| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 缩略词表（abbreviation） | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| ·血友病B 对人类危害 | 第14页 |
| ·血友病B 的治疗 | 第14-16页 |
| ·蛋白替代治疗 | 第15页 |
| ·基因治疗 | 第15-16页 |
| ·人凝血IX 因子的研究 | 第16-17页 |
| ·基因结构 | 第16页 |
| ·生物活性 | 第16-17页 |
| ·植物生物反应器 | 第17-22页 |
| ·概念和研究进展 | 第17-18页 |
| ·优点 | 第18-19页 |
| ·技术研究热点 | 第19-21页 |
| ·番茄作为植物生物反应器的现状和优势 | 第21-22页 |
| ·选题依据 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-39页 |
| ·材料与试剂 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株和质粒 | 第24页 |
| ·酶与试剂盒 | 第24页 |
| ·激素、抗生素与培养基 | 第24-25页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第25页 |
| ·其他材料 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-39页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·工程农杆菌的制备 | 第29-30页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第30-31页 |
| ·转基因番茄PCR 检测 | 第31-33页 |
| ·转基因番茄的Southern blot 分析 | 第33-35页 |
| ·转基因番茄的RT-PCR 分析 | 第35-36页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA）测定转基因番茄中的hFIX 蛋白 | 第36-38页 |
| ·凝血因子功能活性测定[69]（aPPT 法） | 第38-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-51页 |
| ·植物表达载体构建 | 第39-41页 |
| ·番茄果实特异性表达载体构建 | 第39-40页 |
| ·PCR 检测 | 第40页 |
| ·测序 | 第40-41页 |
| ·工程农杆菌的制备 | 第41-42页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第42-43页 |
| ·卡那霉素（Kan）选择压的确定 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第42-43页 |
| ·转基因番茄的PCR 检测 | 第43-44页 |
| ·转基因番茄Southern blot 分析 | 第44-45页 |
| ·转基因番茄的RT-PCR 分析 | 第45-47页 |
| ·转基因番茄的ELISA 检测 | 第47-48页 |
| ·番茄可溶性总蛋白浓度的测定 | 第47页 |
| ·双抗体夹心ELISA 法检测hFIX 蛋白 | 第47-48页 |
| ·凝血因子功能活性的测定 | 第48-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-56页 |
| ·番茄作为生物反应器的表达宿主 | 第51页 |
| ·基因沉默的现象与解决办法 | 第51-53页 |
| ·基因沉默现象 | 第51-52页 |
| ·基因沉默产生原因 | 第52页 |
| ·克服基因沉默的策略 | 第52-53页 |
| ·提高外源蛋白在植物中的表达量 | 第53-54页 |
| ·转基因安全问题 | 第54-56页 |
| ·潜在过敏原问题 | 第54页 |
| ·抗生素抗性问题 | 第54-55页 |
| ·转基因食品的潜在毒性 | 第55-56页 |
| 第五章 小结 | 第56-57页 |
| 附录 实验涉及的试剂和培养基配方 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致 谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68页 |