第一章 文献综述与开题设想 | 第1-34页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 植物细胞质雄性不育的不育性及其育性恢复性的研究进展 | 第13-20页 |
1.2.1 植物细胞质雄性不育相关区域的确定及其特点 | 第14-15页 |
1.2.2 植物细胞质雄性不育相关区域的表达谱 | 第15-16页 |
1.2.3 植物细胞质雄性不育的可能形成机理 | 第16页 |
1.2.4 植物细胞质雄性不育系统的育性调控及其可能机理 | 第16-19页 |
1.2.5 植物细胞质雄性不育恢复基因的遗传、定位和特点 | 第19-20页 |
1.2.6 展望 | 第20页 |
1.3 植物细胞质雄性不育相关基因的克隆研究 | 第20-24页 |
1.3.1 差异表达基因的分离方法 | 第21页 |
1.3.2 cDNA-AFLP技术原理与特点 | 第21-22页 |
1.3.3 cDNA-AFLP技术应用前景 | 第22-24页 |
1.3.3.1 基因表达特性的研究 | 第23页 |
1.3.3.2 遗传标记分析 | 第23页 |
1.3.3.3 分离特异表达的基因 | 第23-24页 |
1.3.4 展望 | 第24页 |
1.4 油菜细胞质雄性不育的不育性及其育性恢复性的研究进展 | 第24-32页 |
1.4.1 油菜细胞质雄性不育的分类 | 第25-27页 |
1.4.1.1 同源细胞质雄性不育 | 第25-26页 |
1.4.1.2 异源细胞质雄性不育 | 第26-27页 |
1.4.2 油菜细胞质雄性不育的分子生物学研究 | 第27-32页 |
1.4.2.1 与油菜 CMS有关的线粒体基因或片段 | 第27-28页 |
1.4.2.2 线粒体基因表达与油菜 CMS | 第28-30页 |
1.4.2.3 油菜恢复基因Rf与 CMS | 第30-31页 |
1.4.2.4 油菜恢复基因 Rf的标记研究 | 第31-32页 |
1.4.3 展望 | 第32页 |
1.5 开题设想与研究内容 | 第32-34页 |
1.5.1 本课题的提出 | 第32-33页 |
1.5.2 本课题的研究内容 | 第33-34页 |
第二章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa不育类型的恢保关系研究 | 第34-41页 |
2.1 前言 | 第34页 |
2.2 材料与方法 | 第34-35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-39页 |
2.4 讨论 | 第39-40页 |
2.5 结论 | 第40-41页 |
第三章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa花药败育的细胞解剖学研究 | 第41-50页 |
3.1 前言 | 第41-42页 |
3.2 材料与方法 | 第42页 |
3.2.1 材料 | 第42页 |
3.2.2 方法 | 第42页 |
3.3 结果与分析 | 第42-48页 |
3.3.1 甘蓝型油菜NCa保持系花药发育的细胞学特点 | 第42-45页 |
3.3.1.1 正常油菜的花粉母细胞分化期与减数分裂期 | 第42-44页 |
3.3.1.2 单核小抱子 | 第44-45页 |
3.3.1.3 二核和三核花粉 | 第45页 |
3.3.2 甘蓝型油菜细胞质不育系NCa花药发育的细胞学特点 | 第45-48页 |
3.3.2.1 四分体时期 | 第45-46页 |
3.3.2.2 单核小孢子及以后时期 | 第46-48页 |
3.4 讨论 | 第48-49页 |
3.5 结论 | 第49-50页 |
第四章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa的细胞质类型分子鉴定 | 第50-61页 |
4.1 前言 | 第50-51页 |
4.2 材料与方法 | 第51-54页 |
4.2.1 材料 | 第51页 |
4.2.2 方法 | 第51-54页 |
4.2.2.1 油菜黄化苗线粒体 DNA提取 | 第51-52页 |
4.2.2.2 Southern杂交与探针32-P标记 | 第52-54页 |
4.2.2.3 PCR引物设计及 PCR反应 | 第54页 |
4.3 结果与分析 | 第54-59页 |
4.3.1 RFLP结果与分析 | 第54-57页 |
4.3.2 PCR结果与分析 | 第57-59页 |
4.4 讨论 | 第59-60页 |
4.5 结论 | 第60-61页 |
第五章 恢复基因对甘蓝型油菜NCa不育系统的转录调控 | 第61-69页 |
5.1 前言 | 第61页 |
5.2 材料与方 | 第61-64页 |
5.2.1 材料 | 第61-62页 |
5.2.2 方法 | 第62-64页 |
5.2.2.1 线粒体 RNA提取 | 第62页 |
5.2.2.2 Northern杂交 | 第62-64页 |
5.3 结果与分析 | 第64-65页 |
5.3.1 线粒体 RNA快速电泳检测 | 第64页 |
5.3.2 RNA marker的电泳及 RNA分子量的确定 | 第64页 |
5.3.3 线粒体 RNA northern杂交分析 | 第64-65页 |
5.4 讨论 | 第65-68页 |
5.4.1 orf222、orf139和atp9线粒基因与 NCa不育性的关系 | 第65-67页 |
5.4.2 NCa不育系与油菜pol和nap不育系育性调控模式的差别 | 第67-68页 |
5.5 结论 | 第68-69页 |
第六章 线粒体基因在甘蓝型油菜NCa不育系统不同组织中的转录调控 | 第69-75页 |
6.1 前言 | 第69页 |
6.2 材料与方法 | 第69-70页 |
6.3 结果与分析 | 第70-73页 |
6.3.1 总 RNA质量快速检测 | 第70-71页 |
6.3.2 线粒体基因在不同组织中的表达调控 | 第71-73页 |
6.4 讨论 | 第73-74页 |
6.5 结论 | 第74-75页 |
第七章 甘蓝型油菜NCa细胞质不育系统育性相关差异表达基因的克隆分析 | 第75-93页 |
7.1 前言 | 第75-76页 |
7.2 材料与方法 | 第76-79页 |
7.2.1 材料 | 第76页 |
7.2.2 方法 | 第76-79页 |
7.2.2.1 RNA的提取 | 第76页 |
7.2.2.2 双链cDNA的合成 | 第76页 |
7.2.2.3 CDNA-AFLP引物和 AFLP方法 | 第76页 |
7.2.2.4 差异片段的处理 | 第76-79页 |
7.3 结果与分析 | 第79-87页 |
7.3.1 总 RNA的提取质量 | 第79-80页 |
7.3.2 双链cDNA的合成质量 | 第80页 |
7.3.3 cDNA-AFLP差异显示 | 第80-81页 |
7.3.4 差异 TDFs的克隆与菌液 PCR验证 | 第81页 |
7.3.5 差异片段的反向northern杂交 | 第81-82页 |
7.3.6 差异片段测序与同源检索分析 | 第82-85页 |
7.3.7 差异表达基因的功能相关分析 | 第85页 |
7.3.8 几个差异表达基因的 RT-PCR分析 | 第85-87页 |
7.4 讨论 | 第87-92页 |
7.4.1 cDNA-AFLP差异显示方法的有效性和改进 | 第87-88页 |
7.4.2 差异表达基因在花粉育性表达过程中的可能意义 | 第88-90页 |
7.4.3 利用基因工程培育人工雄性不育系的可能性 | 第90-92页 |
7.5 结论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-107页 |
附录1 | 第107-108页 |
附录2 | 第108-110页 |
作者简历 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |