| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·胚胎干细胞的研究进展 | 第11-16页 |
| ·胚胎干细胞的特征 | 第11-12页 |
| ·小鼠的早期胚胎发育与多能干细胞来源 | 第12-13页 |
| ·胚胎干细胞自我更新的分子机制 | 第13-15页 |
| ·干细胞的调控机制 | 第15-16页 |
| ·TLE4基因的研究进展 | 第16-18页 |
| ·TLE4基因简介 | 第16页 |
| ·TLE4基因的结构 | 第16-17页 |
| ·TLE4基因的功能 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·实验动物细胞 | 第20页 |
| ·载体及感受态细胞 | 第20页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第21-22页 |
| ·缓冲液及主要溶液的配制 | 第22页 |
| ·实验相关生物信息学网站 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·小鼠TLE4基因的生物信息学分析 | 第23-25页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子区的克隆测序 | 第25-28页 |
| ·小鼠胚胎干细胞(ES)及小鼠畸胎瘤细胞(F9)的培养 | 第28-29页 |
| ·小鼠TLE4基因在小鼠ES及F9细胞的表达鉴定 | 第29-30页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子区域定位 | 第30-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| ·小鼠TLE4基因的生物信息学分析 | 第34-35页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子区的克隆测序 | 第35-37页 |
| ·单菌落的蓝白斑筛选 | 第35-36页 |
| ·pGEM-T2849载体PCR鉴定 | 第36页 |
| ·pGEM-T2849载体序列blast对比分析 | 第36-37页 |
| ·小鼠TLE4基因在小鼠ES及F9细胞的表达鉴定 | 第37-39页 |
| ·小鼠ES及F9细胞的RNA提取 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第38-39页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子定位 | 第39-43页 |
| ·第一轮缺失序列表达载体的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·双荧光素酶分析7个片段的相对活性 | 第40-43页 |
| ·第二轮缺失序列表达载体的构建及鉴定 | 第43页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子定位结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子区域的生物信息学分析 | 第45页 |
| ·小鼠TLE4基因启动子活性分析 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |