| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 芥酸的用途和高芥酸育种 | 第11-12页 |
| 2 植物种子中脂肪酸合成概述 | 第12-13页 |
| 3 芥酸合成途径的研究 | 第13-14页 |
| 4 fae1基因的研究进展 | 第14-15页 |
| 5 fad2、fad3基因的研究进展 | 第15页 |
| 6 超表达、反义、RNAi技术 | 第15-16页 |
| 7 根癌农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第16-17页 |
| 8 利用基因工程提高芥酸含量的研究 | 第17-18页 |
| 本研究的目的及内容 | 第18页 |
| 材料与方法 | 第18-32页 |
| 1 材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·生化与分子生物学试剂 | 第18页 |
| ·菌株与质粒 | 第18-19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·引物 | 第19-20页 |
| 2 方法 | 第20-32页 |
| ·分子生物学基本方法 | 第20-23页 |
| ·CTAB小样法提取油菜基因组DNA | 第20页 |
| ·TRIpure法提取油菜花蕾RNA | 第20页 |
| ·热CTAB-LiCL联用法提取油菜种子RNA | 第20-21页 |
| ·RT | 第21页 |
| ·Edwards法提取植物基因组DNA | 第21页 |
| ·基因扩增回收及T载体的连接 | 第21-22页 |
| ·化学法转化大肠杆菌,热激法转化农杆菌 | 第22页 |
| ·质粒DNA提取 | 第22-23页 |
| ·CTAB大样法提取油菜基因组DNA | 第23页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第23-27页 |
| ·GUS报告基因载体的构建 | 第23-24页 |
| ·过表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·反义载体的构建 | 第25-26页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第26-27页 |
| ·拟南芥的遗传转化及转基因种子筛选 | 第27-28页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第27-28页 |
| ·转基因种子筛选 | 第28页 |
| ·转基因种子GUS报告基因检测 | 第28页 |
| ·油菜的遗传转化及转基因植株鉴定 | 第28-30页 |
| ·油菜的遗传转化-暗光培养法 | 第28-29页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第29-30页 |
| ·油菜和拟南芥种子脂肪酸分析 | 第30-32页 |
| 结果与分析 | 第32-41页 |
| 1 目标片段的克隆与载体构建 | 第32-35页 |
| ·油菜napin启动子克隆与GUS报告基因载体的构建 | 第32页 |
| ·fae1基因的克隆与过表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·fad2及fad3基因的克隆与载体构建 | 第33-35页 |
| ·fad2及fad3基因反义载体的构建 | 第33-34页 |
| ·干涉载体的构建 | 第34-35页 |
| 2 转基因拟南芥植株的获得及分析 | 第35-39页 |
| ·阳性植株的筛选 | 第35-36页 |
| ·napin的GUS报告基因检测 | 第36页 |
| ·种子脂肪酸分析 | 第36-39页 |
| 3 转基因油菜植株的获得及分析 | 第39-41页 |
| ·fae1阳性植株的筛选 | 第39-40页 |
| ·fae1阳性植株的表达分析 | 第40页 |
| ·fad2R阳性植株的筛选 | 第40页 |
| ·油菜遗传转化效率的分析 | 第40-41页 |
| ·油菜籽脂肪酸含量分析 | 第41页 |
| 讨论 | 第41-44页 |
| 1 启动子的选择探讨 | 第41-42页 |
| 2 拟南芥遗传转化效率的探讨 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50页 |