19-20页 |
3 家蚕及二化螟研究简介 | 第20-23页 |
·家蚕研究简介 | 第20-21页 |
·二化螟的研究简介 | 第21-23页 |
4 本研究目的和意义 | 第23-24页 |
5 研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
第二章 家蚕和二化螟体内RNA干扰方法建立 | 第26-34页 |
摘要 | 第26页 |
1 材料与方法 | 第26-30页 |
·昆虫饲养及试虫材料提取 | 第26页 |
·主要试剂和仪器 | 第26-27页 |
·家蚕及二化螟ace1/ace2干扰片段的位置 | 第27-29页 |
·活体显微注射 | 第29页 |
·注射后数据统计 | 第29-30页 |
2 结果与分析 | 第30-31页 |
·显微注射法将siRNA导入试虫体内 | 第30-31页 |
·siRNA导入试虫体内后死亡率分析 | 第31页 |
3 讨论 | 第31-34页 |
第三章 干扰前后乙酰胆碱酯酶在五龄试虫不同组织的表达水平分析 | 第34-46页 |
摘要 | 第34页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·昆虫饲养及试虫材料提取 | 第34-35页 |
·主要试剂和仪器 | 第35页 |
·总RNA提取和cDNA合成 | 第35-36页 |
·定量PCR引物 | 第36-37页 |
·家蚕和二化螟ace基因的定量PCR分析 | 第37-38页 |
2 实验结果 | 第38-43页 |
·两种乙酰胆碱酯酶在家蚕和二化螟特异组织中表达量分析 | 第38-40页 |
·沉默的有效时间观察 | 第40-41页 |
·五龄家蚕和二化螟RNA干扰后不同组织中目标基因mRNA的qRT-PCR检测 | 第41-43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
第四章 RNA干扰后三龄家蚕中乙酰胆碱酯酶基因表达水平、酶活力、行为学分析 | 第46-56页 |
摘要 | 第46页 |
1 材料与方法 | 第46-48页 |
·供试材料 | 第46页 |
·试验仪器及试剂 | 第46-47页 |
·家蚕ace基因的定量PCR分析 | 第47页 |
·酶动力学参数测定 | 第47页 |
·行为学实验 | 第47-48页 |
·家蚕体长体重及死亡率统计 | 第48页 |
·统计方法 | 第48页 |
2 实验结果 | 第48-54页 |
·RNA干扰后目标基因mRNA的qRT-PCR检测 | 第48-49页 |
·酶活力测定 | 第49-50页 |
·行为学实验结果 | 第50-51页 |
·死亡率统计 | 第51页 |
·注射后不同时间体长体重统计分析 | 第51-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
全文总结 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
附录 | 第70-72页 |
致谢 | 第72页 |