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翅鳞伞(Pholiota squarrosa)AS5.245胞内蛋白PSPB-2的分离纯化及其生物学活性的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩写符号第12-13页
第一章 文献综述第13-33页
 1 食药用真菌的研究进展第13-14页
 2 核糖体失活蛋白第14-18页
   ·蓖麻蛋白(Ricin)第15-16页
   ·天花粉蛋白(TCS)第16-17页
   ·核糖体失活蛋白的作用机理第17-18页
 3 在蕈菌中发现的具有抗肿瘤活性的蛋白第18-19页
 4 肿瘤细胞凋亡的研究进展第19-21页
 5 细胞坏死第21-24页
   ·引起细胞坏死的原因第22页
   ·细胞坏死机制第22-24页
   ·坏死的调控对于治疗的意义第24页
 6 常用的检测细胞方法细胞第24-26页
   ·荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜检测法第24-25页
   ·线粒体膜势能的检测第25页
   ·TUNEL法第25-26页
 7 抗肿瘤细胞增殖筛选的方法第26-28页
   ·分子水平筛选模型第26-27页
   ·细胞水平筛选模型第27页
   ·疾病动物模型、转基因和基因敲除动物模型第27-28页
 8 本研究的目的第28-29页
 参考文献第29-33页
第二章 翅鳞伞AS5.245蛋白的生物学活性研究第33-42页
 1 材料和方法第33-35页
   ·材料和试剂第33-34页
   ·试剂配制和培养基第34-35页
 2 实验方法第35-38页
   ·翅鳞伞发酵培养第35页
   ·翅鳞伞[Pholiota squarrosa]胞外蛋白液制备第35-36页
   ·翅鳞伞[Pholiota squarrosa]发酵菌丝体提取液的制备第36页
   ·硫酸铵沉淀法翅鳞伞发酵产物中的蛋白第36页
   ·透析第36页
   ·活性液浓缩第36页
   ·翅鳞伞胞内、胞外蛋白对真菌毒力测定第36-37页
   ·细胞复苏第37页
   ·细胞传代第37页
   ·翅鳞伞蛋白抑制人肺癌细胞株(A549)增殖的体外实验第37页
   ·翅鳞伞蛋白作用人肺癌细胞株(A549)的形态学观察第37-38页
 3 结果与讨论第38-40页
   ·翅鳞伞蛋白对不同菌株的毒力测定第38页
   ·翅鳞伞蛋白抑制人肺癌细胞株(A549)体外抑制增殖实验第38-39页
   ·翅鳞伞蛋白作用人肺癌细胞株(A549)形态学观察第39-40页
 4 本章小结第40-41页
 参考文献第41-42页
第三章 翅鳞伞胞内抗肿瘤蛋白的分离纯化第42-53页
 1 材料和方法第42-46页
   ·主要实验材料第42-43页
   ·方法第43-46页
 2 结果与讨论第46-50页
   ·活性炭吸附预处理蛋白第46-47页
   ·DEAE-Sephaeel柱层析第47-48页
   ·SephadexG-100柱层析第48页
   ·蛋白质电泳第48页
   ·蛋白分子量测定第48-49页
   ·硫酸-蒽酮法鉴定蛋白第49页
   ·PSPB-2蛋白抗真菌活性及其对肺癌细胞作用的形态学观察第49-50页
 3 本章小结第50-52页
 参考文献第52-53页
第四章 PSPB-2抑制肺癌细胞(A549)的作用机理及其生物学活性的探讨第53-65页
 1 材料和方法第53-55页
   ·材料第53页
   ·试剂第53-54页
   ·常用溶液第54-55页
   ·仪器第55页
 2.方法第55-59页
   ·A549细胞培养第55-56页
   ·抑制A549细胞增殖的体外实验第56页
   ·A549细胞的形态学观察第56页
   ·细胞的线粒体膜电位的检测第56-57页
   ·TUNEL法检测凋亡第57-58页
   ·PSPB-2的核酸内切酶作用的研究第58-59页
 3 结果与讨论第59-62页
   ·PSPB-2抑制A549细胞增殖的体外实验第59页
   ·激光共聚焦扫描显微镜对A549细胞的形态学观察第59-60页
   ·细胞的线粒体膜电位的检测第60-61页
   ·TUNEL法检测凋亡第61-62页
   ·核酸内切酶作用第62页
 4 本章小结第62-63页
 参考文献第63-65页
全文结论第65-66页
全文创新点第66-67页
致谢第67-68页
攻读硕士期间发表论文第68页

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