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华南地区猪群中葡萄球菌的分离鉴定及猪葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表达

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-19页
   ·国内外研究的概况第10-12页
   ·病原学第12页
   ·流行病学第12-13页
   ·生物学特性及脱落毒素第13-15页
     ·生物学特性第13页
     ·脱落毒素第13-15页
   ·临床症状第15-16页
   ·诊断方法第16-17页
     ·细菌学方法第16页
     ·分子生物学方法第16页
     ·血清学诊断第16-17页
   ·治疗与预防第17-18页
     ·治疗第17页
     ·预防第17-18页
   ·研究目的及意义第18-19页
2 葡萄球菌的初步分离鉴定及药敏试验第19-25页
   ·材料与方法第19-21页
     ·材料第19页
       ·培养基及试剂第19页
       ·实验动物第19页
       ·主要仪器第19页
       ·培养基的配制第19页
     ·方法第19-21页
       ·病料采集第19-20页
       ·细菌的分离第20页
       ·革兰氏染色镜检第20页
       ·生化鉴定第20页
       ·动物致病性试验第20页
       ·药敏试验第20-21页
       ·分离菌株的菌种保存第21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·临床症状第21页
     ·细菌分离第21页
     ·生化鉴定第21-23页
     ·动物试验第23页
     ·药敏试验第23-24页
   ·讨论第24-25页
 3 猪群中葡萄球菌 Gap 基因、16S rRNA 基因的克隆及系统进化分析第25-33页
   ·材料与方法第25-30页
     ·材料第25-26页
       ·菌种与载体第25页
       ·试剂第25页
       ·主要仪器设备第25页
       ·主要溶液配方第25-26页
     ·方法第26-30页
       ·引物第26页
       ·基因组DNA 的抽提第26-27页
       ·PCR 扩增第27-28页
       ·凝胶电泳第28页
       ·PCR 扩增产物的回收第28页
       ·目的片段与载体的连接第28-29页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第29页
       ·连接产物的转化第29-30页
       ·Gap 基因、16srRNA 基因核苷酸序列测定及遗传进化分析第30页
   ·结果与分析第30-32页
     ·Gap 基因的 PCR 扩增结果第30页
     ·16S rRNA 基因的 PCR 扩增结果第30-31页
     ·Gap 基因核苷酸序列遗传进化分析第31-32页
   ·讨论第32-33页
4 猪葡萄球菌毒素基因检测方法的建立第33-39页
   ·材料与方法第33-37页
     ·材料第33-34页
       ·菌种与载体第33页
       ·试剂第33页
       ·主要仪器设备第33页
       ·主要溶液配方第33-34页
     ·方法第34-37页
       ·引物第34页
       ·基因组DNA 的抽提第34页
       ·PCR 扩增第34-36页
       ·凝胶电泳第36-37页
       ·连接产物的转化第37页
   ·结果与分析第37-38页
   ·讨论第38-39页
5 GDZC 株猪葡萄球菌EXHC 毒素基因原核表达载体的构建第39-47页
   ·材料与方法第39-43页
     ·材料第39-41页
       ·菌株及质粒第39页
       ·主要试剂第39页
       ·所需主要试剂的配制第39-41页
     ·方法第41-43页
       ·引物设计第41页
       ·基因组DNA 的抽提第41页
       ·GDZC 菌株的 EXHC 脱落毒素基因的PCR 扩增第41页
       ·GDZC 菌株的 EXHC 基因的克隆及序列分析第41-42页
       ·GDZC 菌株的 EXHC 毒素基因重组表达载体的构建第42-43页
       ·GDZC 菌株的 EXHC 毒素基因的诱导表达第43页
   ·结果与分析第43-46页
     ·GDZC 株 Gap 基因的 PCR 扩增结果第43页
     ·EXHC 毒素基因的 PCR 扩增结果第43-44页
     ·GDZC 菌株的 Gap 基因及 EXHC 毒素基因的序列分析结果第44页
     ·GDZC 菌株 EXHC 毒素基因重组表达载体的构建第44-45页
     ·GDZC 菌株 EXHC 毒素基因的诱导表达第45-46页
   ·讨论第46-47页
6 结论第47-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-54页
作者简介第54页

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