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拟无枝菌酸菌CP2808中Ansacarbamitocins的生物合成

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第1章 美登素类化合物研究进展(综述)第8-30页
   ·美登素类抗生素概述第8-17页
     ·美登素的生物资源第8-9页
     ·生物活性第9-12页
     ·生物代谢第12-14页
     ·美登素在抗体靶向结合技术中的应用第14-17页
   ·美登素类抗生素的生物合成第17-25页
     ·AHBA 的生物合成第18-19页
     ·安丝菌素前体的合成第19-21页
     ·甲氧基丙二酰-酰基载体蛋白的生物合成第21-22页
     ·后修饰反应第22-25页
   ·新一类衍生物ansacarbamitocins第25-27页
   ·试验目的、意义及内容第27-30页
     ·本研究的目的和意义第27-28页
     ·本研究主要内容第28-30页
第2章 材料与方法第30-50页
   ·实验菌种与质粒第30-32页
   ·实验试剂第32-35页
     ·培养基第32-33页
     ·实验试剂第33-35页
     ·抗生素及诱导剂第35页
   ·实验方法第35-50页
     ·菌体培养与菌种保藏第35-36页
     ·大肠杆菌质粒DNA 大量提取第36页
     ·放线菌总DNA 的少量提取第36-37页
     ·Fosmid 文库建立第37-40页
     ·基因组文库筛选第40-41页
     ·DNA 沉淀第41页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳第41页
     ·DNA 片段凝胶回收第41-42页
     ·DNA 片段的酶切与连接第42页
     ·钙转感受态的DNA 转化第42页
     ·电转感受态细胞制备及DNA 转化第42-43页
     ·Redirect 技术第43-45页
     ·Actinosynnema pretiosum 菌株的接合转移第45-47页
     ·Actinosynnema pretiosum 菌株的发酵与产物检测第47页
     ·Amycolatopsis sp. CP2808 菌株的接合转移操作第47-48页
     ·Amycolatopsis sp. CP2808 菌株的发酵与产物检测第48-50页
第3章 Ansacarbamitocins 生物合成基因簇的克隆第50-76页
   ·前言第50-51页
   ·结果与分析第51-71页
     ·Amycolatopsis sp. CP2808 基因组文库的构建第51-54页
     ·带有AHBA 合成酶基因的克隆筛选与验证第54-66页
     ·合成基因簇的染色体步移筛选第66-71页
   ·小结与讨论第71-76页
     ·小结第71-72页
     ·讨论第72-76页
第4章 Ansacarbamitocins 生物合成基因簇的分析第76-92页
   ·前言第76页
   ·结果与分析第76-90页
     ·阳性克隆序列信息的整合第76-77页
     ·基因簇序列分析第77-87页
     ·与安丝菌素合成基因簇的比较第87-90页
   ·小结与讨论第90-92页
     ·小结第90-91页
     ·讨论第91-92页
第5章 Ansacarbamitocins 生物合成后修饰途径的研究第92-104页
   ·前言第92页
   ·实验结果与分析第92-101页
     ·基因置换质粒构建第92-93页
     ·acm21a 突变株的构建与验证第93-96页
     ·acm21b突变株的构建与验证第96-98页
     ·acm21ab 突变株的构建与验证第98-99页
     ·acm25 突变株的构建与验证第99-101页
   ·小结与讨论第101-104页
     ·小结第101页
     ·讨论第101-104页
第6章 AHBA合成酶在安丝菌素生物合成过程中的相关性第104-112页
   ·前言第104页
   ·实验结果与分析第104-110页
     ·A. pretiosum 中AHBA 合成酶的生物信息学功能分析第104-105页
     ·asm24 中断突变株的构建与验证第105-107页
     ·asm43 中断突变株的构建与验证第107页
     ·asm24 与asm43 突变株的发酵检测第107-109页
     ·asm24、asm43 双缺失突变株的构建第109-110页
   ·小结与讨论第110-112页
     ·小结第110页
     ·讨论第110-112页
第7章 总结与展望第112-116页
   ·总结第112页
   ·后续工作第112-113页
   ·展望第113-116页
参考文献第116-122页
致谢第122-124页

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