| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-17页 |
| ·非编码RNA的简介 | 第11页 |
| ·miRNA的简介 | 第11-14页 |
| ·miRNA的发现 | 第12页 |
| ·miRNA的生物合成 | 第12-13页 |
| ·miRNA的特点 | 第13页 |
| ·miRNA的作用方式 | 第13-14页 |
| ·研究背景与思路 | 第14-15页 |
| ·研究创新点及意义 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 罗非鱼、蟾蜍、巴西龟和家鸡中相关miRNA分子的克隆 | 第17-40页 |
| ·实验材料及仪器 | 第17-22页 |
| ·分子生物学实验试剂 | 第17页 |
| ·细菌培养用试剂 | 第17-18页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·其它试剂及试剂盒 | 第18页 |
| ·RNA接头及引物 | 第18-19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·耗材的处理 | 第19页 |
| ·实验动物简介 | 第19-22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料处理 | 第22页 |
| ·总RNA提取 | 第22-23页 |
| ·小RNA分离 | 第23页 |
| ·小RNA分子加Poly(A)尾 | 第23页 |
| ·小分子RNA5’接头连接 | 第23-24页 |
| ·cDNA的合成 | 第24页 |
| ·PCR扩增反应 | 第24页 |
| ·电泳及目的条带回收 | 第24-25页 |
| ·连接反应 | 第25页 |
| ·制备感受态细胞 | 第25页 |
| ·转化及克隆 | 第25-26页 |
| ·菌落PCR | 第26页 |
| ·序列测定 | 第26页 |
| ·生物信息学分析 | 第26-27页 |
| ·实验结果 | 第27-38页 |
| ·总RNA浓度测定及完整性检测 | 第27页 |
| ·小RNA的富集 | 第27-28页 |
| ·PCR电泳图 | 第28页 |
| ·菌落PCR鉴定结果 | 第28-29页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第29-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 克隆所得miRNA在鱼类、两栖类、爬行类、鸟类及哺乳类中的表达分析及功能预测 | 第40-51页 |
| ·实验材料及仪器 | 第40-41页 |
| ·实验试剂 | 第40-41页 |
| ·其它试剂及试剂盒 | 第41页 |
| ·引物 | 第41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·耗材的处理 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·总RNA分子加Poly(A)尾 | 第42页 |
| ·cDNA合成 | 第42页 |
| ·检测miRNA在四种动物中的表达 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-45页 |
| ·总RNA浓度及完整性检测 | 第43-44页 |
| ·检测miRNA在四种动物中的表达 | 第44-45页 |
| ·功能预测 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 小结与展望 | 第51-52页 |
| 1.小结 | 第51页 |
| 2.展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |