| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1.前言 | 第12-20页 |
| ·CGMMV的病毒特征及株系研究 | 第12-13页 |
| ·CGMMV症状特征 | 第13页 |
| ·CGMMV基因组结构及功能 | 第13-15页 |
| ·CGMMV的基因组结构 | 第13-14页 |
| ·CGMMV的基因组功能 | 第14-15页 |
| ·CGMMV的检测 | 第15-18页 |
| ·生物学检测 | 第15页 |
| ·血清学技术 | 第15-16页 |
| ·分子生物学技术 | 第16-18页 |
| ·病毒病害的防治 | 第18-19页 |
| ·种子处理 | 第18页 |
| ·抗病育种 | 第18页 |
| ·生物制剂 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2.材料与方法 | 第20-32页 |
| ·供试毒源 | 第20页 |
| ·供试试剂 | 第20页 |
| ·所用仪器设备 | 第20-21页 |
| ·黄瓜病叶中CGMMV的鉴定及检测 | 第21-28页 |
| ·血清学检测 | 第21-22页 |
| ·生物学鉴定 | 第22页 |
| ·电子显微镜观察 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测 | 第22-23页 |
| ·病叶总RNA的提取 | 第22页 |
| ·引物设计合成 | 第22页 |
| ·反转录(RT) | 第22-23页 |
| ·PCR扩增 | 第23页 |
| ·常规RT-PCR条件优化 | 第23-24页 |
| ·退火温度的优化 | 第23页 |
| ·Mg~(2+)用量的优化 | 第23页 |
| ·Taq酶用量的优化 | 第23-24页 |
| ·引物浓度的优化 | 第24页 |
| ·IC-RT-PCR检测 | 第24-25页 |
| ·One-step RT-PCR检测 | 第25页 |
| ·CP基因的克隆与测序 | 第25-28页 |
| ·目的片段DNA的纯化 | 第25-26页 |
| ·T-A连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·CaCl_2的转化 | 第26页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第26-27页 |
| ·酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·CP基因序列差异分析 | 第28页 |
| ·黄瓜病叶分离物CGMMV编码区序列测定与差异分析 | 第28-30页 |
| ·引物的设计 | 第28页 |
| ·IC-RT-PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·目的片段的克隆、测序与序列差异分析 | 第29-30页 |
| ·种子中CGMMV的检测 | 第30-32页 |
| ·血清学检测 | 第30页 |
| ·种子中总RNA的提取 | 第30页 |
| ·RT-PCR方法检测 | 第30页 |
| ·IC-RT-PCR方法检测 | 第30-31页 |
| ·CP基因的克隆与序列差异分析 | 第31-32页 |
| 3.结果与分析 | 第32-50页 |
| ·黄瓜病叶中CGMMV的鉴定和检测 | 第32-42页 |
| ·血清学检测结果 | 第32-33页 |
| ·生物学鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·病毒粒子的电子显微镜观察结果 | 第34页 |
| ·目的基因的RT-PCR检测结果 | 第34-36页 |
| ·常规RT-PCR条件的优化结果 | 第36-38页 |
| ·目的基因的IC-RT-PCR的检测结果 | 第38页 |
| ·One-step RT-PCR检测结果 | 第38页 |
| ·CP基因的克隆与序列差异分析 | 第38-42页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·插入片段CP基因序列差异分析 | 第40-42页 |
| ·黄瓜病叶分离物CGMMV编码区序列测定与差异分析 | 第42-45页 |
| ·IC-RT-PCR扩增结果 | 第42页 |
| ·CGMMV编码区目的片段的克隆与序列差异分析 | 第42-43页 |
| ·插入片断的核苷酸序列差异分析 | 第43-45页 |
| ·种子中CGMMV的检测 | 第45-50页 |
| ·血清学检测 | 第45页 |
| ·RT-PCR检测结果 | 第45页 |
| ·IC-RT-PCR检测结果 | 第45-47页 |
| ·CP基因的克隆与序列差异分析 | 第47-50页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·插入片段的序列差异分析 | 第48-50页 |
| 4.讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录1 缓冲液的配制 | 第58-59页 |
| 附录2 缩写词和英汉对照 | 第59-60页 |
| 附录3 DAS-ELISA数据处理及结果判断 | 第60-61页 |
| 附录4 本研究中引用的病毒分离物来源 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |