| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 引言 | 第9-20页 |
| 1 转基因动物研究进展 | 第9-12页 |
| ·显微注射法 | 第9-10页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第10页 |
| ·体细胞、胚胎细胞克隆法 | 第10-11页 |
| ·精子介导法 | 第11页 |
| ·精原干细胞介导法 | 第11页 |
| ·逆转录病毒法 | 第11-12页 |
| 2 RNA 的技术简史 | 第12-13页 |
| 3 RNAi 的分子生物学机制和特性 | 第13-15页 |
| ·RNAi 的分子机制 | 第13页 |
| ·RNAi 的生物学特点 | 第13-14页 |
| ·NA 的获得 | 第14-15页 |
| ·iRNA | 第14页 |
| ·体外转录法合成siRNA | 第14-15页 |
| ·siRNA 表达载体 | 第15页 |
| ·siRNA 表达框架 | 第15页 |
| 4 肌肉生长抑制素的研究进展 | 第15-18页 |
| ·MSTN 基因的家族成员、功能、结构及作用机制 | 第16-17页 |
| ·MSTN 基因的同源性、定位及部分突变位点 | 第17-18页 |
| ·MSTN 基因的表达 | 第18页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 绵羊myostatin 基因shRNA 慢病毒载体的构建与鉴定 | 第20-41页 |
| 1 材料和方法 | 第20-28页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·菌种、质粒 | 第20页 |
| ·细胞、培养液 | 第20页 |
| ·其它试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-28页 |
| ·构建shRNA | 第21-22页 |
| ·全基因合成及高表达载体构建 | 第22-23页 |
| ·干扰载体的筛选 | 第23-27页 |
| ·干扰效果最佳的载体构建为慢病毒干扰载体 | 第27页 |
| ·慢病毒的包装和病毒滴度的测定 | 第27-28页 |
| 2 结果和分析 | 第28-39页 |
| ·干扰载体的构建 | 第28-29页 |
| ·全基因合成及高表达载体构建 | 第29-33页 |
| ·干扰载体在 HEK293 细胞中的干扰评价 | 第33-35页 |
| ·内参定量结果 | 第33-34页 |
| ·内参扩增曲线和熔解曲线 | 第34页 |
| ·目的基因扩增曲线和熔解曲线 | 第34页 |
| ·目的基因定量结果 | 第34-35页 |
| ·干扰效果最佳的质粒载体转为慢病毒载体 | 第35-37页 |
| ·慢病毒的包装和滴度的测定 | 第37-39页 |
| ·慢病毒包装 | 第37页 |
| ·慢病毒原液滴度测定 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53-55页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第55页 |