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大豆钠锂离子耐受基因(GmSLT)的克隆与功能研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
第一章 绪论第10-23页
 1 大豆耐盐研究进展第10-11页
 2 盐胁迫对大豆的影响第11-12页
   ·对大豆生长,农艺性状和种子品质第11页
   ·根瘤和盐胁迫第11-12页
 3.种质资源评价和耐盐的基因遗传第12页
 4.大豆的耐盐机制第12-20页
   ·离子转运体介导离子稳态第13-14页
   ·渗透保护剂介导渗透平衡调节第14-16页
   ·LEA 与耐盐第16-17页
   ·氧化还原平衡调节第17-18页
   ·结构适应第18-20页
 5 盐胁迫下的信号传递第20-22页
 6 前景展望第22-23页
第二章 材料和方法第23-52页
 1 材料第23-26页
   ·植物材料第23页
   ·实验菌种第23页
   ·质粒载体第23-25页
   ·试剂和仪器第25-26页
 2 实验方法第26-47页
   ·大豆的萌发和种植第26-28页
   ·RT-PCR第28-29页
   ·质粒 DNA 的扩增和抽提第29-31页
   ·载体的构建第31-33页
   ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第33-34页
   ·农杆菌感受态的制备和转化第34-35页
   ·酿酒酵母 W303-1A 感受态细胞的制备,转化和检测第35-37页
   ·拟南芥的花序浸染转化第37-39页
   ·组织化学的 GUS 染色第39页
   ·PDS-1000/He 型基因枪轰击洋葱表皮操作第39-40页
   ·根瘤农杆菌转化水稻(粳稻)成熟胚第40-44页
   ·CTAB 法抽提水稻 DNA第44页
   ·Southern-blotting第44-47页
 3 引物和载体构建第47-52页
   ·农杆菌转化载体重组 pCAMBIA1301‘质粒的构建第47-48页
   ·RT-PCR 引物第48页
   ·标准曲线探针引物第48页
   ·Southern Blotting 探针引物第48-49页
   ·构建酵母转化载体重组 pRUL12939第49页
   ·Over-Lapping PCR第49-50页
   ·基因枪载体第50-51页
   ·酿酒酵母 eGFP 融合蛋白的构建第51页
   ·TAIL PCR 引物设计第51-52页
第三章 结果和讨论第52-74页
 1 耐盐 ORF 的预测和分析第52-54页
 2 耐盐基因的克隆第54页
   ·大豆 RNA 的提取和反转录第54页
   ·耐盐候选基因的克隆第54页
 3 耐盐候选基因的时空表达模式第54-58页
   ·耐盐 ORF 的 RT-PCR 半定量第54-56页
   ·GmSLT 的荧光定量结果第56-58页
 4 耐盐 ORF 在酿酒酵母中的 Drop Test Assay第58-59页
 5 GmSLT 蛋白结构域分析第59-62页
   ·保守结构域分析第59-60页
   ·绘制进化树第60-62页
 6 GmSLT 在酿酒酵母中的耐盐性实验第62-67页
   ·转基因酵母的生长曲线第62-64页
   ·GmSLT 的缺失突变第64-65页
   ·转突变 GmSLT 酵母的耐盐性第65-67页
 7 GmSLT 蛋白的亚细胞定位第67-68页
   ·洋葱表皮基因枪定位第67页
   ·酵母中 GmSLT 及其突变基因的亚细胞定位第67-68页
 8 水稻转化体系建立第68-70页
   ·水稻转基因载体的构建第68页
   ·水稻转化进程第68页
   ·转基因水稻的检测第68-70页
 9 GmSLT 转化拟南芥第70-74页
第四章 结论第74-75页
参考文献第75-79页
致谢第79页

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