| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-40页 |
| ·西藏高寒草甸土壤的基本特征 | 第15-16页 |
| ·西藏地质形态及土壤概况 | 第15页 |
| ·西藏高寒草甸土壤微生物概况 | 第15-16页 |
| ·土壤微生物多样性研究内容 | 第16-18页 |
| ·土壤微生物物种多样性 | 第16-17页 |
| ·土壤微生物遗传多样性 | 第17页 |
| ·土壤微生物生态特征多样性 | 第17-18页 |
| ·土壤微生物功能多样性 | 第18页 |
| ·土壤微生物多样性研究方法 | 第18-29页 |
| ·土壤微生物 DNA 提取技术 | 第18-21页 |
| ·微生物核糖体 RNA(rRNA)技术 | 第21-22页 |
| ·分子生态学技术 | 第22-23页 |
| ·宏基因组学技术 | 第23-29页 |
| ·土壤微生物硝化功能概况 | 第29-32页 |
| ·硝化微生物种类 | 第29页 |
| ·硝化功能基因类型 | 第29-31页 |
| ·氨氧化微生物研究进展 | 第31-32页 |
| ·微生物在植物病害生物防治中的应用概况 | 第32-39页 |
| ·微生物宏基因组学在植物病害生物防治中的应用前景 | 第32-34页 |
| ·利用微生物防治植物寄生线虫的研究进展 | 第34-39页 |
| ·本研究的科学问题、目的和意义 | 第39-40页 |
| 第二章 西藏高寒草甸土壤微生物总 DNA 提取和纯化方法研究 | 第40-53页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·西藏高寒草甸土壤微生物总 DNA 的提取方法比较 | 第41-47页 |
| ·土壤样品的采集和理化性质 | 第41页 |
| ·土壤微生物 DNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·不同方法提取的 DNA 纯度及效率检测 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·西藏高寒草甸土壤微生物总 DNA 的纯化方法比较 | 第47-53页 |
| ·土壤样品和粗 DNA 制备 | 第47页 |
| ·土壤微生物 DNA 提纯方法及纯度检测 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 西藏高寒草甸土壤微生物宏基因组质粒文库的构建 | 第53-62页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料和方法 | 第53-57页 |
| ·土壤样品采集和理化性质 | 第53页 |
| ·pUC19 质粒提取、纯化及酶切 | 第53-54页 |
| ·土壤微生物总 DNA 提取、纯化及酶切 | 第54-55页 |
| ·构建质粒文库 | 第55-56页 |
| ·质粒文库插入片段鉴定 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-61页 |
| ·pUC19 质粒质量检测 | 第57页 |
| ·土壤微生物总 DNA 质量检测 | 第57-58页 |
| ·土壤微生物总 DNA 酶切体系确定 | 第58-59页 |
| ·质粒文库插入片段检测 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 西藏高寒草甸土壤微生物宏基因组 FOSMID 文库的构建 | 第62-68页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料和方法 | 第62-65页 |
| ·土壤样品采集和理化性质 | 第62页 |
| ·土壤微生物总 DNA 的提取及纯化 | 第62-63页 |
| ·构建 Fosmid 文库 | 第63-64页 |
| ·Fosmid 文库的质量鉴定 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-67页 |
| ·土壤微生物总 DNA 质量检测 | 第65页 |
| ·Fosmid 文库插入片段检测 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 第五章 西藏高寒草甸土壤细菌和古菌多样性 | 第68-82页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料和方法 | 第68-73页 |
| ·土壤样品的采集和理化性质 | 第68-69页 |
| ·土壤微生物总 DNA 的提取和纯化 | 第69-70页 |
| ·细菌16S rRNA 基因的克隆文库构建及测序 | 第70-72页 |
| ·细菌和古菌16S rRNA 基因序列登录号 | 第72页 |
| ·细菌和古菌16S rRNA 基因序列分析 | 第72-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-80页 |
| ·土壤微生物 DNA 提取质量检测 | 第73-74页 |
| ·细菌16S rRNA 基因文库构建质量检测 | 第74页 |
| ·细菌和古菌16S rRNA 基因序列的分类、丰度和系统发育分析 | 第74-80页 |
| ·比较文库间微生物群落结构的差异结果 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| 第六章 西藏高寒草甸土壤氨氧化细菌和古菌多样性 | 第82-91页 |
| ·引言 | 第82-83页 |
| ·材料和方法 | 第83-84页 |
| ·土壤样品的采集和理化性质 | 第83页 |
| ·土壤微生物总 DNA 的提取和纯化 | 第83页 |
| ·氨氧化细菌amoA 基因的克隆文库构建及测序 | 第83页 |
| ·氨氧化细菌和氨氧化古菌amoA 基因序列登录号 | 第83页 |
| ·氨氧化细菌和氨氧化古菌amoA 基因序列的分析 | 第83-84页 |
| ·结果与分析 | 第84-89页 |
| ·氨氧化细菌amoA 基因文库构建质量检测 | 第84-85页 |
| ·氨氧化细菌和古菌amoA 基因序列的分类、丰度和系统发育分析 | 第85-89页 |
| ·比较文库间氨氧化微生物群落结构的差异结果 | 第89页 |
| ·讨论 | 第89-91页 |
| 第七章 西藏高寒草甸土壤微生物蛋白酶基因多样性 | 第91-103页 |
| ·引言 | 第91-92页 |
| ·材料和方法 | 第92-95页 |
| ·土壤样品、微生物总 DNA 及宏基因组文库 | 第92页 |
| ·基于宏基因组 DNA 的丝氨酸蛋白酶基因多样性 | 第92-93页 |
| ·基于宏基因组pUC19 质粒文库测序分析的蛋白酶基因筛选 | 第93页 |
| ·基于宏基因组 Fosmid 文库的表达蛋白酶阳性克隆筛选 | 第93-95页 |
| ·结果与分析 | 第95-101页 |
| ·丝氨酸蛋白酶基因多样性分析 | 第95-97页 |
| ·pUC19 质粒文库测序分析筛选蛋白酶基因及其多样性评估 | 第97页 |
| ·Fosmid 文库中表达蛋白酶阳性克隆筛选结果及序列分析 | 第97-101页 |
| ·讨论 | 第101-103页 |
| 第八章 全文结论 | 第103-107页 |
| ·结论与讨论 | 第103-106页 |
| ·需要继续研究的内容 | 第106-107页 |
| 附录 | 第107-113页 |
| 参考文献 | 第113-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 作者简历 | 第129页 |
