| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-32页 |
| ·细菌表达载体概论 | 第12-24页 |
| ·原核表达载体的基本要素 | 第12-15页 |
| ·稳定的遗传复制子 | 第12-13页 |
| ·显性的筛选标记 | 第13-14页 |
| ·可调控的原核强启动子 | 第14页 |
| ·强转录终止信号 | 第14-15页 |
| ·SD序列 | 第15页 |
| ·多克隆位点 | 第15页 |
| ·质粒生物学 | 第15-23页 |
| ·质粒的宿主范围 | 第16-17页 |
| ·质粒拷贝数和复制 | 第17-20页 |
| ·质粒的分配和分离稳定性 | 第20页 |
| ·质粒的不相容性 | 第20-22页 |
| ·质粒的接合转移 | 第22-23页 |
| ·基因表达的调控 | 第23-24页 |
| ·生物冶金技术 | 第24-27页 |
| ·生物冶金技术简介 | 第24-26页 |
| ·生物冶金中的浸矿微生物 | 第26-27页 |
| ·专性自养极端嗜酸性硫杆菌遗传改造研究概论 | 第27-31页 |
| ·专性自养极端嗜酸性硫杆菌基因转移系统的研究 | 第28-29页 |
| ·专性自养极端嗜酸性硫杆菌的遗传改良 | 第29-31页 |
| ·本论文的研究意义及内容 | 第31-32页 |
| 第二章 广泛宿主范围高效表达质粒载体的构建 | 第32-47页 |
| ·引言 | 第32-33页 |
| ·材料与方法 | 第33-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第33-34页 |
| ·培养基和培养条件 | 第34页 |
| ·LB培养基 | 第34页 |
| ·麦康凯培养基 | 第34页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第34页 |
| ·DNA操作技术 | 第34-37页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·DNA浓度、纯度和DNA分子量的测定 | 第35页 |
| ·限制性核酸内切酶酶切 | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶中DNA片段的回收 | 第35-36页 |
| ·连接 | 第36页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第36页 |
| ·PCR技术 | 第36-37页 |
| ·菌种保藏 | 第37页 |
| ·实验结果 | 第37-47页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm和pBBR-tac-EGFP的构建 | 第37-43页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm的构建 | 第37-40页 |
| ·表达载体pBBR-tac-EGFP的构建 | 第40-43页 |
| ·表达载体的报告基因在大肠杆菌中的表达 | 第43-47页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm的报告基因在大肠杆菌中的表达 | 第43-45页 |
| ·表达载体pBBR-tac-EGFP的报告基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-47页 |
| 第三章 表达载体在专性自养极端嗜酸性硫杆菌中的表达研究 | 第47-58页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-51页 |
| ·菌株和质粒 | 第47-48页 |
| ·培养基和培养条件 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌 | 第48页 |
| ·硫杆菌 | 第48-49页 |
| ·大肠杆菌—硫杆菌接合培养基及菌体洗涤液 | 第49页 |
| ·抗生素使用浓度 | 第49页 |
| ·大肠杆菌和硫杆菌的接合转移 | 第49-50页 |
| ·供体菌及受体菌的准备 | 第49页 |
| ·大肠杆菌与硫杆菌的接合 | 第49-50页 |
| ·接合转移子的鉴定 | 第50页 |
| ·提取质粒鉴定 | 第50页 |
| ·反向接合转移 | 第50页 |
| ·质粒稳定性测定 | 第50页 |
| ·DNA操作技术 | 第50页 |
| ·菌种保藏 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-58页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm从大肠杆菌到硫杆菌中的接合转移 | 第51页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm从硫杆菌向大肠杆菌的反向接合转移 | 第51-52页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm在硫杆菌中稳定性测定 | 第52-53页 |
| ·表达载体pBBR-tac-Sm在硫杆菌中的表达 | 第53-58页 |
| 总结与讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第65页 |
