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油菜和拟南芥组织器官特异性启动子克隆和功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略语表第11-13页
1 前言第13-19页
   ·植物启动子概述第13-17页
     ·植物启动子的分类和特点第13-14页
     ·植物启动子的研究方法及进展第14-17页
   ·植物细胞周期基因简介第17-18页
     ·植物细胞周期基因的类型第17页
     ·细胞周期基因CycD3的特点第17-18页
   ·本研究的目的意义第18页
   ·本研究使用的技术路线第18-19页
2 材料与方法第19-32页
   ·实验材料第19-22页
     ·植物材料第19页
     ·主要试剂第19页
     ·PCR反应的引物第19-21页
     ·载体和菌株第21-22页
   ·实验方法第22-32页
     ·拟南芥基因组DNA的提取第22页
     ·拟南芥组织器官特异性启动子片段的克隆及相关载体构建第22-26页
       ·PCR反应体系及其程序第22-23页
       ·PCR产物的回收纯化第23页
       ·目的片段与T载体的连接、转化及鉴定第23-25页
       ·启动子与表达载体pBI121的连接第25-26页
     ·油菜基因组 DNA的提取第26页
     ·油菜组织器官特异性启动子片段的克隆及相关载体构建第26-29页
       ·油菜叶片特异性启动子片段的克隆及表达载体构建第26-27页
       ·油菜茎杆特异性启动子片段的克隆及表达载体构建第27-29页
     ·表达载体转化根癌农杆菌GV3101与鉴定第29-30页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第30-31页
       ·拟南芥植株的培养第30页
       ·拟南芥的农杆菌转化及其后期管理第30页
       ·抗性植株的筛选第30-31页
     ·转基因植株的分子检测以及GUS染色第31-32页
       ·转基因植株的PCR检测第31页
       ·转基因植物的GUS染色、成像、组织切片第31-32页
3 结果与分析第32-43页
   ·特异性启动子片段的生物信息学分析和相关克隆第32-34页
     ·特异性启动子片段的生物信息学分析第32-33页
     ·启动子目标片段的克隆第33-34页
   ·转基因植株的鉴定第34-36页
   ·GUS染色及部分横向切片结果第36-41页
     ·拟南芥根特异性启动子表达分析第36-38页
     ·拟南芥茎杆特异性启动子表达分析第38页
     ·拟南芥角果特异性启动子表达分析第38-39页
     ·拟南芥种子特异性启动子表达分析第39-40页
     ·拟南芥叶片特异性启动子表达分析第40页
     ·油菜叶片特异性启动子表达分析第40-41页
   ·拟南芥特异性启动子驱动的CycD3突变体相关性状观察第41-42页
   ·油菜茎杆特异性启动子侧翼序列的克隆和序列同源性分析第42-43页
4 讨论第43-46页
   ·特异性启动子表达的时空性第43页
   ·叶片特异性启动子表达的相关问题第43-44页
   ·特异性启动子序列区间的确定和分析第44页
   ·拟南芥的生长状况对农杆菌介导的遗传转化效率的影响第44-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
附录:相关试剂的配制第54-55页

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