| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 第一部分 噬菌体展示技术筛选脑靶向功能肽 | 第21-61页 |
| 第一章 环七肽库体内筛选脑靶向功能性短肽 | 第21-48页 |
| 1 仪器和材料 | 第21-24页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| ·材料和试剂 | 第22-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-30页 |
| ·ER2738菌的活化 | 第24页 |
| ·ER2738菌生长曲线绘制 | 第24页 |
| ·ER2738活化菌的准备 | 第24-25页 |
| ·噬菌体随机展示文库的扩增纯化 | 第25页 |
| ·噬菌体滴度测定 | 第25页 |
| ·噬菌体展示文库小鼠体内筛选技术路线 | 第25-26页 |
| ·不同筛选条件下的噬菌体展示 | 第26-28页 |
| ·噬菌体随机展示文库的体内筛选 | 第28页 |
| ·单克隆噬菌斑的扩增 | 第28-29页 |
| ·备选单克隆噬菌体的入脑验证 | 第29页 |
| ·单克隆噬菌体DNA提取 | 第29-30页 |
| ·单克隆噬菌体DNA测序和序列分析 | 第30页 |
| ·多肽合成 | 第30页 |
| ·荧光标记肽在裸鼠体内分布的考察 | 第30页 |
| ·统计学处理 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-45页 |
| ·ER2738菌生长曲线绘制 | 第30-31页 |
| ·噬菌体展示筛选条件的优化 | 第31-34页 |
| ·噬菌体入脑的时间效应 | 第34-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第二章 十二肽库体内筛选脑靶向功能性短肽 | 第48-59页 |
| 1 仪器和材料 | 第48页 |
| ·仪器 | 第48页 |
| ·材料和试剂 | 第48页 |
| 2 实验方法 | 第48-51页 |
| ·E.coli ER2738菌的活化和准备 | 第48页 |
| ·噬菌体展示文库小鼠体内筛选的技术路线 | 第48-49页 |
| ·回收噬菌体的滴度测定 | 第49页 |
| ·回收噬菌体的扩增纯化 | 第49页 |
| ·单克隆噬菌斑DNA提取及序列分析 | 第49-50页 |
| ·单克隆噬菌体的脑靶向性验证 | 第50页 |
| ·多肽合成 | 第50页 |
| ·合成多肽的靶向性验证 | 第50-51页 |
| ·统计学处理 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-58页 |
| ·十二肽库噬菌体的体内筛选 | 第51页 |
| ·单克隆噬菌体DNA测序和序列分析 | 第51-54页 |
| ·单克隆噬菌体的脑靶向性验证 | 第54-56页 |
| ·展示肽/噬菌体竞争实验 | 第56-57页 |
| ·荧光标记TGN肽在裸鼠体内分布的考察 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58页 |
| 5 本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 第二部分 噬菌体展示肽修饰聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸纳米粒的脑内递药研究 | 第61-163页 |
| 第一章 噬菌体展示肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸纳米粒的构建及脑内靶向性初步评价 | 第61-83页 |
| 第一节 噬菌体展示肽修饰的聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸纳米粒的构建和表征 | 第62-74页 |
| 1 仪器和材料 | 第62-64页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·材料和试剂 | 第62-63页 |
| ·溶液配制 | 第63-64页 |
| 2 实验方法 | 第64-68页 |
| ·共聚物的合成与表征 | 第64-65页 |
| ·聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸纳米粒的制备 | 第65页 |
| ·噬菌体展示肽修饰PEG-PLGA纳米粒的制备 | 第65-66页 |
| ·噬菌体展示肽修饰纳米粒制备的处方工艺优化 | 第66页 |
| ·NP和TGN-NP的表征 | 第66-68页 |
| 3 实验结果 | 第68-74页 |
| ·共聚物的表征 | 第68页 |
| ·噬菌体展示肽修饰纳米粒制备的处方优化 | 第68-71页 |
| ·纳米粒的粒径及Zeta电位 | 第71-72页 |
| ·TGN的BCA标准曲线 | 第72页 |
| ·TGN-NP浊度曲线 | 第72页 |
| ·表面元素分析 | 第72-74页 |
| 第二节 TGN肽和CTY肽修饰纳米粒体内分布的初步考察 | 第74-81页 |
| 1 仪器和材料 | 第74页 |
| ·仪器 | 第74页 |
| ·材料和试剂 | 第74页 |
| ·实验动物 | 第74页 |
| 2 实验方法 | 第74-75页 |
| ·载DiR的纳米粒制备 | 第74-75页 |
| ·DiR的泄漏实验 | 第75页 |
| ·活体成像观察载DiR的不同纳米粒裸鼠脑内递药特性 | 第75页 |
| ·活体成像半定量比较载DiR纳米粒裸鼠脑内递药特性 | 第75页 |
| 3 实验结果 | 第75-80页 |
| ·载DiR纳米粒的表征 | 第75-76页 |
| ·DiR纳米粒的体外泄漏 | 第76页 |
| ·活体成像观察 | 第76-79页 |
| ·活体成像的半定量分析 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80页 |
| 5 小结 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第二章 TGN-NP脑内递药特性及毒性的体外评价 | 第83-109页 |
