摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第8-19页 |
一、 花发育概述 | 第8-9页 |
二、 调控花发育的主要基因 | 第9-16页 |
1 、 花分生组织决定基因 | 第9-10页 |
2 、 同源异型基因 | 第10-16页 |
3 、 花分生组织特性基因和花器官特性基因的关系 | 第16页 |
三、 研究金粟兰AP1CHL基因的意义 | 第16-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-31页 |
一、 实验材料 | 第19-21页 |
二、 实验方法 | 第21-31页 |
1 、 质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第21-22页 |
2 、 限制性内切酶消化 | 第22页 |
3 、 琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
4 、 目的DNA片段的回收 | 第23-24页 |
5 、 载体与目的DNA片段的连接 | 第24页 |
6 、 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第24-25页 |
7 、 大肠杆菌DH5α电击感受态细胞的制备与转化 | 第25页 |
8 、 农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第25-26页 |
9 、 农杆菌介导的浸渍法转化拟南芥 | 第26-27页 |
10 、 农杆菌介导的叶盘法转化烟草 | 第27-28页 |
11 、 DNA的提取与纯化 | 第28-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-40页 |
一、 表达载体的构建与鉴定 | 第31-33页 |
1 、 正义表达载体的构建与鉴定 | 第31-32页 |
2 、 非全长反义表达载体的构建与鉴定 | 第32-33页 |
3 、 全长反义表达载体的构建与鉴定 | 第33页 |
二、 转基因烟草的再生与鉴定 | 第33-38页 |
1 、 转基因烟草的再生 | 第33-34页 |
2 、 生根培养基的筛选 | 第34-36页 |
3 、 PCR鉴定 | 第36-38页 |
4 、 转基因烟草的Southern杂交鉴定 | 第38页 |
三、 转基因烟草的表型观察 | 第38页 |
四、 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第38-40页 |
第四章 讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
致谢 | 第46-48页 |
附录 | 第48-52页 |
一、 非全长反义表达载体构建流程图 | 第48-49页 |
二、 全长反义表达载体的构建流程图 | 第49-50页 |
三、 正义表达载体的构建流程图 | 第50-52页 |
1 、 中间载体pBI121-K373的构建 | 第50-51页 |
2 、 中间载体PKK的构建 | 第51-52页 |
3 、 PKK-AP1CHL正义表达载体的构建 | 第52页 |