| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-18页 |
| ·生物活性肽概述及其嵌膜机制 | 第8-10页 |
| ·生物活性肽嵌膜机制的五种假说 | 第8-10页 |
| ·膜片钳原理及主要钳制模式 | 第10-12页 |
| ·膜片钳概述 | 第10-11页 |
| ·膜片钳技术的主要钳制模式 | 第11-12页 |
| ·离子通道类型 | 第12-15页 |
| ·钾离子通道的电生理特性和钾电流 | 第12-14页 |
| ·钠离子通道的电生理特性和钠电流 | 第14-15页 |
| ·钾离子通道与癌细胞凋亡 | 第15-16页 |
| ·Eag类家族在肿瘤细胞中的表达 | 第15-16页 |
| ·钙激活钾离子通道在肿瘤中的表达 | 第16页 |
| ·课题设计 | 第16-18页 |
| ·立题依据 | 第16-17页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第17页 |
| ·预期目标 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·活性肽分泌物的提取纯化 | 第19-20页 |
| ·东北林蛙皮肤分泌物的提取 | 第19页 |
| ·东北林蛙皮肤分泌物的层析纯化 | 第19页 |
| ·活性肽产物 dybowskii C的液相色谱分离 | 第19-20页 |
| ·活性肽的浓缩技术 | 第20-21页 |
| ·MCF-7细胞系的培养 | 第21-22页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·细胞培养方法 | 第21页 |
| ·适宜膜片钳实验的细胞消化方法 | 第21-22页 |
| ·急性小鼠小肠平滑肌的分离 | 第22-23页 |
| ·配制试剂 | 第22页 |
| ·取材 | 第22页 |
| ·血管组织块的获得 | 第22页 |
| ·消化及细胞保存 | 第22-23页 |
| ·全细胞膜片钳实验 | 第23-25页 |
| ·配制试剂 | 第23-24页 |
| ·电极的拉制 | 第24页 |
| ·微电极的充灌 | 第24页 |
| ·准备细胞 | 第24页 |
| ·封接 | 第24页 |
| ·破膜 | 第24-25页 |
| ·吸附穿孔模式的膜片钳实验 | 第25-26页 |
| ·穿孔电极内液的配制 | 第25-26页 |
| ·吸附缓慢穿孔膜片钳技术 | 第26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-38页 |
| ·吸附穿孔模式的膜片钳实验结果 | 第27-29页 |
| ·MCF-7细胞的全细胞跨膜总电流 | 第29-30页 |
| ·东北林蛙皮肤活性肽对细胞的延迟整流钾电流(I_K)的影响 | 第30-33页 |
| ·活性肽对 MCF-7细胞的延迟整流钾电流(I_K)的影响 | 第30-33页 |
| ·活性肽对小鼠小肠平滑肌细胞的延迟整流钾电流(I_K)的影响 | 第33页 |
| ·不同组分的活性肽对 MCF-7细胞的延迟整流钾电流(I_K)的影响 | 第33-34页 |
| ·MCF-7细胞的内向Na离子电流 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| ·膜片钳全细胞记录的实验技术与干扰影响因素 | 第38页 |
| ·吸附式膜片钳方法中负压的定量分析 | 第38-39页 |
| ·两栖类皮肤分泌物活性肽研究的意义 | 第39页 |
| ·K、Na离子通道所能反映的问题 | 第39-41页 |
| ·钾离子通道与癌症细胞凋亡 | 第40页 |
| ·钾离子通道阻断剂的抗癌机制 | 第40-41页 |
| ·活性肽对细胞作用的选择性 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录 | 第49-50页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
