摘要 | 第1-5页 |
Summary | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
1 河西绒山羊概述 | 第9页 |
2 MHC 基因研究进展 | 第9-16页 |
·MHC 概述 | 第9-10页 |
·MHC 抗原结构 | 第10-14页 |
·Ⅰ类抗原的结构 | 第11-13页 |
·Ⅱ类抗原的结构 | 第13-14页 |
·Ⅲ类抗原的结构 | 第14页 |
·MHC 的基因结构 | 第14-15页 |
·羊 MHC II 类基因的研究进展 | 第15-16页 |
3 PCR-SSCP 技术 | 第16-19页 |
·PCR-SSCP 技术的概念 | 第16页 |
·PCR-SSCP 技术的原理 | 第16页 |
·PCR-SSCP 技术的产生及建立 | 第16-17页 |
·PCR-SSCP 技术的优缺点 | 第17-18页 |
·PCR-SSCP 技术的实验方法 | 第18-19页 |
4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 实验材料与方法 | 第20-31页 |
1 实验材料及设备 | 第20-23页 |
·样品采集 | 第20页 |
·常用试剂及配制方法 | 第20-22页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-31页 |
·基因组 DNA 提取及检测 | 第23-25页 |
·DNA 提取 | 第23-24页 |
·模板的检测 | 第24-25页 |
·PCR 扩增及检测 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第25页 |
·引物合成及稀释 | 第25页 |
·最佳反应条件的确立 | 第25-26页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SSCP) | 第26-27页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶制备 | 第26-27页 |
·银染显色辨型 | 第27页 |
·最佳检测条件确立 | 第27页 |
·克隆测序 | 第27-30页 |
·感受态制备(氯化钙法) | 第27-28页 |
·LB 培养基的配制 | 第28页 |
·PCR 产物回收 | 第28-29页 |
·连接转化培养 | 第29-30页 |
·分装测序 | 第30页 |
·统计分析 | 第30-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-43页 |
1 基因组 DNA 的提取结果 | 第31页 |
2 PCR 的扩增结果 | 第31-32页 |
3 PCR-SSCP 检测结果 | 第32-34页 |
·DRB3 基因第 2 外显子 | 第32-34页 |
·DQB1 基因外显子 2 | 第34页 |
4 等位基因核苷酸多态位点及氨基酸序列差异分析 | 第34-37页 |
·DRB3 基因外显子 2 | 第34-36页 |
·DQB1 基因第 2 外显子 | 第36-37页 |
5 基因型频率、基因频率统计及χ2适合性检验 | 第37-39页 |
6 遗传多态指数 | 第39页 |
7 等位基因系统发育分析 | 第39-41页 |
8 DRB3 和 DQB1 基因第 2 外显子表型连锁分析 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-50页 |
1 实验样品的采集 | 第43页 |
2 基因组 DNA 的提取 | 第43-44页 |
3 影响 PCR 扩增的因素 | 第44-45页 |
·引物 | 第44页 |
·模板 | 第44-45页 |
·Tm 值 | 第45页 |
·Taq DNA 聚合酶 | 第45页 |
4 SSCP 检测的影响因素 | 第45-47页 |
·PCR 产物 | 第45-46页 |
·非变性聚丙烯酰胺凝胶成分 | 第46页 |
·冷循环温度及电泳电压和时间 | 第46-47页 |
5 克隆的注意事项 | 第47页 |
6 河西绒山羊 DRB3 基因外显子 2 遗传多态性 | 第47-48页 |
·河西绒山羊 DRB3 基因第 2 外显子多态性 | 第47页 |
·河西绒山羊 DRB3 基因的遗传特性 | 第47-48页 |
·河西绒山羊系统发育特点 | 第48页 |
7 河西绒山羊 DQB1 基因外显子 2 遗传多态性 | 第48-49页 |
8 河西绒山羊 DRB3 和 DQB1 基因的连锁不平衡性 | 第49-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
导师简介 | 第60-62页 |
附图 | 第62-64页 |