| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-15页 |
| ·肝窦内皮细胞重要生理功能 | 第9-10页 |
| ·多窗孔屏障功能 | 第9页 |
| ·清道夫功能 | 第9页 |
| ·维持肝星状细胞的静止状态 | 第9-10页 |
| ·肝窦毛细血管化分子机制的重要研究意义及潜在价值 | 第10-11页 |
| ·肝窦毛细血管化分子机制的研究进展 | 第11-12页 |
| ·肝窦毛细血管化参与酒精性肝病发生发展 | 第11页 |
| ·肝窦毛细血管化参与门静脉高压与肝硬化的发生发展 | 第11-12页 |
| ·肝窦毛细血管化参与血管增生及恶性肿瘤发生发展 | 第12页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第12-15页 |
| 第2章 肝窦毛细血管化小鼠模型的构建 | 第15-21页 |
| ·材料与方法 | 第15-16页 |
| ·实验动物及造模材料 | 第15页 |
| ·实验动物分组处理 | 第15-16页 |
| ·肝窦内皮细胞透射电镜样本制作及观察 | 第16页 |
| ·Western blot分析 | 第16页 |
| ·结果 | 第16-19页 |
| ·肝脏病理 | 第16-17页 |
| ·肝窦内皮细胞样品透射电镜观察 | 第17-18页 |
| ·Western blot 验证肝窦毛细血管化标志物 | 第18-19页 |
| ·讨论 | 第19-21页 |
| 第3章 肝窦内皮细胞原代分离及其效果评价 | 第21-29页 |
| ·材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料与主要试剂 | 第21页 |
| ·肝窦内皮细胞原位分离及抗体标记 | 第21-22页 |
| ·肝窦内皮细胞原代培养及Ac-LDL胞吞实验 | 第22页 |
| ·肝窦内皮细胞透射电镜形态观察 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-26页 |
| ·原代分离肝窦内皮细胞纯度及污染度评价 | 第23-24页 |
| ·肝窦内皮细胞原代培养形态观察及Ac-LDL胞吞实验验证 | 第24-25页 |
| ·肝窦内皮细胞透射电镜观察验证 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-29页 |
| 第4章 肝窦毛细血管化过程差异蛋白质组的研究 | 第29-41页 |
| ·材料与方法 | 第29-34页 |
| ·材料与主要试剂 | 第29-30页 |
| ·LSEC细胞全蛋白提取 | 第30页 |
| ·蛋白样品前处理 | 第30页 |
| ·蛋白标记 | 第30-31页 |
| ·第一向等电聚焦 | 第31页 |
| ·第二向SDS-PAGE凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·图像分析 | 第32页 |
| ·制备胶及染色 | 第32页 |
| ·差异蛋白胶上酶切肽提取 | 第32-33页 |
| ·差异蛋白的质谱鉴定 | 第33页 |
| ·差异蛋白功能分析和网络分析 | 第33页 |
| ·Western blot分析 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·模型组和对照组小鼠肝窦内皮细胞全蛋白表达的差异 | 第34-35页 |
| ·GeneGO网络分析 | 第35-36页 |
| ·ANP32A与肝窦毛细血管化的关系 | 第36页 |
| ·Western blot验证DIGE定量结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-41页 |
| 第5章 RhoGDI2 对肝窦毛细血管化影响的初步探讨 | 第41-49页 |
| ·材料与方法 | 第41-45页 |
| ·材料与主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·细胞培养、cDNA合成和蛋白提取 | 第42-44页 |
| ·细胞siRNA转染 | 第42-43页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第43页 |
| ·cDNA的合成 | 第43-44页 |
| ·蛋白提取 | 第44页 |
| ·实时定量PCR反应检测细胞中SK-HEP1 的mRNA含量 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·RhoGDI2-siRNA转染效率检测 | 第45-46页 |
| ·RhoGDI2 在细胞株中的表达情况 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录 | 第55-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
