双孢蘑菇品种间RAPD遗传多样性与亲缘关系的研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-24页 |
| 1 双孢蘑菇的概况 | 第11-13页 |
| ·蘑菇的营养价值 | 第11-12页 |
| ·国际形势 | 第12页 |
| ·我国现状 | 第12-13页 |
| 2 可用于蘑菇的分类研究方法 | 第13-18页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·传统方法 | 第13-14页 |
| ·同工酶标记技术 | 第14页 |
| ·DNA分子标记 | 第14-18页 |
| ·1 RAPD标记 | 第15页 |
| ·SCAR标记 | 第15-16页 |
| ·ALFP标记 | 第16页 |
| ·RFLP标记 | 第16页 |
| ·SSR技术 | 第16-17页 |
| ·ISSR技术 | 第17页 |
| ·SRAP技术 | 第17-18页 |
| 3 RAPD技术在食用菌中的应用 | 第18-22页 |
| ·RAPD技术原理 | 第18页 |
| ·RAPD技术的优点 | 第18-19页 |
| ·RAPD技术在食用菌中的应用 | 第19-22页 |
| ·亲本菌株的鉴定及亲缘关系和遗传多样性研究 | 第19-20页 |
| ·杂交种和种质鉴定研究 | 第20页 |
| ·基因定位、分离与克隆研究 | 第20-21页 |
| ·遗传图谱的建立 | 第21-22页 |
| 4 本实验的内容、路线及存在问题 | 第22-24页 |
| ·内容 | 第22页 |
| ·研究的技术路线 | 第22页 |
| ·本实验存在的问题和技术难点 | 第22-24页 |
| ·DNA提取中存在的困难 | 第22页 |
| ·RAPD技术的缺陷及弥补措施 | 第22-24页 |
| 第二章 材料的收集及准备 | 第24-28页 |
| 1 材料的收集 | 第24页 |
| ·材料及其背景的研究 | 第24页 |
| ·收集整理 | 第24页 |
| 2 仪器与试剂 | 第24-27页 |
| ·主要仪器 | 第24-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·DNA提取试剂 | 第26页 |
| ·PCR试剂 | 第26页 |
| ·电泳试剂 | 第26-27页 |
| 3 讨论与小结 | 第27-28页 |
| ·对收集材料的前处理 | 第27页 |
| ·烘干的注意事项 | 第27页 |
| ·试剂的存放和处理 | 第27-28页 |
| 第三章 双孢蘑菇DNA的提取 | 第28-37页 |
| 1 DNA提取方法的比较和优化 | 第28-32页 |
| ·常用提取方法及比较 | 第28-29页 |
| ·DNA提取方法的选定、优化及验证 | 第29-32页 |
| ·DNA提取方法的选定 | 第29页 |
| ·对CTAB提取法的优化 | 第29-31页 |
| ·用试剂盒提取法验证 | 第31-32页 |
| 2 DNA提取质量的验证 | 第32-35页 |
| ·纯度和浓度 | 第32-34页 |
| ·DNA电泳 | 第34页 |
| ·18S rDNA-PCR验证 | 第34-35页 |
| 3 讨论与小结 | 第35-37页 |
| ·DNA提取质量的重要性 | 第35页 |
| ·DNA的验证实验 | 第35-36页 |
| ·DNA的储存方法 | 第36-37页 |
| 第四章 RAPD最佳反应条件的确立 | 第37-44页 |
| 1 反应参数的建立 | 第37-38页 |
| ·延伸时间的优化 | 第37页 |
| ·退火温度的优化 | 第37-38页 |
| 2 反应体系的优化 | 第38-42页 |
| ·Mg~(2+)浓度对RAPD扩增的影响 | 第38-39页 |
| ·Taq酶浓度对RAPD扩增的影响 | 第39-40页 |
| ·dNTPs浓度对RAPD扩增的影响 | 第40页 |
| ·引物浓度对RAPD扩增的影响 | 第40-42页 |
| ·模板DNA浓度对RAPD扩增的影响 | 第42页 |
| 3 最佳反应条件和体系的确立 | 第42页 |
| 4 讨论与小结 | 第42-44页 |
| 第五章 RAPD扩增及数据统计 | 第44-54页 |
| 1 RAPD扩增及位点多态性 | 第44页 |
| 2 聚类分析及遗传图谱的建立 | 第44-50页 |
| ·实验数据统计方法 | 第44页 |
| ·实验数据处理步骤 | 第44-47页 |
| ·相似性系数矩形阵和遗传图谱的建立 | 第47-50页 |
| ·相似性系数矩形阵 | 第47页 |
| ·聚类结果分析及品种划分 | 第47-50页 |
| 3 特异带指纹图谱的建立 | 第50-51页 |
| 4 带型组合指纹图谱 | 第51-52页 |
| 5 讨论与小结 | 第52-54页 |
| ·实验数据的取舍 | 第52页 |
| ·实验结论的准确性 | 第52页 |
| ·实验结果的应用及意义 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 附录A | 第59-61页 |
| 附录B | 第61-67页 |
| 术语与略语表 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |