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番茄—黄瓜花叶病毒互作分子机制研究--1.番茄-CMV基因表达谱芯片构建与应用 2.番茄microRNA及其与CMV侵染的关系

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-19页
第一章 文献综述第19-47页
   ·基因芯片技术第19-22页
     ·基因芯片的概念及检测流程第19-20页
     ·基因芯片的原理、类型和制备第20页
     ·杂交信号检测原理第20-21页
     ·表达谱芯片第21-22页
   ·基因芯片技术在植物病害研究中的应用第22-25页
     ·植物—病原物基因组测序第22页
     ·寻找新的抗病与致病基因第22-23页
     ·植物—病原物基因组表达水平分析检测第23页
     ·转基因植物产品检测与植物检疫第23-25页
   ·植物 MIRNA研究进展第25-41页
     ·植物 MICRORNA功能的多样性第26-39页
       ·MIRNA与叶的发育第27-36页
       ·MIRNA与花的发育以及营养阶段的改变第36页
       ·MIRNA与芽和跟的发育第36-37页
       ·MIRNA调控的MIRNA和 SIRNA的BIOGENESIS和功能第37页
       ·MIRNA与信号转导、环境压力响应和病毒胁迫的关系第37-39页
     ·植物 MICRORNA的保守性第39-41页
   ·番茄及CMV研究第41-45页
     ·番茄的分布特征、经济价值与作物生产现状第41-43页
     ·番茄基因组结构第43-44页
     ·番茄病毒病及 CMV基因组结构第44-45页
   ·研究内容和目标第45-47页
     ·研究内容第46页
     ·预期目标第46-47页
第二章 番茄基因表达芯片的探针设计和芯片体系建立第47-62页
   ·材料和方法第48-51页
     ·寄主植物第48页
     ·体外转录和病毒接种第48-49页
     ·样品采集和总RNA提取第49页
     ·探针设计第49-50页
     ·荧光标记样品CDNA的制备和纯化第50-51页
     ·芯片合成和杂交第51页
     ·信号检测和数据分析第51页
   ·结果与分析第51-59页
     ·基因芯片的可靠性分析第51-52页
     ·芯片第一代杂交结果分析第52-53页
     ·芯片第二代杂交结果分析第53-59页
       ·芯片第二代探针的确定第53-55页
       ·番茄基因组差异表达分析第55-58页
       ·CMV基因组表达分析第58-59页
   ·小结与讨论第59-62页
     ·CMV侵染引起的番茄基因的表达第59-60页
     ·CMV基因组在寄主植物内的表达第60-62页
第三章 CMV侵染番茄引起的基因时序表达研究第62-78页
   ·材料与方法第62-63页
     ·寄主植物和芯片第62页
     ·体外转录和病毒接种第62页
     ·样品采集和总 RNA提取第62-63页
     ·荧光标记样品CDNA的制备和纯化第63页
     ·芯片杂交第63页
     ·信号检测和数据分析第63页
   ·结果与分析第63-76页
     ·植物症状表现第63-64页
     ·微阵列芯片杂交实验和差异表达基因分析第64-65页
     ·CMV侵染引起的共调控基因的聚类分析第65-66页
     ·CMV侵染引起的共调控基因的功能分析第66-76页
   ·小结与讨论第76-78页
第四章 植物 MICRORNA芯片的探针设计和芯片检测体系建立第78-93页
   ·材料与方法第79-82页
     ·探针和芯片设计第79页
     ·质控错配探针的设计第79-80页
     ·实验材料第80页
     ·总 RNA的提取第80页
     ·荧光标记样品的制备和杂交反应体系第80-81页
     ·数据获得和处理第81-82页
   ·结果与分析第82-90页
     ·芯片设计结果第82-83页
     ·芯片参数分析第83-86页
       ·探针 GC含量的分布第83-84页
       ·探针 TM值的分布第84-85页
       ·探针长度的分布第85页
       ·探针复杂度(COMPLEXITY FACTOR,CF)的分布第85-86页
     ·芯片体系性能分析第86-90页
       ·芯片杂交特异性分析第86-88页
       ·芯片杂交可靠性分析第88-90页
   ·小结与讨论第90-93页
第五章 番茄 MICRORN确认及其与 CMV侵染关系第93-111页
   ·材料与方法第93-95页
     ·实验材料第93-94页
     ·总 RNA的提取第94页
     ·杂交芯片第94页
     ·荧光标记样品的制备和杂交反应体系第94页
     ·数据获得和处理第94页
     ·NORTHERN杂交第94-95页
   ·结果与分析第95-105页
     ·植物保守性 MIRNA在番茄植物上的表达第95-98页
     ·番茄叶子发育过程中显著表达的MIRNA分析第98-100页
     ·CMV侵染番茄显著性表达的MIRNA时序表达分析第100-105页
       ·植物症状表现第100-101页
       ·CMV侵染番茄不同时期 MIRNA和 MIRNA~*的差异表达情况第101-103页
       ·CMV侵染番茄不同时期 MIRNA和 MIRNA~*的差异表达图谱分析第103-105页
     ·NORTHERN杂交结果验证第105页
   ·小结与讨论第105-111页
     ·植物 MIRNA的保守性分析第106-108页
     ·番茄保守性 MIRNA在生长发育过程中的差异表达第108-109页
     ·CMV侵染引起了MIRNA和 MIRNA~*的差异表达第109-111页
参考文献第111-116页
附录1. 重要溶液的配制第116页

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