| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-9页 |
| 材料和方法 | 第9-25页 |
| 一、 材料 | 第9-13页 |
| 1 cDNA | 第9页 |
| 2 粒载体 | 第9页 |
| 3 宿主菌 | 第9页 |
| 4 细胞株 | 第9-10页 |
| 5 引物 | 第10-11页 |
| 6 实验材料及试剂盒 | 第11页 |
| 7 实验试剂 | 第11-13页 |
| 二、 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 三、 计算机分析软件 | 第14-15页 |
| 四、 实验方法 | 第15-25页 |
| 1 技术路线和实验方案 | 第15页 |
| 2 近全长大鼠Mapllc3a和Mapllc3b基因cDNAs的获得 | 第15-17页 |
| 3 目的克隆片段的测序验证 | 第17页 |
| 4 重组质粒的构建 | 第17-19页 |
| 5 细胞培养和瞬时转染 | 第19-20页 |
| 6 Western blotting | 第20-21页 |
| 7 蛋白同源比较，无根树分析 | 第21页 |
| 8 Northern印迹杂交 | 第21页 |
| 9 基因组结构分析 | 第21-22页 |
| 10 MAP1LC3基因的重组表达与蛋白纯化 | 第22-23页 |
| 11 免疫荧光定位 | 第23-24页 |
| 12 细胞组分分离 | 第24页 |
| 13 MDC与MAP1LC3的共定位分析 | 第24页 |
| 14 非还原SDS-PAGE | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-43页 |
| 1 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B近全长cDNA的获得 | 第25-26页 |
| 2 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的cDNA的克隆与鉴定 | 第26页 |
| 3 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的表达谱分析 | 第26-27页 |
| 4 大鼠MAP1LC3A和MAP1LC3B的亚细胞定位 | 第27-29页 |
| 5 MAP1LC3家族同源基因的序列比较及无根树分析 | 第29-30页 |
| 6 大鼠、小鼠及人的MAP1LC3家族成员在HEK293细胞中的表达分析 | 第30-32页 |
| 7 除人的MAP1LC3B外其它成员均在GLY120位点发生了C末端的切割反应 | 第32页 |
| 8 LYS122是LC3B发生修饰的关键位点 | 第32-35页 |
| 9 人的LC3A／B／C在HEK293细胞表达产物与原核表达产物的比较 | 第35页 |
| 10 人的LC3A／B／C均定位在自噬体膜上 | 第35-38页 |
| 11 人MAP1LC3A／B／C在自噬体的形成和融合过程的分析 | 第38-43页 |
| 讨论 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 综述 真核细胞中自噬作用的研究进展 | 第49-71页 |
| 附录: 博士期间发表的论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
