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微管相关蛋白1轻链蛋白3家族翻译后修饰方式的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
前言第7-9页
材料和方法第9-25页
 一、 材料第9-13页
  1 cDNA第9页
  2 粒载体第9页
  3 宿主菌第9页
  4 细胞株第9-10页
  5 引物第10-11页
  6 实验材料及试剂盒第11页
  7 实验试剂第11-13页
 二、 主要仪器设备第13-14页
 三、 计算机分析软件第14-15页
 四、 实验方法第15-25页
  1 技术路线和实验方案第15页
  2 近全长大鼠Mapllc3a和Mapllc3b基因cDNAs的获得第15-17页
  3 目的克隆片段的测序验证第17页
  4 重组质粒的构建第17-19页
  5 细胞培养和瞬时转染第19-20页
  6 Western blotting第20-21页
  7 蛋白同源比较,无根树分析第21页
  8 Northern印迹杂交第21页
  9 基因组结构分析第21-22页
  10 MAP1LC3基因的重组表达与蛋白纯化第22-23页
  11 免疫荧光定位第23-24页
  12 细胞组分分离第24页
  13 MDC与MAP1LC3的共定位分析第24页
  14 非还原SDS-PAGE第24-25页
结果第25-43页
 1 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B近全长cDNA的获得第25-26页
 2 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的cDNA的克隆与鉴定第26页
 3 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的表达谱分析第26-27页
 4 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的亚细胞定位第27-29页
 5 MAP1LC3家族同源基因的序列比较及无根树分析第29-30页
 6 大鼠、小鼠及人的MAP1LC3家族成员在HEK293细胞中的表达分析第30-32页
 7 除人的MAP1LC3B外其它成员均在GLY120位点发生了C末端的切割反应第32页
 8 LYS122是LC3B发生修饰的关键位点第32-35页
 9 人的LC3A/B/C在HEK293细胞表达产物与原核表达产物的比较第35页
 10 人的LC3A/B/C均定位在自噬体膜上第35-38页
 11 人MAP1LC3A/B/C在自噬体的形成和融合过程的分析第38-43页
讨论第43-47页
参考文献第47-49页
综述 真核细胞中自噬作用的研究进展第49-71页
附录: 博士期间发表的论文第71-72页
致谢第72-73页

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