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凋亡抑制基因survivin与鼻咽癌相关性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 前言第12-39页
   ·鼻咽癌的综述第12-26页
     ·鼻咽癌的流行特征和临床症状第12-13页
     ·鼻烟癌的病理分型第13-14页
       ·世界卫生组织(WHO)分类第13-14页
       ·国内分类第14页
     ·鼻咽癌的临床分期第14-15页
     ·鼻咽癌的病因第15-26页
       ·EB 病毒等微生物感染第15-18页
       ·遗传因素第18-25页
       ·环境及饮食第25-26页
   ·survivin 基因的综述第26-37页
     ·survivin 的分子结构第26-35页
     ·survivin 的生物学功能第35-37页
       ·促进细胞增殖和分裂第35-36页
       ·参与血管生成第36页
       ·survivin 的细胞分化功能第36-37页
       ·survivin 与病毒感染、肿瘤形成第37页
   ·目的与意义第37-39页
2 材料与方法第39-48页
   ·材料第39-41页
     ·标本来源第39页
     ·免疫组织化学检测试剂第39页
     ·原位杂交检测试剂第39页
     ·细胞培养试剂第39-40页
     ·RNA 提取试剂第40页
     ·荧光定量RT-PCR 分析试剂第40页
     ·RNA 干扰试剂第40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·实验方法与步骤第41-48页
     ·标本处置及结果判断第41页
     ·免疫组化检测实验第41-42页
     ·原位杂交检测实验第42-43页
     ·人鼻咽癌细胞株CNE-2 细胞培养第43页
       ·冻存细胞的复苏第43页
       ·细胞日常培养第43页
       ·细胞冻存第43页
     ·RNA 提取第43-44页
       ·鼻咽癌组织及慢性咽炎鼻咽组织RNA 提取第43-44页
       ·CNE-2 细胞RNA 的提取第44页
       ·RNA 含量测定第44页
       ·RNA 电泳检测第44页
     ·两步法荧光定量RT-PCR第44-45页
       ·反转录反应第44-45页
       ·RT- PCR 反应第45页
     ·荧光定量RT-PCR 产物电泳第45-46页
     ·RNA 干扰实验第46-48页
       ·siRNA 序列的确定与合成第46页
       ·转染siRNA第46页
       ·噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率第46-47页
       ·流式细胞仪检测凋亡细胞第47-48页
3 实验结果第48-61页
   ·免疫组织化学检测结果第48-50页
     ·鼻咽癌组织survivin 蛋白表达与慢性鼻咽炎组织的比较第48页
     ·鼻咽癌组织survivin 蛋白表达与性别、年龄的关系第48页
     ·鼻咽癌组织survivin 蛋白表达与临床分期的关系第48-50页
   ·原位杂交检测的结果第50-52页
     ·鼻咽癌组织中survivin mRNA 表达与慢性鼻咽炎组织的比较第50页
     ·鼻咽癌组织survivin mRNA 表达与性别、年龄的关系第50-51页
     ·鼻咽癌组织survivin mRNA 表达与临床分期的关系第51-52页
   ·人鼻咽癌CNE-2 细胞观察第52-53页
   ·RNA 提取和测定第53-54页
   ·荧光定量RT-PCR 分析第54-58页
     ·荧光定量RT-PCR 结果第54-56页
     ·survivin 基因相对表达量各数量级病例数第56-57页
     ·鼻咽癌和慢性鼻咽炎组织survivin 基因相对表达量比较第57页
     ·survivin 基因相对表达量与性别、年龄的关系第57-58页
   ·RNA 干扰实验第58-61页
     ·RNA 干扰后survivin 基因相对表达量第58-59页
     ·siRNA3 干扰的细胞增殖抑制作用第59-60页
       ·siRNA3 干扰的剂量效应第59页
       ·siRNA3 干扰的时间效应第59-60页
     ·流式细胞术分析siRNA3 对细胞凋亡的影响第60-61页
4 讨论第61-65页
5 结论第65-66页
参考文献第66-73页
致谢第73页

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