| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 缩写词简表 | 第12-13页 |
| 论文正文 | 第13-59页 |
| 第一章 前言 | 第13-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-27页 |
| 1 材料 | 第16-19页 |
| ·细胞 | 第16页 |
| ·组织芯片 | 第16页 |
| ·真核表达载体 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-27页 |
| ·免疫组化 | 第19-20页 |
| ·免疫组化SP法程序 | 第19-20页 |
| ·阳性和阴性对照 | 第20页 |
| ·结果评估标准与观察计分 | 第20页 |
| ·RT-PCR检测NGX6在HT-29细胞中的表达 | 第20-22页 |
| ·培养细胞总RNA的抽提 | 第20-21页 |
| ·差异RT-PCR | 第21-22页 |
| ·制备用于Western blotting的蛋白质 | 第22-23页 |
| ·培养细胞的总蛋白质制备 | 第22页 |
| ·培养细胞的胞核蛋白的制备 | 第22-23页 |
| ·蛋白定量:BAC ProteinA ssay Kit | 第23页 |
| ·Western Blot | 第23-24页 |
| ·细胞免疫荧光实验 | 第24页 |
| ·免疫细胞化学 | 第24-25页 |
| ·荧光素酶活性分析试验 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第25页 |
| ·基因瞬时转染 | 第25-26页 |
| ·荧光素酶分析测定双重荧光素酶报告测定系统 | 第26页 |
| ·统计学分析 | 第26-27页 |
| 第三章 结果 | 第27-47页 |
| 第一部分 MAPK通路中P-JNK和P-在结直肠癌组织芯片中的表达研究 | 第27-34页 |
| ·P-JNK和P-ERK蛋白在结直肠组织芯片中的表达 | 第27-32页 |
| ·P-JNK和P-ERK胞核蛋白表达与结直肠组织临床病理特征的关系 | 第32-33页 |
| ·P-JNK和P-ERK蛋白表达的相关性分析 | 第33-34页 |
| 第二部分 研究NGX6对SAPK/JNK和ERK/MAPK通路的影响 | 第34-41页 |
| ·NGX6基因在转染细胞系pcDNA3.1(+)/NGX6/HT-29中的表 | 第34-35页 |
| ·研究NGX6对JNK和P-JNK的影响 | 第35-39页 |
| ·研究NGX6对ERK和P-ERK通路的影响 | 第39-41页 |
| 第三部分 NGX6对转录因子AP-1(c-Jun、c-fos)以及ets-1的影响 | 第41-45页 |
| ·Western blotls检测AP-1(c-Jun、c-fos)以及ets-1的差异表达 | 第41-42页 |
| ·信号通路抑制剂对转录因子AP-1(c-Jun、c-fos)以及ets-1的影响 | 第42-44页 |
| ·荧光素酶报道质粒检测转染NGX6后AP-1的活性改变 | 第44-45页 |
| 第四部分 NGX6对细胞周期调控蛋白CyclinD1的影响 | 第45-47页 |
| ·Western blotls检测NGX6对CyclinD1表达的影响 | 第45页 |
| ·荧光素酶报道质粒检测转染NGX6后对CyclinD1活性的影响 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-59页 |
| 第一部分 MAPK通路中P-ERK和P-JNK在结直肠癌组织芯片 中的表达研究 | 第47-50页 |
| 第二部分 NGX6负调控SAPK/JNK通路 | 第50-54页 |
| 第三部分 NGX6通过SAPK/JNK通路负调控核转录因子的表达，抑制AP-1的转录活性 | 第54-56页 |
| 第四部分 NGX6对CyclinD1的调控 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 综述 | 第65-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
