| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-20页 |
| ·国内外谷氨酸棒杆菌的研究概况 | 第7-11页 |
| ·谷氨酸棒杆菌的特征 | 第7-8页 |
| ·谷氨酸棒杆菌的应用 | 第8-10页 |
| ·谷氨酸棒杆菌的选育 | 第10-11页 |
| ·发酵法产琥珀酸微生物的研究概况 | 第11-16页 |
| ·产琥珀酸厌氧螺菌 | 第11-12页 |
| ·琥珀酸放线杆菌 | 第12页 |
| ·琥珀酸曼氏杆菌 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌工程菌 | 第13-14页 |
| ·谷氨酸产生菌产琥珀酸 | 第14-16页 |
| ·基因敲除技术 | 第16-18页 |
| ·本课题的研究意义 | 第18页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·培养基与溶液配制 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-32页 |
| ·谷氨酸产生菌在缺氧环境下产有机酸的方法 | 第23页 |
| ·吖啶黄与紫外线的复合诱变 | 第23-24页 |
| ·琥珀酸高产菌筛选方法的建立 | 第24页 |
| ·基因工程方法定向选育C.acetoacidophilum Δldh | 第24-27页 |
| ·C.acetoacidophilum 缺氧条件下代谢途径关键酶酶活的测定 | 第27-28页 |
| ·C.acetoacidophilum 缺氧条件下代谢网络模型的构建 | 第28-29页 |
| ·利用代谢流量分析法计算C.acetoacidophilum ATCC13870 代谢通量 | 第29-31页 |
| ·代谢产物及残糖的测定 | 第31-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-49页 |
| ·出发菌株的确定及其产有机酸特性考察 | 第32-35页 |
| ·14 株谷氨酸产生菌在缺氧条件下产有机酸的比较 | 第32页 |
| ·培养方式对C.acetoacidophilum ATCC13870 产有机酸的影响 | 第32-33页 |
| ·菌体密度对C.acetoacidophilum ATCC 13870 产有机酸的影响 | 第33页 |
| ·葡萄糖浓度对C.acetoacidophilum ATCC13870 产有机酸的影响 | 第33-34页 |
| ·pH 对C.acetoacidophilum ATCC 13870 产有机酸的影响 | 第34页 |
| ·碳酸盐种类对C.acetoacidophilum ATCC 13870 的产酸影响 | 第34-35页 |
| ·NaHC0_3 浓度对C.acetoacidophilum ATCC 13870 产有机酸代谢流分布的影响 | 第35-38页 |
| ·PEP 节点分析 | 第36-37页 |
| ·PYR 节点分析 | 第37-38页 |
| ·ATCC13870 的吖啶黄-紫外诱变选育琥珀酸高产菌 | 第38-41页 |
| ·吖啶黄处理时间、紫外线照射时间与致死率的关系 | 第38-39页 |
| ·琥珀酸高产突变株的筛选 | 第39-40页 |
| ·琥珀酸高产突变株产酸情况及其遗传稳定研究 | 第40-41页 |
| ·C.acetoacidophilum 的乳酸脱氢酶的基因敲除 | 第41-49页 |
| ·提取基因组DNA | 第41页 |
| ·基因上下游序列及拼接序列的扩增 | 第41-42页 |
| ·基因敲除质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·基因缺失菌株的PCR 鉴定 | 第43页 |
| ·C.acetoacidophilum Δldh 与ATCC 13870 关键酶酶活的测定 | 第43-44页 |
| ·C.acetoacidophilum Δldh 产琥珀酸情况及其遗传稳定性研究 | 第44-47页 |
| ·C.acetoacidophilum Δldh 与ATCC13870 缺氧条件下产有机酸的代谢通量分析 | 第47-49页 |
| 结论与展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
