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甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa的研究

第一章 文献综述与开题设想第1-34页
 1.1 引言第13页
 1.2 植物细胞质雄性不育的不育性及其育性恢复性的研究进展第13-20页
  1.2.1 植物细胞质雄性不育相关区域的确定及其特点第14-15页
  1.2.2 植物细胞质雄性不育相关区域的表达谱第15-16页
  1.2.3 植物细胞质雄性不育的可能形成机理第16页
  1.2.4 植物细胞质雄性不育系统的育性调控及其可能机理第16-19页
  1.2.5 植物细胞质雄性不育恢复基因的遗传、定位和特点第19-20页
  1.2.6 展望第20页
 1.3 植物细胞质雄性不育相关基因的克隆研究第20-24页
  1.3.1 差异表达基因的分离方法第21页
  1.3.2 cDNA-AFLP技术原理与特点第21-22页
  1.3.3 cDNA-AFLP技术应用前景第22-24页
   1.3.3.1 基因表达特性的研究第23页
   1.3.3.2 遗传标记分析第23页
   1.3.3.3 分离特异表达的基因第23-24页
  1.3.4 展望第24页
 1.4 油菜细胞质雄性不育的不育性及其育性恢复性的研究进展第24-32页
  1.4.1 油菜细胞质雄性不育的分类第25-27页
   1.4.1.1 同源细胞质雄性不育第25-26页
   1.4.1.2 异源细胞质雄性不育第26-27页
  1.4.2 油菜细胞质雄性不育的分子生物学研究第27-32页
   1.4.2.1 与油菜 CMS有关的线粒体基因或片段第27-28页
   1.4.2.2 线粒体基因表达与油菜 CMS第28-30页
   1.4.2.3 油菜恢复基因Rf与 CMS第30-31页
   1.4.2.4 油菜恢复基因 Rf的标记研究第31-32页
  1.4.3 展望第32页
 1.5 开题设想与研究内容第32-34页
  1.5.1 本课题的提出第32-33页
  1.5.2 本课题的研究内容第33-34页
第二章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa不育类型的恢保关系研究第34-41页
 2.1 前言第34页
 2.2 材料与方法第34-35页
 2.3 结果与分析第35-39页
 2.4 讨论第39-40页
 2.5 结论第40-41页
第三章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa花药败育的细胞解剖学研究第41-50页
 3.1 前言第41-42页
 3.2 材料与方法第42页
  3.2.1 材料第42页
  3.2.2 方法第42页
 3.3 结果与分析第42-48页
  3.3.1 甘蓝型油菜NCa保持系花药发育的细胞学特点第42-45页
   3.3.1.1 正常油菜的花粉母细胞分化期与减数分裂期第42-44页
   3.3.1.2 单核小抱子第44-45页
   3.3.1.3 二核和三核花粉第45页
  3.3.2 甘蓝型油菜细胞质不育系NCa花药发育的细胞学特点第45-48页
   3.3.2.1 四分体时期第45-46页
   3.3.2.2 单核小孢子及以后时期第46-48页
 3.4 讨论第48-49页
 3.5 结论第49-50页
第四章 甘蓝型油菜细胞质雄性不育系NCa的细胞质类型分子鉴定第50-61页
 4.1 前言第50-51页
 4.2 材料与方法第51-54页
  4.2.1 材料第51页
  4.2.2 方法第51-54页
   4.2.2.1 油菜黄化苗线粒体 DNA提取第51-52页
   4.2.2.2 Southern杂交与探针32-P标记第52-54页
   4.2.2.3 PCR引物设计及 PCR反应第54页
 4.3 结果与分析第54-59页
  4.3.1 RFLP结果与分析第54-57页
  4.3.2 PCR结果与分析第57-59页
 4.4 讨论第59-60页
 4.5 结论第60-61页
第五章 恢复基因对甘蓝型油菜NCa不育系统的转录调控第61-69页
 5.1 前言第61页
 5.2 材料与方第61-64页
  5.2.1 材料第61-62页
  5.2.2 方法第62-64页
   5.2.2.1 线粒体 RNA提取第62页
   5.2.2.2 Northern杂交第62-64页
 5.3 结果与分析第64-65页
  5.3.1 线粒体 RNA快速电泳检测第64页
  5.3.2 RNA marker的电泳及 RNA分子量的确定第64页
  5.3.3 线粒体 RNA northern杂交分析第64-65页
 5.4 讨论第65-68页
  5.4.1 orf222、orf139和atp9线粒基因与 NCa不育性的关系第65-67页
  5.4.2 NCa不育系与油菜pol和nap不育系育性调控模式的差别第67-68页
 5.5 结论第68-69页
第六章 线粒体基因在甘蓝型油菜NCa不育系统不同组织中的转录调控第69-75页
 6.1 前言第69页
 6.2 材料与方法第69-70页
 6.3 结果与分析第70-73页
  6.3.1 总 RNA质量快速检测第70-71页
  6.3.2 线粒体基因在不同组织中的表达调控第71-73页
 6.4 讨论第73-74页
 6.5 结论第74-75页
第七章 甘蓝型油菜NCa细胞质不育系统育性相关差异表达基因的克隆分析第75-93页
 7.1 前言第75-76页
 7.2 材料与方法第76-79页
  7.2.1 材料第76页
  7.2.2 方法第76-79页
   7.2.2.1 RNA的提取第76页
   7.2.2.2 双链cDNA的合成第76页
   7.2.2.3 CDNA-AFLP引物和 AFLP方法第76页
   7.2.2.4 差异片段的处理第76-79页
 7.3 结果与分析第79-87页
  7.3.1 总 RNA的提取质量第79-80页
  7.3.2 双链cDNA的合成质量第80页
  7.3.3 cDNA-AFLP差异显示第80-81页
  7.3.4 差异 TDFs的克隆与菌液 PCR验证第81页
  7.3.5 差异片段的反向northern杂交第81-82页
  7.3.6 差异片段测序与同源检索分析第82-85页
  7.3.7 差异表达基因的功能相关分析第85页
  7.3.8 几个差异表达基因的 RT-PCR分析第85-87页
 7.4 讨论第87-92页
  7.4.1 cDNA-AFLP差异显示方法的有效性和改进第87-88页
  7.4.2 差异表达基因在花粉育性表达过程中的可能意义第88-90页
  7.4.3 利用基因工程培育人工雄性不育系的可能性第90-92页
 7.5 结论第92-93页
参考文献第93-107页
附录1第107-108页
附录2第108-110页
作者简历第110-111页
致谢第111页

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