| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1． 文献综述 | 第9-19页 |
| 1．1 核盘菌和油菜菌核病 | 第9-10页 |
| 1．1．1 核盘菌的寄主范围及其致病机理 | 第9-10页 |
| 1．1．2 油菜菌核病病原菌的生活习性 | 第10页 |
| 1．2 菌核病抗性的研究进展 | 第10-11页 |
| 1．3 植物抗病防御机制 | 第11-15页 |
| 1．3．1 植物抗病防御机制的种类 | 第11-12页 |
| 1．3．2 植物防御反应的信号传导途径 | 第12-15页 |
| 1．3．2．1 由R基因介导的信号传导途径 | 第12-13页 |
| 1．3．2．2 水杨酸介导的信号传导途径 | 第13-14页 |
| 1．3．2．3 一氧化氮(NO)参与的防御反应途径 | 第14页 |
| 1．3．2．4 茉莉酸和乙烯信号传导途径 | 第14-15页 |
| 1．3．2．5 诱导系统抗性信号传导途径 | 第15页 |
| 1．4 植物抗病基因及抗病相关基因的克隆技术 | 第15-19页 |
| 1．4．1 基于 DNA水平上的抗病基因克隆技术 | 第15-16页 |
| 1．4．2 基于mRNA水平上的差异表达克隆技术 | 第16-19页 |
| 1．5 生物信息学在基因表达研究上的应用 | 第19页 |
| 1．6 本研究的目的 | 第19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2．1 材料 | 第19页 |
| 2．2 方法和步骤 | 第19-27页 |
| 2．2．1 材料准备和处理 | 第19-20页 |
| 2．2．2 核盘菌的培养和保存 | 第20页 |
| 2．2．3 油菜子叶接种处理 | 第20页 |
| 2．2．4 差减cDNA文库构建 | 第20-25页 |
| 2．2．4．1 总 RNA抽提及mRNA分离 | 第20页 |
| 2．2．4．2 cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
| 2．2．4．3 cDNA第二链的合成 | 第21页 |
| 2．2．4．4 cDNA的酶切 | 第21-22页 |
| 2．2．4．5 接头连接 | 第22页 |
| 2．2．4．6 第一次差减杂交 | 第22-23页 |
| 2．2．4．7 第二次差减杂交 | 第23页 |
| 2．2．4．8 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2．2．4．9 连接 | 第24页 |
| 2．2．4．10 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2．2．4．11 转化 | 第24页 |
| 2．2．4．12 差减文库插入片段的检测 | 第24-25页 |
| 2．2．5 反向Northern杂交 | 第25-26页 |
| 2．2．5．1 插入片段的扩增与点膜 | 第25页 |
| 2．2．5．2 cDNA探针合成 | 第25页 |
| 2．2．5．3 杂交与显影 | 第25-26页 |
| 2．2．5．4 差异表达克隆筛选 | 第26页 |
| 2．2．6 Northern杂交 | 第26-27页 |
| 2．2．6．1 差异片段的回收及再扩增 | 第26页 |
| 2．2．6．2 用随机引物制备放射性标记的DNA探针 | 第26-27页 |
| 2．2．6．3 Northern杂交膜的制备 | 第27页 |
| 2．2．6．4 杂交与显影 | 第27页 |
| 2．2．7 序列同源性检索 | 第27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 3．1 子叶活体接种后的表现 | 第27-28页 |
| 3．2 差减文库构建 | 第28-30页 |
| 3．2．1 mRNA提取 | 第28页 |
| 3．2．2 cDNA合成与酶切 | 第28页 |
| 3．2．3 接头连接及连接效率检测 | 第28-29页 |
| 3．2．4 差减产物克隆 | 第29-30页 |
| 3．3 反向Northern斑点杂交筛选结果 | 第30-31页 |
| 3．4 差异表达片段的Northern杂交验证 | 第31页 |
| 3．5 测序与同源检索结果 | 第31-32页 |
| 3．6 基因功能相关分析 | 第32-34页 |
| 3．6．1 基因功能分类 | 第32-34页 |
| 3．6．2 抗病相关基因 | 第34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| 4．1 构建文库时间的确定 | 第34页 |
| 4．2 抑制差减杂交文库构建评价 | 第34-36页 |
| 4．3 筛选的部分基因在植物抗病反应中的作用 | 第36-38页 |
| 5 后续研究展望 | 第38-39页 |
| 6 参考文献 | 第39-54页 |
| 7 同源检索结果表 | 第54-59页 |
| 8 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |