| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-39页 |
| 1 苏云金芽孢杆菌 | 第10-14页 |
| 1．1 研究历史 | 第10-11页 |
| 1．2 血清学分类 | 第11页 |
| 1．3 作用机制和范围 | 第11-14页 |
| 1．4 工业化生产 | 第14页 |
| 2 几丁质 | 第14-16页 |
| 3 几丁质酶 | 第16-37页 |
| 3．1 研究历史 | 第17-18页 |
| 3．2 植物几丁质酶 | 第18-24页 |
| 3．2．1 产生几丁质酶的植物种类及其几丁质酶分布 | 第18页 |
| 3．2．2 植物几丁质酶的生化性质 | 第18-19页 |
| 3．2．3 植物几丁质酶的分类 | 第19-21页 |
| 3．2．4 植物几丁质酶的分子生物学研究进展 | 第21-23页 |
| 3．2．5 几丁质酶应用于生物防治 | 第23-24页 |
| 3．3 微生物几丁质酶 | 第24-37页 |
| 3．3．1 分布 | 第24-25页 |
| 3．3．2 性质 | 第25-27页 |
| 3．3．3 研究进展 | 第27-36页 |
| 3．3．4 在害虫防治中的应用 | 第36页 |
| 3．3．5 对害虫防治的增效机理 | 第36-37页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 材料与方法 | 第39-56页 |
| 1 菌株 | 第39页 |
| 2 培养基 | 第39页 |
| 3 几丁质的处理 | 第39页 |
| 4 几丁质酶产生菌株的筛选 | 第39页 |
| 5 几丁质酶合成的培养条件 | 第39页 |
| 6 酶活力测定 | 第39-40页 |
| 7 总DNA的提取 | 第40页 |
| 8 总DNA的定性定量 | 第40-41页 |
| 9 PCR扩增 | 第41-45页 |
| 10 PCR扩增产物的回收纯化 | 第45-46页 |
| 11 DNA标记和检测 | 第46-48页 |
| 12 几丁质酶基因克隆载体pT-CHI的构建 | 第48-49页 |
| 13 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 14 连接反应物对宿主感受态细胞的转化和筛选 | 第49-50页 |
| 15 微量碱裂解法提取质粒 | 第50-51页 |
| 16 重组质粒的酶切分析 | 第51-52页 |
| 17 从琼脂糖凝胶中回收核酸 | 第52页 |
| 18 chiA基因的原核表达载体构建 | 第52-54页 |
| 19 融合蛋白的诱导表达 | 第54-56页 |
| 结果与分析 | 第56-68页 |
| 1 菌株筛选 | 第56页 |
| 2 WB-50的产酶条件实验 | 第56-59页 |
| 2．1 氮源对酶合成的影响 | 第56-57页 |
| 2．2 碳源对酶合成的影响 | 第57页 |
| 2．3 诱导物质对酶合成的影响 | 第57-58页 |
| 2．4 培养时间对酶合成的影响 | 第58-59页 |
| 2．5 培养基初始pH对酶合成的影响 | 第59页 |
| 2．6 培养温度对酶合成的影响 | 第59页 |
| 3 WB-50几丁质酶基因部分片段的扩增 | 第59-60页 |
| 4 序列测定及同源性分析结果 | 第60-62页 |
| 5 Bt菌株的几丁质酶基因PCR鉴定 | 第62-63页 |
| 6 几丁质酶基因编码区扩增结果 | 第63页 |
| 7 Southern杂交验证QCL1／QCL2扩增的几丁质酶基因 | 第63-65页 |
| 7．1 DNA DIG标记 | 第63-64页 |
| 7．2 杂交 | 第64-65页 |
| 8 几丁质酶基因的克隆 | 第65-66页 |
| 9 原核表达载体的构建 | 第66-67页 |
| 10 融合蛋白的诱导表达 | 第67-68页 |
| 讨论 | 第68-72页 |
| 1 Bt是一个独立的种？ | 第68页 |
| 2 胶体几丁质的制备方法 | 第68-69页 |
| 3 利用平板来筛选几丁质酶的可靠性 | 第69-70页 |
| 4 充分利用生物信息学资源 | 第70-71页 |
| 5 下一步工作 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78页 |