摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第1章 Zα蛋白家族 | 第8-16页 |
·Z-DNA与Zα | 第8-11页 |
·ADAR | 第8-9页 |
·E3L | 第9-10页 |
·DLM-1 | 第10页 |
·鱼类PKZ | 第10-11页 |
·Zα的生物学功能 | 第11-12页 |
·RNA编辑与抗病毒 | 第11-12页 |
·胚胎发育 | 第12页 |
·Zα结合核酸的研究方法 | 第12-15页 |
·PCR定点突变法 | 第12页 |
·凝胶阻滞实验 | 第12-13页 |
·原子力显微镜 | 第13页 |
·圆二色谱 | 第13-14页 |
·酵母单杂交体系 | 第14页 |
·核磁共振 | 第14-15页 |
·本研究的内容、目的及意义 | 第15-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-22页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·主要仪器和设备 | 第16页 |
·主要试剂、试剂盒 | 第16-17页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·试剂盒 | 第17页 |
·载体和菌株 | 第17页 |
·实验材料 | 第17页 |
·课题来源 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-22页 |
·CaPKR-like Zα克隆载体的构建 | 第18-19页 |
·引物设计 | 第18页 |
·目的基因的克隆 | 第18页 |
·目的基因连接pMD18-T载体 | 第18页 |
·连接产物的转化和鉴定 | 第18-19页 |
·CaPKR-like Zα原核表达载体的构建 | 第19-20页 |
·质粒的提取与酶切 | 第19页 |
·酶切产物的回收 | 第19页 |
·目的基因片段与表达载体pET-32a的连接 | 第19-20页 |
·连接产物的转化与鉴定 | 第20页 |
·原核表达 | 第20页 |
·表达产物的纯化 | 第20-21页 |
·凝胶阻滞分析 | 第21-22页 |
·Pzα与Poly I:C的结合 | 第21页 |
·Pzα与鲑精DNA的结合 | 第21页 |
·不同浓度Pzα与鲑精DNA的结合 | 第21页 |
·Pzα与重组质粒的结合 | 第21页 |
·Pzα与d(GC)_(13)的结合 | 第21-22页 |
第3章 实验结果 | 第22-28页 |
·CaPKR-like Zα阳性克隆的筛选 | 第22页 |
·CaPKR-like Zα | 第22-23页 |
·质粒双酶切实验 | 第22页 |
·与pET-32a的连接 | 第22-23页 |
·原核表达与纯化 | 第23-25页 |
·Zα表达分析 | 第23-24页 |
·Zα表达产物的纯化 | 第24-25页 |
·Pzα与核酸结合 | 第25-28页 |
·Pzα与Poly I:C的结合 | 第25页 |
·Pzα与鲑精DNA的结合 | 第25-26页 |
·不同浓度Pzα与鲑精DNA的结合 | 第26页 |
·Pzα与重组质粒的结合 | 第26-27页 |
·Pzα与d(GC)_(13)的结合 | 第27-28页 |
第4章 分析与讨论 | 第28-33页 |
·凝胶阻滞分析 | 第28页 |
·Zα_(PKR-like)与核酸分子亲和性分析 | 第28-32页 |
·Zα_(PKR-like)与Poly I:C的结合 | 第28-29页 |
·Zα_(PKR-like)与鲑精DNA的结合 | 第29-30页 |
·P_(Zα)与d(GC)_(13)的结合 | 第30-32页 |
·Zα_(PKR-like)功能的初探 | 第32-33页 |
第5章 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
附录 | 第37-38页 |
缩略语表 | 第37-38页 |
致谢 | 第38页 |