| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-19页 |
| ·模式生物斑马鱼在肿瘤研究中的应用 | 第12-14页 |
| ·斑马鱼研究简介 | 第12页 |
| ·斑马鱼的优势和特点 | 第12-13页 |
| ·斑马鱼在肿瘤研究中的应用 | 第13-14页 |
| ·鱼藤素抗肿瘤作用研究现状 | 第14-16页 |
| ·MCM3-CDC45 与细胞增殖 | 第16-18页 |
| ·本课题研究的主要内容和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 鱼藤素诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖 | 第19-30页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·材料和仪器 | 第19-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·斑马鱼胚胎收集和鱼藤素处理 | 第21页 |
| ·吖啶橙染色 | 第21页 |
| ·TUNEL 检测细胞凋亡 | 第21-22页 |
| ·Phospho Histon3 免疫组化 | 第22-23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-28页 |
| ·鱼藤素延缓斑马鱼胚胎发育 | 第23-26页 |
| ·鱼藤素诱导细胞凋亡 | 第26-28页 |
| ·鱼藤素抑制细胞增殖 | 第28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·小结 | 第29-30页 |
| 第三章 基因微阵列（Microarray）分析鱼藤素加药前后斑马鱼转录组变化 | 第30-45页 |
| ·前言 | 第30-31页 |
| ·材料与仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·鱼藤素处理 2-cell 期胚胎收集 | 第31-32页 |
| ·总 RNA 提取 | 第32页 |
| ·Affymetrix 斑马鱼表达谱芯片检测斑马鱼全基因变化 | 第32页 |
| ·RT-PCR 反转录成 cDNA | 第32-33页 |
| ·PCR 引物设计与合成 | 第33-35页 |
| ·Q-PCR 检测目的基因 | 第35页 |
| ·结果与数据分析 | 第35-44页 |
| ·总 RNA 提取 | 第35-36页 |
| ·斑马鱼全基因变化 | 第36-37页 |
| ·G0 分析 | 第37-40页 |
| ·信号通路分析 | 第40-41页 |
| ·实时荧光定量分析 | 第41-44页 |
| ·讨论 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 原位杂交检测 MCM3 的表达变化 | 第45-62页 |
| ·前言 | 第45页 |
| ·实验材料和实验方法 | 第45-58页 |
| ·实验材料 | 第45-48页 |
| ·MCM3 探针制备 | 第48-55页 |
| ·整胚原位杂交 | 第55-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-61页 |
| ·MCM3 探针制备 | 第58-59页 |
| ·MCM3 在斑马鱼早期的时空表达谱 | 第59页 |
| ·MCM3 表达变化 | 第59-60页 |
| ·Pax2 和 myod 表达变化 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第五章 鱼藤素抑制肿瘤细胞增殖及其与 MCM3-CDC45 表达的相关性 | 第62-71页 |
| ·前言 | 第62页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·主要试剂 | 第62-63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| ·细胞株 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-66页 |
| ·细胞复苏 | 第63-64页 |
| ·细胞计数 | 第64页 |
| ·MTT 法测定鱼藤素对 MCF-7，H1299 细胞的生长抑制作用 | 第64页 |
| ·光学显微镜观察鱼藤素对 MCF-7 和 H1299 肿瘤细胞形态的影响 | 第64页 |
| ·荧光定量 PCR 检测鱼藤素对 MCF-7 和 H1299 细胞中 MCM3-CDC45 表达的变化 | 第64-66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-70页 |
| ·鱼藤素抑制 MCF-7 和 H1299 细胞增殖 | 第66-68页 |
| ·鱼藤素对 MCF-7，H1299 细胞生长状态影响 | 第68页 |
| ·鱼藤素下调 MCF-7、H1299 细胞 MCM3 和 CDC45 的表达 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 总结与展望 | 第71-72页 |
| 1 结论 | 第71页 |
| 2 创新点 | 第71页 |
| 3 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第80页 |
