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茶树内生枯草芽孢杆菌的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-11页
第一章 文献综述第11-30页
 1 植物内生细菌的研究概况第12-21页
   ·植物内生细菌的定义第12页
   ·植物内生细菌的种类第12-15页
   ·植物内生细菌的内生定殖第15-17页
     ·植物内生细菌的来源第15页
     ·植物内生细菌的侵入途径第15页
     ·内生细菌在植物体内的定殖动态第15-16页
     ·植物内生细菌定殖的检测方法第16-17页
   ·植物内生细菌的生物学功能第17-19页
   ·植物内生细菌的防病机制第19-21页
     ·分泌抗真菌或细菌的活性物质第19页
     ·增强植物的抗逆性第19-20页
     ·占据生态位与营养竞争第20页
     ·诱导植物系统抗性第20-21页
 2 茶树病害生物防治的研究现状第21-23页
   ·茶树病害的发生与危害第21页
   ·茶树病害防治存在的问题第21-22页
   ·茶树病害的生物防治第22-23页
 3 枯草芽孢杆菌的研究概况第23-30页
   ·枯草芽孢杆菌的概述第23-24页
   ·枯草芽孢杆菌的应用第24-26页
   ·枯草芽孢杆菌的抗菌蛋白第26-30页
     ·抗菌蛋白的种类第26-28页
     ·枯草芽孢杆菌的抗菌蛋白第28-30页
第二章 茶树内生细菌的分离与筛选第30-46页
 1 材料与方法第30-36页
   ·实验材料第30-31页
     ·样品来源第30页
     ·供试病原菌第30页
     ·培养基第30页
     ·标准(对照)菌株第30页
     ·染色剂和生理生化鉴定试剂第30页
     ·分子生物学试剂第30-31页
   ·茶树内生细菌的分离第31页
   ·拮抗菌株的筛选第31页
   ·目标菌株的鉴定第31-36页
     ·菌体的形态观察第31-32页
     ·生理生化测定第32-34页
     ·16S rRNA基因鉴定第34-36页
 2 结果与分析第36-44页
   ·茶树内生细菌的分离与筛选结果第36-37页
     ·茶树体内内生细菌的数量第36页
     ·茶树体内内生细菌的拮抗性筛选第36-37页
   ·目标菌株的鉴定结果第37-44页
     ·目标菌株的鉴定结果第37-39页
     ·菌株TL2的鉴定结果第39-44页
 3 小结与讨论第44-46页
第三章 茶树内生细菌的生物学功能研究第46-61页
 1 材料与方法第46-49页
   ·实验材料第46页
     ·培养基第46页
     ·供试农药第46页
     ·供试病原菌第46页
     ·供试茶苗第46页
     ·试剂与溶液第46页
   ·目标菌株的内生性测定第46-47页
     ·抗利福平突变菌株的筛选第46页
     ·接种与取样方法第46-47页
     ·内生细菌的分离与计数第47页
   ·目标菌株的拮抗性测定第47页
     ·对茶叶斑病菌的拮抗性测定第47页
     ·对其它植物病原真菌的拮抗性测定第47页
     ·对植物病原细菌的拮抗性测定第47页
   ·目标菌株的防病效果测定第47-48页
   ·目标菌株的促生效果测定第48页
   ·目标菌株的农药降解性测定第48页
     ·氯氰菊酯的标准曲线制作第48页
     ·氯氰菊酯的添加回收率测定第48页
     ·目标菌株对氯氰菊酯降解率的测定第48页
   ·目标菌株的抗逆性测定第48-49页
 2 结果与分析第49-57页
   ·目标菌株在茶树体内的定殖情况第49页
   ·目标菌株的拮抗谱第49-52页
     ·目标菌株对茶叶斑病菌的拮抗能力第49-50页
     ·目标菌株对其它植物病原菌的拮抗能力第50-52页
   ·目标菌株的室内盆栽防病效果第52-54页
   ·目标菌株对茶苗的促生作用第54页
   ·目标菌株对氯氰菊酯的降解率第54-57页
   ·目标菌株的抗逆性第57页
 3 小结与讨论第57-61页
第四章 菌株TL2在茶树体内的内生机制研究第61-74页
 1 材料与方法第61-64页
   ·实验材料第61页
     ·供试菌株第61页
     ·供试茶苗第61页
     ·培养基第61页
     ·质粒载体第61页
     ·试剂与溶液第61页
   ·抗生素标记法测定菌株TL2在茶树体内的定殖动态第61-62页
     ·利福平标记菌株的筛选第61页
