| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第6-12页 |
| 绪论 | 第12-36页 |
| ·蛋白酶的研究进展 | 第12-17页 |
| ·蛋白酶及其分类 | 第12页 |
| ·微生物蛋白酶来源的优越性 | 第12-14页 |
| ·蛋白酶的来源 | 第14-16页 |
| ·蛋白酶的应用 | 第16-17页 |
| ·耐热蛋白酶 | 第17页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第17-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第17-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌产生的蛋白酶 | 第19页 |
| ·蛋白酶的纯化、鉴定和测序 | 第19-23页 |
| ·蛋白酶的纯化 | 第19-21页 |
| ·蛋白酶的鉴定及序列测定 | 第21-23页 |
| ·蛋白酶的酶学特性 | 第23-32页 |
| ·理化性质 | 第23页 |
| ·酶促反应动力学 | 第23-29页 |
| ·酶的抑制作用 | 第29-31页 |
| ·EDTA对酶的修饰 | 第31-32页 |
| ·蛋白酶的活性部位及修饰 | 第32-34页 |
| ·蛋白酶的活性部位 | 第32页 |
| ·蛋白酶的化学修饰 | 第32-34页 |
| ·试验研究的内容 | 第34页 |
| ·试验研究的意义 | 第34-36页 |
| 第1章 Bacillus thuringiensis FZ62蛋白酶的分离纯化及N端序列分析 | 第36-50页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料 | 第36-39页 |
| ·酶液 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·缓冲液及其他溶液配置 | 第36-38页 |
| ·仪器 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-45页 |
| ·酶活力和比活力测定 | 第39-40页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第40-41页 |
| ·纯化试剂预处理 | 第41页 |
| ·酶的分离纯化 | 第41-43页 |
| ·蛋白酶的纯度鉴定 | 第43页 |
| ·蛋白酶的免疫印迹 | 第43-44页 |
| ·蛋白酶测序 | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-50页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第45页 |
| ·脱盐 | 第45-46页 |
| ·离子交换层析 | 第46-47页 |
| ·分子筛层析 | 第47-48页 |
| ·蛋白酶分离纯化各步骤结果汇总 | 第48页 |
| ·酶的纯度鉴定及蛋白印迹 | 第48页 |
| ·蛋白酶的测序 | 第48-49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-50页 |
| 第2章 Bacillus thuringiensis FZ62蛋白酶的理化性质及催化动力学特征 | 第50-62页 |
| ·前言 | 第50页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·仪器 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·酶活力测定 | 第50页 |
| ·酶的分子量的测定 | 第50-51页 |
| ·酶分子的紫外吸收光谱测定 | 第51页 |
| ·酶分子的内源荧光光谱测定 | 第51页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第51页 |
| ·酶的热稳定性 | 第51页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第51页 |
| ·酶的酸碱稳定性 | 第51页 |
| ·酶催化反应的动力学性质研究 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-60页 |
| ·酶的分子量测定 | 第52-53页 |
| ·酶分子的紫外吸收光谱测定 | 第53-54页 |
| ·酶分子的内源荧光光谱测定 | 第54页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第54-55页 |
| ·酶的热稳定性 | 第55页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第55页 |
| ·酶的酸碱稳定性 | 第55-56页 |
| ·酶催化反应的动力学性质研究 | 第56-57页 |
| ·酶催化底物Casein水解反应的活化能测定 | 第57-60页 |
| ·小结与讨论 | 第60-62页 |
| 第3章 金属离子对Bacillus thuringiensis FZ62蛋白酶活力的影响 | 第62-80页 |
| ·前言 | 第62页 |
| ·材料 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-63页 |
| ·酶活力测定 | 第62页 |
| ·正一价碱金属离子对酶的效应 | 第62页 |
| ·二价金属离子对蛋白酶活力的影响 | 第62-63页 |
| ·正三价金属离子对蛋白酶的影响 | 第63页 |
| ·重金属离子对酶活力的影响 | 第63页 |
| ·金属离子对蛋白酶抑制效应及抑制常数的测定 | 第63页 |
| ·EDTA对酶活力的影响 | 第63页 |
| ·金属离子对蛋白酶分子后紫外和荧光光谱的变化 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-77页 |
| ·正一价碱金属离子对酶活力的效应 | 第63-64页 |
| ·二价金属离子对酶活力的影响 | 第64页 |
| ·ZnSO_4对蛋白酶的影响 | 第64-66页 |
| ·CuSO_4对蛋白酶的影响 | 第66-68页 |
| ·重金属HgCl_2对蛋白酶酶的影响 | 第68-72页 |
| ·三价金属Al_2(SO_4)_3对蛋白酶的影响 | 第72-75页 |
| ·金属离子对蛋白酶影响的各参数 | 第75页 |
| ·酶的活性中心研究 | 第75-77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| 第4章 有机溶剂对Bacillus thuringiensis FZ62蛋白酶活力的影响 | 第80-88页 |
| ·前言 | 第80页 |
| ·材料 | 第80页 |
| ·试剂 | 第80页 |
| ·仪器 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-81页 |
| ·酶活力测定 | 第80页 |
| ·有机溶剂对蛋白酶活力的影响 | 第80-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-85页 |
| ·几种伯醇对酶活力的影响 | 第81页 |
| ·异丙醇对酶的影响 | 第81-83页 |
| ·甲醛对蛋白酶的影响 | 第83-85页 |
| ·有机溶剂对蛋白酶影响参数 | 第85页 |
| ·讨论 | 第85-88页 |
| 第5章 Bacillus thuringiensis FZ62蛋白酶侧链功能基团的修饰 | 第88-98页 |
| ·前言 | 第88页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·试剂 | 第88页 |
| ·仪器 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-90页 |
| ·酶活力测定 | 第88页 |
| ·蛋氨酸硫醚基的修饰 | 第88-89页 |
| ·赖氨酸ε-氨基的化学修饰 | 第89页 |
| ·二硫键的化学修饰 | 第89页 |
| ·半胱氨酸巯基的化学修饰 | 第89页 |
| ·色氨酸吲哚基的化学修饰 | 第89页 |
| ·组氨酸咪唑基的化学修饰 | 第89页 |
| ·精氨酸胍基的化学修饰 | 第89-90页 |
| ·丝氨酸羰基的化学修饰 | 第90页 |
| ·酪氨酸羟基的化学修饰 | 第90页 |
| ·结果与分析 | 第90-97页 |
| ·蛋氨酸硫醚基的修饰 | 第90页 |
| ·赖氨酸ε-氨基的化学修饰 | 第90-91页 |
| ·二硫键的化学修饰 | 第91-92页 |
| ·半胱氨酸巯基的化学修饰 | 第92-93页 |
| ·色氨酸吲哚基的化学修饰 | 第93-95页 |
| ·组氨酸咪唑基的化学修饰 | 第95页 |
| ·精氨酸胍基的化学修饰 | 第95-96页 |
| ·丝氨酸羰基的化学修饰 | 第96-97页 |
| ·酪氨酸羟基的化学修饰 | 第97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| 结论与展望 | 第98-100页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 1.蛋白酶的分离纯化 | 第98页 |
| 2.蛋白酶的N端鉴定 | 第98页 |
| 3.蛋白酶的性质及催化动力学特征 | 第98页 |
| 4.金属离子对蛋白酶活力的影响 | 第98-99页 |
| 5.有机溶剂对蛋白酶活力的影响 | 第99页 |
| 6.蛋白酶侧链功能基团的修饰 | 第99页 |
| 7.光谱变化研究酶活力与构象的影响 | 第99页 |
| 展望 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-109页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 作者简介 | 第112-113页 |