| 1 仪器和材料 | 第83-84页 |
| ·仪器 | 第83页 |
| ·材料和试剂 | 第83-84页 |
| 2 实验方法 | 第84-90页 |
| ·香豆素-6体外分析方法的建立 | 第84-85页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6的制备与表征 | 第85-86页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6的体外泄漏实验 | 第86-87页 |
| ·定性观察bEnd.3细胞摄取NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6 | 第87-88页 |
| ·定量分析bEnd.3细胞摄取NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6 | 第88-90页 |
| ·体外毒性考察 | 第90页 |
| 3 实验结果 | 第90-104页 |
| ·香豆素-6体外HPLC分析方法的建立 | 第90-92页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6体外泄漏实验 | 第92-93页 |
| ·定性观察bEnd.3细胞摄取NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6 | 第93-98页 |
| ·定量分析bEnd.3细胞摄取NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6 | 第98-101页 |
| ·体外毒性考察 | 第101-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| 5 小结 | 第106页 |
| 参考文献 | 第106-109页 |
| 第三章 TGN-NP脑内递药特性及毒性的体内评价 | 第109-135页 |
| 1 仪器和材料 | 第109-110页 |
| ·仪器 | 第109页 |
| ·材料和试剂 | 第109-110页 |
| ·实验动物 | 第110页 |
| 2 实验方法 | 第110-114页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6的制备与表征 | 第110页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6脑内分布的定性观察 | 第110页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6在小鼠脑和血中药动学及组织分布研究 | 第110-113页 |
| ·TGN-NP体内急性毒性考察 | 第113-114页 |
| 3 实验结果 | 第114-133页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6脑内分布的定性观察 | 第114-115页 |
| ·NP/Cou-6和TGN-NP/Cou-6体内分布的定量测定 | 第115-128页 |
| ·体内急性毒性考察 | 第128-133页 |
| 4 讨论 | 第133页 |
| 5 小结 | 第133页 |
| 参考文献 | 第133-135页 |
| 第四章 TGN-NP治疗老年性痴呆的药效学评价 | 第135-163页 |
| 第一节 TGN肽修饰载NAP纳米粒的制备与性质考察 | 第135-140页 |
| 1 仪器和材料 | 第135-136页 |
| ·仪器 | 第136页 |
| ·材料和试剂 | 第136页 |
| 2 实验方法 | 第136-137页 |
| ·NP中NAP的体外分析方法建立与评价 | 第136-137页 |
| ·NP/NAP的制备与表征 | 第137页 |
| ·TGN-NP/NAP的制备与表征 | 第137页 |
| 3 实验结果 | 第137-140页 |
| ·NP中NAP体外分析方法的建立与评价 | 第138-139页 |
| ·NP/NAP、TGN-NP/NAP的表征 | 第139-140页 |
| 第二节 TGN-NP/NAP对阿尔茨海默模型小鼠的药效学研究 | 第140-159页 |
| 1 仪器和材料 | 第142-143页 |
| ·仪器 | 第142页 |
| ·材料和试剂 | 第142页 |
| ·实验动物 | 第142页 |
| ·NP/NAP及TGN-NP/NAP的制备 | 第142页 |
| ·Aβ_(1-40)的老化 | 第142-143页 |
| 2 实验方法 | 第143-147页 |
| ·海马内注射Aβ肽构建小鼠AD模型 | 第143页 |
| ·实验分组与治疗方案 | 第143页 |
| ·小鼠Morris水迷宫试验 | 第143-144页 |
| ·小鼠脑部皮层和海马TChE活力的测定 | 第144-145页 |
| ·小鼠脑部皮层与海马ChAT活力的测定 | 第145-146页 |
| ·形态学观察 | 第146-147页 |
| ·统计分析 | 第147页 |
| 3 实验结果 | 第147-158页 |
| ·小鼠Morris水迷宫的定位航行实验 | 第147-148页 |
| ·小鼠Morris水迷宫的探索实验 | 第148-151页 |
| ·小鼠海马和皮层匀浆中TChE活力测定 | 第151-152页 |
| ·小鼠脑部皮层与海马ChAT活力测定 | 第152-153页 |
| ·苏木精-伊红染色结果 | 第153-156页 |
| ·Aβ斑块染色结果 | 第156-158页 |
| 4 讨论 | 第158-159页 |
| 5 本章小结 | 第159页 |
| 参考文献 | 第159-163页 |
| 全文总结 | 第163-165页 |
| 主要创新点 | 第165-166页 |
| 后续工作及展望 | 第166-167页 |
| 综述 | 第167-177页 |
| 参考文献 | 第175-177页 |
| 中英文缩写对照(Abbreviation) | 第177-178页 |
| 附录 | 第178-180页 |
| 致谢 | 第180-182页 |
