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半滑舌鳎性别相关基因P450芳香化酶、FTZ-F1和DMRT1基因克隆及表达分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-17页
1 前言第17-36页
   ·性别分化和性别决定第17-18页
     ·卵巢的分化第18页
     ·精巢的分化第18页
   ·性别决定的遗传基础第18-31页
     ·性染色体第18-19页
     ·性别决定基因(SRY/Sry 和 DMY)第19-21页
     ·性别相关基因第21-31页
       ·芳香化酶第21-26页
       ·FTZ-F1第26-27页
       ·DMRT1第27-28页
       ·Sox9第28-30页
       ·DAX1((NR081)第30-31页
       ·AMH第31页
   ·环境与性别决定第31-35页
     ·温度的影响第32页
     ·激素性别决定第32-34页
     ·芳香化酶抑制剂对性腺分化发育的影响第34-35页
   ·鱼类的性别决定机制研究现状和展望第35页
   ·本文研究目的及意义第35-36页
2 半滑舌鳎性腺分化和温度对性腺分化的影响第36-43页
   ·材料与方法第37-38页
     ·材料来源第37页
     ·性腺组织学分化第37页
     ·温度对性腺分化的影响和性别鉴定第37-38页
     ·肝脏基因组DNA 的提取第38页
     ·数据处理第38页
   ·结果与分析第38-40页
     ·半滑舌鳎性腺发育与分化第38-39页
     ·温度对半滑舌鳎性别的影响第39-40页
     ·半滑舌鳎性逆转个体的鉴定第40页
   ·讨论第40-43页
3 甲基睾酮(MT)对半滑舌鳎性逆转的影响第43-48页
   ·材料与方法第44-45页
     ·材料来源第44页
     ·性腺组织学分化第44页
     ·MT 对性腺分化的影响和性别鉴定第44-45页
     ·数据处理第45页
   ·结果与分析第45-46页
     ·MT 诱导性逆转第45页
     ·性逆转个体的筛选第45-46页
   ·讨论第46-48页
4 半滑舌鳎卵巢型芳香化酶(TSP450AROMA)基因 CDNA 克隆及表达分析第48-63页
   ·材料与方法第49-53页
     ·组织制备、RNA 和 DNA 提取第49-50页
     ·表型性别和遗传性别鉴定第50页
     ·引物第50页
     ·RNA 的提取和cDNA 的合成第50-51页
     ·SMART-RACE 扩增和 RT-PCR 扩增第51-52页
     ·tsP450aromA 基因启动子区的克隆第52页
     ·中间保守序列和 RACE 产物的纯化、克隆及测序第52-53页
     ·序列分析第53页
   ·结果第53-61页
     ·tsP450aromA cDNA 和启动子区的克隆和测序第53-54页
     ·tsP450aromA 同源性比较和系统发生比较第54-58页
     ·tsP450aromA 的组织表达第58-59页
     ·不同发育时期性腺中tsP450aromA 的表达第59页
     ·性逆转个体筛选第59-60页
     ·tsP450aromA 在性逆转鱼中的表达第60-61页
   ·分析与讨论第61-63页
5 半滑舌鳎脑芳香化酶(TSP450AROMB)基因 CDNA 克隆及表达分析第63-73页
   ·材料与方法第64-66页
     ·组织制备、RNA 和 DNA 提取第64页
     ·表型性别和遗传性别鉴定第64页
     ·引物第64-65页
     ·RNA 的提取和cDNA 的合成第65页
     ·SMART-RACE 扩增和RT-PCR 扩增第65页
     ·中间保守序列和RACE 产物的纯化、克隆及测序第65页
     ·序列分析第65-66页
   ·结果第66-71页
     ·P450aromB cDNA 克隆和测序第66页
     ·P450aromB 同源性比较和系统发生比较第66-69页
     ·P450aromB 的组织表达第69-70页
     ·P450aromB 在性逆转鱼中的表达第70-71页
   ·分析与讨论第71-73页
6 半滑舌鳎FTZ-F1 基因CDNA 克隆和表达分析第73-84页
   ·材料与方法第74-76页
     ·组织、不同发育时期胚胎、仔鱼的RNA 和DNA 提取第74页
     ·表型性别和遗传性别鉴定第74-75页
     ·引物第75页
     ·RNA 的提取和cDNA 的合成第75页
     ·SMART-RACE 扩增和RT-PCR 扩增第75-76页
     ·中间保守序列和RACE 产物的纯化、克隆及测序第76页
     ·序列分析第76页
   ·结果第76-82页
     ·tsFTZ-F1 cDNA 克隆和测序第76页
     ·tsFTZ-F1 同源性比较和系统发生比较第76-80页
     ·tsFTZ-F1 mRNA 的组织表达第80-81页
     ·tsFTZ-F1 mRNA 在胚胎和仔鱼发育过程中表达第81页
     ·tsFTZ-F1 mRNA 在性逆转鱼中的表达第81-82页
   ·分析与讨论第82-84页
7 半滑舌鳎 DMRT1 基因的 CDNA 克隆及表达分析第84-91页
   ·材料与方法第84-86页
     ·半滑舌鳎各种组织制备、DNA 和 RNA 提取第84-85页
     ·表型性别和遗传性别鉴定第85页
     ·引物第85页
     ·RNA 的提取和cDNA 的合成第85页
     ·SMART-RACE 扩增和 RT-PCR 扩增第85页
     ·中间保守序列和 RACE 产物的纯化、克隆及测序第85-86页
     ·序列分析第86页
   ·结果第86-89页
     ·半滑舌鳎 DMRT1 基因cDNA 部分序列克隆及同源性分析第86-89页
     ·DMRT1 在性逆转鱼中的表达第89页
   ·分析与讨论第89-91页
全文总结第91-92页
参考文献第92-115页
发表论文情况第115-116页
致谢第116页

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