     ·接种和取样方法第61页
     ·内生细菌的分离与计数第61-62页
   ·免疫显色法测定菌株TL2在茶树不同组织的分布动态第62-64页
     ·菌体抗血清的制备第62-63页
     ·接种和取样方法第63页
     ·切片观察第63-64页
   ·绿色荧光标记法测定菌株TL2在茶树组织内的分布动态第64页
     ·绿色荧光标记菌株的构建第64页
     ·接种和取样方法第64页
     ·切片观察第64页
 2 结果与分析第64-72页
   ·菌株TL2在茶树体内的种群变化动态第64-67页
   ·菌株TL2的免疫特异蛋白第67-68页
   ·菌株TL2在茶树组织内的分布动态第68-72页
 3 小结与讨论第72-74页
第五章 菌株TL2对茶树轮斑病的防病机制研究第74-94页
 1 材料与方法第74-78页
   ·实验材料第74页
     ·供试菌株第74页
     ·供试植物第74页
     ·培养基第74页
     ·试剂与溶液第74页
   ·菌株TL2对茶轮斑病菌的抑制测定第74-75页
   ·菌株TL2对茶轮斑病菌的抗菌活性物质测定第75页
     ·样品的制备第75页
     ·样品的抗菌活性测定第75页
   ·菌株TL2对茶树生理生化指标的影响测定第75-78页
     ·接种和取样方法第75-76页
     ·粗酶液的制备第76页
     ·粗酶液的活性测定第76-78页
 2 结果与分析第78-91页
   ·菌株TL2对茶轮斑病菌的影响第78-80页
   ·菌株TL2的抗菌活性物质第80-81页
   ·菌株TL2对茶树生理生化指标的影响第81-91页
     ·茶树体内可溶性蛋白含量的动态变化第81-82页
     ·茶树体内O_2~-产生速率的动态变化第82-83页
     ·茶树体内丙二醛含量的动态变化第83-84页
     ·茶树体内还原型抗坏血酸含量的动态变化第84-85页
     ·茶树体内超氧化歧化酶活力的动态变化第85-86页
     ·茶树体内过氧化物酶活力的动态变化第86-87页
     ·茶树体内过氧化氢酶活力的动态变化第87-88页
     ·茶树体内苯丙氨酸解氨酶活力的动态变化第88-89页
     ·茶树体内β-1,3-葡聚糖酶活力的动态变化第89-90页
     ·茶树体内外切几丁质酶活力的动态变化第90-91页
 3 讨论第91-94页
第六章 菌株TL2抗菌蛋白的分离及其性质研究第94-108页
 1 材料与方法第94-98页
   ·实验材料第94-95页
     ·供试菌株第94页
     ·培养基第94页
     ·试剂与溶液第94-95页
   ·硫酸铵分级沉淀法分离菌株TL2的抗菌蛋白第95-96页
     ·蛋白样品的制备第95页
     ·蛋白样品的抗菌活性测定第95页
     ·离子交换层析第95-96页
     ·不连续非变性凝胶电泳第96页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第96页
   ·诱导差异显示法分离菌株TL2的抗菌蛋白第96-98页
     ·蛋白样品的制备第96页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第96页
     ·双向电泳第96-97页
     ·双向凝胶差异蛋白点的酶切制备第97页
     ·MALDI-TOF质谱分析第97-98页
   ·菌株TL2抗菌蛋白的性质研究第98页
     ·抗菌蛋白的纯化第98页
     ·蛋白样品的抗菌活性测定第98页
     ·抗菌蛋白的热稳定性测定第98页
     ·抗菌蛋白的抗紫外线活性测定第98页
     ·抗菌蛋白的pH稳定性测定第98页
     ·抗菌蛋白的蛋白酶稳定性测定第98页
 2 结果与分析第98-107页
   ·菌株TL2抗菌蛋白的硫酸铵分级沉淀法分离结果第98-101页
   ·菌株TL2抗菌蛋白的诱导差异显示法分离结果第101-105页
   ·菌株TL2抗菌蛋白的性质第105-107页
 3 小结与讨论第107-108页
总结第108-110页
参考文献第110-123页
附录Ⅰ 英文缩略词第123-126页
附录Ⅱ 培养基配方第126-130页
附录Ⅲ 试剂与溶液的配制第130-141页
附录Ⅳ 菌株TL2分泌蛋白的肽质量指纹图谱第141-143页
附录Ⅴ 攻博期间发表(或投稿)论文第143-144页
致谢第144页

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