| 英文缩略表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-33页 |
| ·成色作用 | 第15页 |
| ·色素的生物合成 | 第15-26页 |
| ·叶绿素的生物合成 | 第16-17页 |
| ·花色苷的生物合成 | 第17-22页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第22-25页 |
| ·三种主要色素在代谢途径中的位置 | 第25-26页 |
| ·植物花色色素生物合成相关基因的特征 | 第26-27页 |
| ·植物花色呈现需要多种基因协同表达 | 第26-27页 |
| ·花色色素的生物合成必须由调节基因调节 | 第27页 |
| ·叶片特异启动子与花特异启动子 | 第27-29页 |
| ·叶片特异启动子 | 第28-29页 |
| ·花特异表达启动子 | 第29页 |
| ·植物花色的基因工程改良策略及进展 | 第29-32页 |
| ·抑制合成途径限速酶的基因表达 | 第29-30页 |
| ·导入调节基因 | 第30-31页 |
| ·导入新的外源基因 | 第31-32页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-53页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·质粒与菌株 | 第33页 |
| ·酶与生化试剂 | 第33页 |
| ·PCR 引物 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-53页 |
| ·矮牵牛CHSA 基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·CTAB 法提取矮牵牛基因组总DNA | 第34页 |
| ·总DNA 提取产物的纯化 | 第34-35页 |
| ·CHSA 基因的PCR 扩增 | 第35页 |
| ·矮牵牛F3’5’H 基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·TRIZOL法提取矮牵牛花总RNA | 第35-36页 |
| ·RNA 反转录及cDNA 纯化 | 第36-37页 |
| ·F3’5’H 基因片段的PCR 扩增 | 第37页 |
| ·拟南芥AP3 基因上游启动子的克隆 | 第37-39页 |
| ·微量法提取拟南芥总 DNA | 第37-38页 |
| ·拟南芥AP3 基因上游启动子的克隆 | 第38-39页 |
| ·矮牵牛CHSA和F3’5’H基因及拟南芥AP3启动子的克隆与测序 | 第39-42页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·目的基因电泳回收 | 第39-40页 |
| ·目的基因片段与克隆载体的连接 | 第40页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第40-41页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第41-42页 |
| ·序列测定 | 第42页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第42-45页 |
| ·质粒DNA 的大量提取 | 第42-43页 |
| ·克隆载体中目的片段的酶切及表达载体 pBI121 的酶切 | 第43-44页 |
| ·表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·表达载体的转化及克隆筛选 | 第45页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第45页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第45页 |
| ·农杆菌介导法转化烟草 | 第45-47页 |
| ·农杆菌的培养 | 第45-46页 |
| ·烟草的转化 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草植株PCR 检测 | 第47-48页 |
| ·CTAB 微量法提取烟草总DNA | 第47页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 筛选 | 第47-48页 |
| ·Northern杂交分析 | 第48-52页 |
| ·转基因烟草提取总RNA(Rnasey plant mini kit) | 第48-49页 |
| ·电泳,转膜 | 第49-52页 |
| ·叶片叶绿素含量的测定 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-73页 |
| ·矮牵牛中CHSA 基因的克隆及表达 | 第53-61页 |
| ·矮牵牛中CHSA 基因的克隆 | 第53-56页 |
| ·矮牵牛中CHSA 基因表达载体构建及转化 | 第56-58页 |
| ·CHSA基因在克隆载体中连接方向的鉴定 | 第56页 |
| ·CHSA基因表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·CHSA基因表达载体转化农杆菌 | 第57-58页 |
| ·转CHSA 基因烟草植株的获得及检测 | 第58-61页 |
| ·转CHSA(+)基因烟草植株的表型及PCR 检测 | 第58-59页 |
| ·转CHSA(-)基因烟草植株的表型及PCR 检测 | 第59-60页 |
| ·CHSA基因表达情况与转基因烟草表型的关系 | 第60-61页 |
| ·转CHSA 基因烟草叶片叶绿素含量 | 第61页 |
| ·矮牵牛中F3’5’H 基因的克隆及表达 | 第61-67页 |
| ·矮牵牛中F3’5’H 基因的克隆 | 第61-63页 |
| ·矮牵牛中F3’5’H 基因表达载体构建及转化 | 第63-65页 |
| ·PINZIP::F3’5’H 基因表达载体的构建及转化 | 第63-64页 |
| ·CaMV35S::F3’5’H 基因表达载体的构建及转化 | 第64-65页 |
| ·转F3’5’H 基因烟草植株的获得及检测 | 第65-67页 |
| ·转F3’5’H 基因烟草植株的表型及PCR 检测 | 第65-66页 |
| ·转F3’5’H 基因烟草植株的RT-PCR 检测 | 第66-67页 |
| ·转F3’5’H 基因烟草植株叶绿素含量 | 第67页 |
| ·拟南芥AP3 基因启动子的克隆及表达 | 第67-72页 |
| ·拟南芥中AP3 基因启动子的克隆 | 第67-68页 |
| ·拟南芥AP3 启动子表达载体构建及转化 | 第68-72页 |
| ·AP3 启动子-pBI121(GUS)表达载体的构建 | 第68-69页 |
| ·AP3 启动子::F3’5’H 表达载体的构建 | 第69-71页 |
| ·AP3 启动子::F3’5’H 表达载体转化农杆菌 | 第71页 |
| ·AP3 启动子::F3’5’H 基因转化烟草 | 第71-72页 |
| ·转基因烟草植株生长后期叶片颜色的变化 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-77页 |
| ·矮牵牛CHSA 基因的表达与植株表型的关系 | 第73-74页 |
| ·矮牵牛F3’5’H 基因的表达与植株表型的关系 | 第74-75页 |
| ·转基因烟草植株表型多样性 | 第75-76页 |
| ·转基因植株生长后期叶片颜色的恢复 | 第76-77页 |
| 5 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
