| 目录 | 第1-7页 |
| 图像索引 | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 导论(含文献综述) | 第13-24页 |
| 1. 香烟在肺癌发生中的重要性 | 第14-15页 |
| 2. 肺癌演变过程中的遗传学改变及与吸烟的相关性研究 | 第15-18页 |
| 3. 肺癌演变过程中的蛋白质分子改变及与吸烟的相关性研究 | 第18-21页 |
| 4. 存在的问题和OLC1前期的相关工作基础 | 第21-22页 |
| 5. 本课题的研究目的和研究策略 | 第22-24页 |
| 第二章 肺癌中OLC1与BRCA1蛋白相互作用的研究 | 第24-42页 |
| 一、实验结果 | 第24-34页 |
| 1. OLC1原核蛋白的表达纯化 | 第24-25页 |
| 2. OLC1与BRCA1蛋白相互作用的确定与细胞定位 | 第25-27页 |
| ·OLC1与BRCA1蛋白相互作用的确定 | 第25-26页 |
| ·OLC1与BRCA1蛋白相互作用的细胞定位 | 第26-27页 |
| 3. OLC1过表达对BRCA1 mRNA和蛋白的影响 | 第27-30页 |
| ·稳转OLC1对BRCA1 mRNA的影响 | 第27-28页 |
| ·稳转OLC1对BRCA1蛋白的影响 | 第28页 |
| ·瞬转OLC1对BRCA1蛋白的影响 | 第28页 |
| ·siRNA敲降OLC1对BRCA1蛋白的影响 | 第28-30页 |
| ·瞬转不同OLC1缺失突变体对BRCA1蛋白水平的影响 | 第30页 |
| 4. OLC1高表达对BRCA1蛋白泛素化降解的影响 | 第30-32页 |
| 5. 肺癌组织中OLC1与BRCA1蛋白的表达相关性 | 第32-34页 |
| 二、讨论 | 第34-42页 |
| 1. 肿瘤中的蛋白质相互作用研究的策略和意义 | 第34-36页 |
| 2. OLC1与BRCA1蛋白相互作用 | 第36-39页 |
| 3. OLC1高表达促进了BRCA1蛋白的泛素化降解过程 | 第39-40页 |
| 4. 肺癌组织免疫化学染色对体外实验的验证 | 第40-42页 |
| 第三章 肺癌中OLC1与香烟的相关性研究 | 第42-61页 |
| 一、实验结果 | 第42-51页 |
| 1. CSC细胞毒性实验 | 第42-43页 |
| 2. CSC对OLC1表达水平的影响 | 第43-44页 |
| ·CSC刺激引起OLC1蛋白水平上调 | 第43-44页 |
| ·CSC刺激对OLC1 mRNA水平无明显影响 | 第44页 |
| 3. CSC对OLC1蛋白泛素化降解的影响 | 第44-46页 |
| ·CSC抑制了OLC1蛋白的泛素化降解 | 第44-45页 |
| ·CSC抑制APC E3连接酶对OLC1蛋白的泛素化降解 | 第45-46页 |
| 4. B[a]P对OLC1表达水平的影响 | 第46-48页 |
| ·OLC1启动子区转录因子结合位点分析 | 第46-47页 |
| ·B[a]P刺激对OLC1 mRNA水平无明显影响 | 第47-48页 |
| ·B[a]P刺激不引起OLC1蛋白表达水平的上调 | 第48页 |
| 5. 肺癌组织中OLC1与APC2蛋白的表达相关性分析 | 第48-50页 |
| 6. CSC引起的OLC1升高对BRCA1蛋白的影响 | 第50-51页 |
| 二、讨论 | 第51-61页 |
| 1. 香烟与肺癌的关系 | 第51-52页 |
| 2. CSC的制备及在肺癌研究中的意义 | 第52-53页 |
| 3. CSC对OLC1 mRNA和蛋白水平的影响 | 第53页 |
| 4. CSC对OLC1泛素化降解过程的影响 | 第53-57页 |
| ·CSC抑制OLC1蛋白的泛素化降解过程 | 第53-55页 |
| ·CSC阻碍APC E3连接_酶对OLC1蛋白的泛素化降解 | 第55-57页 |
| 5. B[a]P与OLC1的相关性研究 | 第57-58页 |
| 6. 肺癌组织免疫化学染色与体外实验的对比分析 | 第58-59页 |
| 7. 香烟刺激对OLC1和BRCA1蛋白的影响 | 第59-61页 |
| 第四章 材料和方法 | 第61-79页 |
| 一、实验材料 | 第61-70页 |
| 1. 细胞系 | 第61页 |
| 2. 肺癌患者组织标本及其相关信息 | 第61-62页 |
| 3. 菌株、质粒载体及病毒载体 | 第62-64页 |
| 4. 实时荧光定量PCR引物序列 | 第64页 |
| 5. 抗体 | 第64-65页 |
| 6. 主要试剂 | 第65-67页 |
| 7. 常用试剂的配制 | 第67-69页 |
| 8. 主要仪器和耗材 | 第69-70页 |
| 9. 主要分析软件 | 第70页 |
| 二、实验方法 | 第70-79页 |
| 1. 分子生物学方法 | 第70-75页 |
| 2. 细胞生物学方法 | 第75-77页 |
| 3. 香烟凝集物CSC的制备 | 第77页 |
| 4. 细胞免疫荧光染色 | 第77页 |
| 5. 免疫组织化学染色 | 第77-78页 |
| 6. 统计学分析 | 第78-79页 |
| 全文总结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-92页 |
| 综述 | 第92-107页 |
| 参考文献 | 第102-107页 |
| 致谢 | 第107-109页 |
