| 第一章 文献综述I Myostain基因的研究进展 | 第1-18页 |
| 1 Myostatin基因的结构性状 | 第9-10页 |
| 2 Myostatin的表达特异性 | 第10页 |
| 3 Myostatin的信号传导 | 第10-11页 |
| 4 调节肌肉生长发育的因子 | 第11-13页 |
| ·肌肉调节因子家族 | 第11-12页 |
| ·肌细胞增强因子2(MEF2)家族 | 第12-13页 |
| ·其它肌肉调节蛋白及其相互作用 | 第13页 |
| 5 Myostatin的作用机理 | 第13-15页 |
| 6 Myostatin突变的研究进展 | 第15-17页 |
| ·自然突变的研究进展 | 第15-16页 |
| ·人为阻断Myostatin活性的研究进展 | 第16-17页 |
| 7 Myostatin其他生物学效应及在临床医疗中的价值的研究 | 第17-18页 |
| 第二章 文献综述Ⅱ 基因打靶技术的研究进展 | 第18-29页 |
| 1 基因打靶的原理 | 第18-20页 |
| ·同源重组的概念 | 第18-19页 |
| ·同源重组模型 | 第19-20页 |
| 2 基因打靶的策略及载体设计 | 第20-21页 |
| 3 影响基因打靶效率的因素 | 第21-22页 |
| ·同源片段来源的影响 | 第21-22页 |
| ·同源片段长度的影响 | 第22页 |
| ·外源DNA导入方法的影响 | 第22页 |
| ·靶基因位点的影响 | 第22页 |
| 4 体细胞打靶 | 第22-27页 |
| ·体细胞核移植研究进展 | 第23-24页 |
| ·体细胞打靶的策略 | 第24-27页 |
| 5 基因打靶在生物医学中的应用前景 | 第27-29页 |
| ·基因打靶技术在基因功能研究中的应用 | 第27页 |
| ·应用基因打靶技术研制人类疾病动物模型 | 第27页 |
| ·应用基因打靶技术改良动物品系和研制动物反应器 | 第27-29页 |
| 第三章 无启动子打靶载体MSTN-Neo、MSTN-GFP的构建 | 第29-45页 |
| 1.材料和方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-42页 |
| ·小尾寒羊基因组的提取 | 第36页 |
| ·从基因组中PCR扩增产物MSTN5.0kb片段和1.0kb片段 | 第36-37页 |
| ·PCR产物MSTN5.0kb片段和1.0kb片段的克隆 | 第37-38页 |
| ·pMD18-T5.0、pMD18-T1.0克隆的测序结果及其分析 | 第38-40页 |
| ·载体pGEM-3Zf-S的构建 | 第40页 |
| ·载体pGEM-3Zf-Neo、pGEM-3Zf-GFP的构建 | 第40-41页 |
| ·无启动子打靶载体MSTN-Neo、MSTN-GFP的构建 | 第41-42页 |
| ·打靶载体线性化 | 第42页 |
| 3.讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 小尾寒羊骨骼肌细胞系的建立 | 第45-53页 |
| 1 材料和方法 | 第45-49页 |
| ·材料 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| 2 结果 | 第49-51页 |
| ·新生小尾寒羊及胎儿骨骼肌细胞的分离建系 | 第50页 |
| ·骨骼肌细胞对G418毒性敏感性检测 | 第50页 |
| ·骨骼肌细胞对G418筛选后形成克隆的能力性检测 | 第50-51页 |
| ·脂质体转染骨骼肌细胞 | 第51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| ·小尾寒羊骨骼肌细胞的分离和建系 | 第51-52页 |
| ·小尾寒羊骨骼肌细胞在培养过程中的形态和生长变化规律 | 第52-53页 |
| 第五章 小尾寒羊MSTN基因的敲除 | 第53-64页 |
| 1 材料和方法 | 第53-57页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| 2 结果 | 第57-61页 |
| ·抗G418细胞克隆的分离 | 第57-58页 |
| ·观察MSTN-GFP载体转染后细胞发光情况 | 第58-59页 |
| ·打靶载体MSTN-Neo定点整合的PCR检测 | 第59页 |
| ·PCR阳性克隆的Southern Blotting分析 | 第59-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| ·小尾寒羊骨骼肌细胞myostatin基因打靶的优势 | 第61页 |
| ·绵羊myostatin基因打靶及其鉴定 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
