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携带HIV-1gag及gp160/gp145基因的rAd5及rAAV2/1疫苗诱导免疫反应差异的研究

主要英文缩写词第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-14页
第1章 绪论第14-18页
第2章 携带HIV-1gag基因的rAd5及rAAV2/1疫苗诱导免疫反应差异的研究第18-26页
   ·材料第18-19页
     ·实验动物第18页
     ·疫苗成分及来源第18页
     ·刺激物(阳性刺激物、阴性刺激物及肽库)来源第18页
     ·培养基和试剂第18-19页
     ·实验仪器第19页
   ·方法第19-22页
     ·小鼠免疫方案第19页
     ·血清和脾脏淋巴细胞的采集第19-20页
     ·ELISPOT实验第20-21页
     ·ELISA检测小鼠血清中 Gag 特异性和载体特异性体液免疫反应第21-22页
   ·实验结果第22-24页
     ·rAd5-gag和 rAAV2/1-gag在小鼠体内诱导的载体特异性及Gag特异性细胞免疫反应第22页
     ·rAd5-gag和 rAAV2/1-gag在小鼠体内诱导的载体特异性及P24特异性IgG 抗体反应第22-24页
   ·讨论第24-25页
   ·本章小结第25-26页
第3章 利用小鼠活体成像技术比较研究rAd5和rAAV2/1两种载体的差异第26-38页
   ·材料第26-27页
     ·细胞第26页
     ·载体成分及来源第26页
     ·试剂第26-27页
     ·主要仪器设备第27页
     ·实验动物第27页
   ·方法第27-28页
     ·rAd5-Luc病毒滴度的测定第27-28页
     ·小鼠免疫第28页
     ·小鼠体内活体成像检测第28页
   ·结果第28-36页
     ·rAd5-Luc滴度的测定第28-29页
     ·小鼠活体成像结果第29-36页
   ·讨论第36-37页
   ·本章小结第37-38页
第4章 携带HIV-1 gp160/gp145基因的rAd5及rAAV2/1疫苗诱导免疫反应差异的研究第38-58页
   ·材料第38-40页
     ·菌株和质粒第38页
     ·细胞第38页
     ·疫苗成分及来源第38页
     ·假病毒第38-39页
     ·工具酶和试剂第39页
     ·抗体第39页
     ·主要仪器设备第39-40页
     ·实验动物第40页
   ·方法第40-44页
     ·pSNAV2.0-neo-gp145质粒的构建及鉴定第40-41页
     ·rAAV2/1 苗rAAV2/1-gp145的构建流程第41-43页
     ·小鼠免疫第43页
     ·血清和脾脏淋巴细胞的采集第43页
     ·酶联免疫斑点法(ELISPOT)筛选肽库和检测细胞免疫反应第43页
     ·ELISA法检测体液免疫反应第43-44页
   ·结果第44-55页
     ·pSNAV2.0-neo和 pSNAV1.0-gp145 限制性内切酶酶切电泳图谱第44页
     ·构建rAAV2/1表达质粒 pSNAV2.0-neo-gp145第44页
     ·重组质粒pSNAV2.0-neo-gp145的酶切鉴定第44-45页
     ·重组质粒pSNAV2.0-neo-gp145的测序鉴定第45页
     ·pSNAV2.0-neo-gp145瞬时转染BHK细胞后gp145基因表达的鉴定第45-47页
     ·细胞株BHK-gp145中gp145基因表达的鉴定第47-48页
     ·rAAV2/1-gp145疫苗的感染性检测第48-49页
     ·用 ELISPOT法对HIV-1gag进行肽库的筛选和细胞免疫反应检测第49-51页
     ·ELISA方法检测体液免疫反应第51-55页
   ·讨论第55-57页
     ·疫苗载体的选择第55页
     ·载体疫苗所携带基因的选择第55-56页
     ·免疫方案和免疫效果的分析第56-57页
   ·本章小结第57-58页
结论第58-60页
参考文献第60-64页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第64-66页
致谢第66页

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