摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-19页 |
·植物启动子概述 | 第13-17页 |
·植物启动子的分类和特点 | 第13-14页 |
·植物启动子的研究方法及进展 | 第14-17页 |
·植物细胞周期基因简介 | 第17-18页 |
·植物细胞周期基因的类型 | 第17页 |
·细胞周期基因CycD3的特点 | 第17-18页 |
·本研究的目的意义 | 第18页 |
·本研究使用的技术路线 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-32页 |
·实验材料 | 第19-22页 |
·植物材料 | 第19页 |
·主要试剂 | 第19页 |
·PCR反应的引物 | 第19-21页 |
·载体和菌株 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-32页 |
·拟南芥基因组DNA的提取 | 第22页 |
·拟南芥组织器官特异性启动子片段的克隆及相关载体构建 | 第22-26页 |
·PCR反应体系及其程序 | 第22-23页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第23页 |
·目的片段与T载体的连接、转化及鉴定 | 第23-25页 |
·启动子与表达载体pBI121的连接 | 第25-26页 |
·油菜基因组 DNA的提取 | 第26页 |
·油菜组织器官特异性启动子片段的克隆及相关载体构建 | 第26-29页 |
·油菜叶片特异性启动子片段的克隆及表达载体构建 | 第26-27页 |
·油菜茎杆特异性启动子片段的克隆及表达载体构建 | 第27-29页 |
·表达载体转化根癌农杆菌GV3101与鉴定 | 第29-30页 |
·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第30-31页 |
·拟南芥植株的培养 | 第30页 |
·拟南芥的农杆菌转化及其后期管理 | 第30页 |
·抗性植株的筛选 | 第30-31页 |
·转基因植株的分子检测以及GUS染色 | 第31-32页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第31页 |
·转基因植物的GUS染色、成像、组织切片 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
·特异性启动子片段的生物信息学分析和相关克隆 | 第32-34页 |
·特异性启动子片段的生物信息学分析 | 第32-33页 |
·启动子目标片段的克隆 | 第33-34页 |
·转基因植株的鉴定 | 第34-36页 |
·GUS染色及部分横向切片结果 | 第36-41页 |
·拟南芥根特异性启动子表达分析 | 第36-38页 |
·拟南芥茎杆特异性启动子表达分析 | 第38页 |
·拟南芥角果特异性启动子表达分析 | 第38-39页 |
·拟南芥种子特异性启动子表达分析 | 第39-40页 |
·拟南芥叶片特异性启动子表达分析 | 第40页 |
·油菜叶片特异性启动子表达分析 | 第40-41页 |
·拟南芥特异性启动子驱动的CycD3突变体相关性状观察 | 第41-42页 |
·油菜茎杆特异性启动子侧翼序列的克隆和序列同源性分析 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
·特异性启动子表达的时空性 | 第43页 |
·叶片特异性启动子表达的相关问题 | 第43-44页 |
·特异性启动子序列区间的确定和分析 | 第44页 |
·拟南芥的生长状况对农杆菌介导的遗传转化效率的影响 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
附录:相关试剂的配制 | 第54-55页 |