| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 一、研究目的和意义 | 第6-7页 |
| 二、国内外研究进展 | 第7-17页 |
| 1 猪瘟病毒的分子生物学研究进展 | 第7-13页 |
| 2 国内流行CSFV E2抗原变异 | 第13-14页 |
| 3 猪瘟疫苗的研究进展 | 第14-17页 |
| 三、猪瘟防治中存在的问题及对策 | 第17-19页 |
| 四、研究内容 | 第19-39页 |
| 第一节 猪瘟野毒E2基因的克隆及序列分析 | 第21-34页 |
| 1 材料与方法 | 第21-27页 |
| ·病毒样品 | 第21页 |
| ·载体与菌株 | 第21页 |
| ·工具酶及其它试剂盒 | 第21-22页 |
| ·引物设计与合成 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·病毒RNA的反转录 | 第23页 |
| ·病毒cDNA的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的纯化、回收 | 第24-25页 |
| ·PCR纯化产物与pMD18-T载体连接 | 第25页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第25-26页 |
| ·转化感受态细胞 | 第26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·重组质柆的鉴定 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-32页 |
| ·RT-PCR及重组质粒的鉴定 | 第27-29页 |
| ·目的基因的核苷酸序列及对应的氨基酸序列同源性比较 | 第29-32页 |
| ·系统进化树 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第二节 RT-PCR技术诊断猪瘟的应用研究 | 第34-39页 |
| 1 材料和方法 | 第34-35页 |
| ·病料 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34页 |
| ·病毒RNA提取 | 第34页 |
| ·反转录及PCR | 第34-35页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第35页 |
| ·序列分析 | 第35页 |
| ·重复性试验 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-37页 |
| ·RT-PCR及重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·目的基因的核苷酸序列及对应的氨基酸序列同源性比较 | 第36-37页 |
| ·病料的检测 | 第37页 |
| ·健康猪扁桃体和淋巴结检测 | 第37页 |
| ·重复性检测 | 第37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 作者简介 | 第43-44页 |
| 导师简介 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46页 |