| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| 1 大豆耐盐研究进展 | 第10-11页 |
| 2 盐胁迫对大豆的影响 | 第11-12页 |
| ·对大豆生长,农艺性状和种子品质 | 第11页 |
| ·根瘤和盐胁迫 | 第11-12页 |
| 3.种质资源评价和耐盐的基因遗传 | 第12页 |
| 4.大豆的耐盐机制 | 第12-20页 |
| ·离子转运体介导离子稳态 | 第13-14页 |
| ·渗透保护剂介导渗透平衡调节 | 第14-16页 |
| ·LEA 与耐盐 | 第16-17页 |
| ·氧化还原平衡调节 | 第17-18页 |
| ·结构适应 | 第18-20页 |
| 5 盐胁迫下的信号传递 | 第20-22页 |
| 6 前景展望 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-52页 |
| 1 材料 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·实验菌种 | 第23页 |
| ·质粒载体 | 第23-25页 |
| ·试剂和仪器 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-47页 |
| ·大豆的萌发和种植 | 第26-28页 |
| ·RT-PCR | 第28-29页 |
| ·质粒 DNA 的扩增和抽提 | 第29-31页 |
| ·载体的构建 | 第31-33页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
| ·农杆菌感受态的制备和转化 | 第34-35页 |
| ·酿酒酵母 W303-1A 感受态细胞的制备,转化和检测 | 第35-37页 |
| ·拟南芥的花序浸染转化 | 第37-39页 |
| ·组织化学的 GUS 染色 | 第39页 |
| ·PDS-1000/He 型基因枪轰击洋葱表皮操作 | 第39-40页 |
| ·根瘤农杆菌转化水稻(粳稻)成熟胚 | 第40-44页 |
| ·CTAB 法抽提水稻 DNA | 第44页 |
| ·Southern-blotting | 第44-47页 |
| 3 引物和载体构建 | 第47-52页 |
| ·农杆菌转化载体重组 pCAMBIA1301‘质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·RT-PCR 引物 | 第48页 |
| ·标准曲线探针引物 | 第48页 |
| ·Southern Blotting 探针引物 | 第48-49页 |
| ·构建酵母转化载体重组 pRUL12939 | 第49页 |
| ·Over-Lapping PCR | 第49-50页 |
| ·基因枪载体 | 第50-51页 |
| ·酿酒酵母 eGFP 融合蛋白的构建 | 第51页 |
| ·TAIL PCR 引物设计 | 第51-52页 |
| 第三章 结果和讨论 | 第52-74页 |
| 1 耐盐 ORF 的预测和分析 | 第52-54页 |
| 2 耐盐基因的克隆 | 第54页 |
| ·大豆 RNA 的提取和反转录 | 第54页 |
| ·耐盐候选基因的克隆 | 第54页 |
| 3 耐盐候选基因的时空表达模式 | 第54-58页 |
| ·耐盐 ORF 的 RT-PCR 半定量 | 第54-56页 |
| ·GmSLT 的荧光定量结果 | 第56-58页 |
| 4 耐盐 ORF 在酿酒酵母中的 Drop Test Assay | 第58-59页 |
| 5 GmSLT 蛋白结构域分析 | 第59-62页 |
| ·保守结构域分析 | 第59-60页 |
| ·绘制进化树 | 第60-62页 |
| 6 GmSLT 在酿酒酵母中的耐盐性实验 | 第62-67页 |
| ·转基因酵母的生长曲线 | 第62-64页 |
| ·GmSLT 的缺失突变 | 第64-65页 |
| ·转突变 GmSLT 酵母的耐盐性 | 第65-67页 |
| 7 GmSLT 蛋白的亚细胞定位 | 第67-68页 |
| ·洋葱表皮基因枪定位 | 第67页 |
| ·酵母中 GmSLT 及其突变基因的亚细胞定位 | 第67-68页 |
| 8 水稻转化体系建立 | 第68-70页 |
| ·水稻转基因载体的构建 | 第68页 |
| ·水稻转化进程 | 第68页 |
| ·转基因水稻的检测 | 第68-70页 |
| 9 GmSLT 转化拟南芥 | 第70-74页 |
| 第四章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 致谢 | 第79页 |