中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-51页 |
第一章 转基因家蚕的研究进展 | 第12-29页 |
1 引言 | 第12-13页 |
2 转基因家蚕的制作方法 | 第13-15页 |
3 转基因家蚕所用载体 | 第15-22页 |
·基于病毒的载体 | 第15-16页 |
·基于转座子的载体 | 第16-17页 |
·基于基因打靶的载体 | 第17-21页 |
·基因打靶家蚕的研究现状 | 第18-19页 |
·打靶载体的构建 | 第19页 |
·打靶位点与筛选策略 | 第19页 |
·影响打靶效率的因素及提高同源重组效率的方法 | 第19-21页 |
·基因打靶转基因家蚕系统的优点与应用前景 | 第21页 |
·基于非转座子、非打靶载体 pIZT/ V5-His 的载体 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-29页 |
第二章 人胰岛素样生长因子-I(hIGF-I)的研究进展 | 第29-41页 |
1 引言 | 第29页 |
2 胰岛素样生长因子的发现 | 第29-30页 |
3 胰岛素样生长因子的分子结构 | 第30-32页 |
4 胰岛素样生长因子的生物学功能 | 第32-35页 |
5 研究展望 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-41页 |
第三章 果蝇卵巢发育相关基因 ovo 的研究概况 | 第41-51页 |
1 概述 | 第41-42页 |
2 ovo 位点结构 | 第42-43页 |
3 OVO 转录水平的调节 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
第二部分 研究报告 | 第51-101页 |
第四章 研究目的与研究内容 | 第51-55页 |
1 研究目的与意义 | 第51-52页 |
2 研究内容 | 第52-53页 |
3 技术路线 | 第53-55页 |
第五章 实验材料与方法 | 第55-69页 |
1 实验材料 | 第55-60页 |
·家蚕、菌种和载体 | 第55页 |
·工具酶 | 第55页 |
·其它试剂 | 第55-56页 |
·培养基 | 第56页 |
·实验常用溶液配置 | 第56-60页 |
2 常用仪器 | 第60-61页 |
3 常用方法 | 第61-67页 |
·DNA 的酶切反应体系 | 第61页 |
·DNA 的连接反应体系 | 第61-62页 |
·感受态细胞的制备 | 第62页 |
·连接产物的转化 | 第62页 |
·重组质粒的筛选 | 第62页 |
·碱裂解法少量制备质粒 DNA | 第62-63页 |
·重组质粒的鉴定 | 第63页 |
·目的片段的分离和回收 | 第63页 |
·PCR 扩增目的片段 | 第63页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第63-64页 |
·蚕蛾(蚕血)基因组的抽提 | 第64页 |
·Dot blot | 第64页 |
·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第64-65页 |
·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第65-66页 |
·Western blot | 第66页 |
·hIGF ELISA 检测 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-69页 |
第六章 非转座子载体 pIZT/V5-His 介导的转基因家蚕表达 hIGF-I | 第69-85页 |
1 材料与方法 | 第71-74页 |
·材料与试剂 | 第71页 |
·引物 | 第71-72页 |
·方法 | 第72-74页 |
2 结果与分析 | 第74-79页 |
·转基因载体 pIZT-hIGF-I 的鉴定 | 第74页 |
·转基因载体 pIZT-hIGF-I 转染家蚕 BmN 细胞的荧光观察 | 第74-75页 |
·转基因家蚕的筛选与鉴定 | 第75-77页 |
·hIGF-I 在转基因家蚕中的表达 | 第77-78页 |
·转基因家蚕表达的 hIGF-I 活性检测 | 第78-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-85页 |
第七章 基于基因打靶载体的转基因家蚕的研究 | 第85-101页 |
1 材料与方法 | 第87-89页 |
·材料与试剂 | 第87页 |
·引物 | 第87-88页 |
·方法 | 第88-89页 |
2 结果与分析 | 第89-97页 |
·基因打靶载体 pSK-ovoL-A3-GFP-IE-neo-ovoR-IE-DsRed 的构建与鉴定 | 第89-91页 |
·转基因家蚕的筛选与鉴定 | 第91-93页 |
·外源基因插入位点的鉴定 | 第93-96页 |
·重组质粒转染家蚕 BmN 细胞的荧光观察 | 第96-97页 |
3 讨论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-101页 |
结论 | 第101-102页 |
1 已取得的成果 | 第101页 |
2 有待进行的研究 | 第101-102页 |
附录一 缩略词中英文对照表 | 第102-104页 |
附录二 实验中使用的部分载体结构图 | 第104-106页 |
附录三 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-109页 |