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非转座子载体介导的转基因家蚕的研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一部分 文献综述第12-51页
 第一章 转基因家蚕的研究进展第12-29页
  1 引言第12-13页
  2 转基因家蚕的制作方法第13-15页
  3 转基因家蚕所用载体第15-22页
   ·基于病毒的载体第15-16页
   ·基于转座子的载体第16-17页
   ·基于基因打靶的载体第17-21页
     ·基因打靶家蚕的研究现状第18-19页
     ·打靶载体的构建第19页
     ·打靶位点与筛选策略第19页
     ·影响打靶效率的因素及提高同源重组效率的方法第19-21页
     ·基因打靶转基因家蚕系统的优点与应用前景第21页
   ·基于非转座子、非打靶载体 pIZT/ V5-His 的载体第21-22页
  参考文献第22-29页
 第二章 人胰岛素样生长因子-I(hIGF-I)的研究进展第29-41页
  1 引言第29页
  2 胰岛素样生长因子的发现第29-30页
  3 胰岛素样生长因子的分子结构第30-32页
  4 胰岛素样生长因子的生物学功能第32-35页
  5 研究展望第35-36页
  参考文献第36-41页
 第三章 果蝇卵巢发育相关基因 ovo 的研究概况第41-51页
  1 概述第41-42页
  2 ovo 位点结构第42-43页
  3 OVO 转录水平的调节第43-47页
  参考文献第47-51页
第二部分 研究报告第51-101页
 第四章 研究目的与研究内容第51-55页
  1 研究目的与意义第51-52页
  2 研究内容第52-53页
  3 技术路线第53-55页
 第五章 实验材料与方法第55-69页
  1 实验材料第55-60页
   ·家蚕、菌种和载体第55页
   ·工具酶第55页
   ·其它试剂第55-56页
   ·培养基第56页
   ·实验常用溶液配置第56-60页
  2 常用仪器第60-61页
  3 常用方法第61-67页
   ·DNA 的酶切反应体系第61页
   ·DNA 的连接反应体系第61-62页
   ·感受态细胞的制备第62页
   ·连接产物的转化第62页
   ·重组质粒的筛选第62页
   ·碱裂解法少量制备质粒 DNA第62-63页
   ·重组质粒的鉴定第63页
   ·目的片段的分离和回收第63页
   ·PCR 扩增目的片段第63页
   ·琼脂糖凝胶电泳第63-64页
   ·蚕蛾(蚕血)基因组的抽提第64页
   ·Dot blot第64页
   ·SDS-PAGE 蛋白质电泳第64-65页
   ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色第65-66页
   ·Western blot第66页
   ·hIGF ELISA 检测第66-67页
  参考文献第67-69页
 第六章 非转座子载体 pIZT/V5-His 介导的转基因家蚕表达 hIGF-I第69-85页
  1 材料与方法第71-74页
   ·材料与试剂第71页
   ·引物第71-72页
   ·方法第72-74页
  2 结果与分析第74-79页
   ·转基因载体 pIZT-hIGF-I 的鉴定第74页
   ·转基因载体 pIZT-hIGF-I 转染家蚕 BmN 细胞的荧光观察第74-75页
   ·转基因家蚕的筛选与鉴定第75-77页
   ·hIGF-I 在转基因家蚕中的表达第77-78页
   ·转基因家蚕表达的 hIGF-I 活性检测第78-79页
  3 讨论第79-81页
  参考文献第81-85页
 第七章 基于基因打靶载体的转基因家蚕的研究第85-101页
  1 材料与方法第87-89页
   ·材料与试剂第87页
   ·引物第87-88页
   ·方法第88-89页
  2 结果与分析第89-97页
   ·基因打靶载体 pSK-ovoL-A3-GFP-IE-neo-ovoR-IE-DsRed 的构建与鉴定第89-91页
   ·转基因家蚕的筛选与鉴定第91-93页
   ·外源基因插入位点的鉴定第93-96页
   ·重组质粒转染家蚕 BmN 细胞的荧光观察第96-97页
  3 讨论第97-98页
  参考文献第98-101页
结论第101-102页
 1 已取得的成果第101页
 2 有待进行的研究第101-102页
附录一 缩略词中英文对照表第102-104页
附录二 实验中使用的部分载体结构图第104-106页
附录三 攻读硕士学位期间发表的文章第106-107页
致谢第107-109页

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