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雪貂螺杆菌α1,2岩藻糖基转移酶酶学性质的研究及H-typeV抗原的合成

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
符号说明第14-16页
第一章 绪论第16-33页
   ·糖抗原第17-18页
     ·ABO血型抗原第17页
     ·肿瘤糖抗原第17-18页
   ·细菌细胞生物多糖及其生物合成第18-21页
     ·细菌细胞表面多糖的种类第18-20页
     ·细菌多糖的生物合成第20-21页
   ·糖基转移酶的介绍第21-29页
     ·分类与机理第22-23页
     ·原核来源的α1,2-岩藻糖基转移酶第23-29页
   ·结构性均一的寡糖的合成第29-33页
     ·寡糖的化学合成第29-31页
     ·寡糖的酶法合成第31-33页
第二章 实验材料和仪器第33-36页
   ·实验材料第33-34页
     ·实验所用的载体和菌株第33页
     ·培养基和溶液第33-34页
   ·实验所用的试剂与耗材第34-35页
   ·实验仪器第35-36页
第三章 实验方法第36-45页
   ·pET15b-HmFucT在E.coli DE3(BL21)中的表达第36-39页
     ·雪貂螺杆菌来源的HmFucT基因的优化合成第36页
     ·pET15b-HmFucT载体的构建第36-38页
     ·pET15b-HmFucT蛋白的表达纯化第38-39页
     ·重组蛋白pET15b-HmFucT的Western-Blot分析第39页
   ·pGEX-4-1-HmFucT在Ecoli DE3(BL21)中的表达第39-43页
     ·pGEX-4-1-HmFucT载体的构建第39-41页
     ·pGEX-4-1-HmFucT的蛋白表达纯化第41-43页
   ·HmFucT活性的鉴定第43-45页
     ·TLC检测HmFucT岩藻糖基转移酶的活性第43页
     ·金属离子对HmFucT的影响第43-44页
     ·酶法合成岩藻糖基化的产物以及产物的分析第44-45页
第四章 结果与分析第45-55页
   ·HmFucT蛋白的基本性质及蛋白可溶性的预测第45-46页
   ·HmFucT与原核来源的α1,2岩藻糖基转移酶的序列比对第46页
   ·pET15b-HmFucT在E.coli DE3(BL21)中的表达第46-48页
     ·pET15b-HmFucT载体的构建及蛋白纯化第46-47页
     ·pET15b-HmFucT的诱导表达随时间的变化第47页
     ·重组蛋白pET15b-HmFucT的纯化第47-48页
     ·重组蛋白pET15b-HmFucT的Western-Blot分析第48页
   ·pGEX-4-1-HmFucT在E.coli DE3(BL21)中的表达第48-50页
     ·pGEX-4-1-HmFucT载体的构建第48-49页
     ·pGEX-4-1-HmFucT诱导表达随时间的变化第49-50页
     ·重组蛋白pGEX-4T-1-HmFucT的蛋白纯化第50页
   ·HmFucT活性的鉴定第50-55页
     ·金属离子对HmFucT的影响第50-51页
     ·LC-MS检测岩藻糖基转移酶的活性第51-52页
     ·TLC/MS检测HmFucT的底物特异性第52页
     ·酶法合成岩藻基化寡糖以及产物鉴定第52-55页
第五章 讨论第55-58页
全文总结第58-59页
附录与附图第59-66页
 1. 质粒图谱第60-62页
 2. 岩藻糖基化lactose,lactose-S-ph,LacMU ESI-MS(+Q)的检测结果第62-64页
 3. 岩藻糖基化lactose-S-ph的LC-MS鉴定结果第64-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
攻读学位期间发表的论文第73-74页
学位论文评阅及答辩情况表第74页

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