| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 1.前言 | 第12-28页 |
| ·禽传染性支气管炎概述 | 第12-20页 |
| ·禽传染性支气管炎的危害与流行分布 | 第12-13页 |
| ·禽传染性支气管炎病毒的分子生物学研究进展 | 第13-16页 |
| ·禽传染性支气管炎的疫苗免疫研究进展 | 第16-19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| ·B细胞和T细胞抗原表位概述 | 第20-24页 |
| ·B细胞和T细胞抗原表位的预测筛选 | 第20-22页 |
| ·多表位肽疫苗的优化设计 | 第22-24页 |
| ·IBV B细胞和T细胞抗原表位的研究进展 | 第24页 |
| ·多肽疫苗的研究进展 | 第24-26页 |
| ·多肽疫苗的问题与展望 | 第26页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第26-27页 |
| ·存在问题 | 第27页 |
| ·本研究的目的意义和创新点 | 第27-28页 |
| 2 材料 | 第28-33页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位序列EpiW | 第28-29页 |
| ·试验菌株,载体,毒株和试验鸡胚 | 第29页 |
| ·宿主菌及载体(见表1) | 第29页 |
| ·试验病毒和鸡胚 | 第29页 |
| ·试验试剂 | 第29-31页 |
| ·主要生化试剂 | 第29页 |
| ·常用化学试剂 | 第29-30页 |
| ·常用溶液的配制 | 第30-31页 |
| ·试验仪器 | 第31-33页 |
| 3 技术路线 | 第33-34页 |
| 4 方法 | 第34-44页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位Epi W多肽的分析验证 | 第34页 |
| ·多肽一级结构和识别率分析验证 | 第34页 |
| ·多肽空间结构预测分析验证 | 第34页 |
| ·抗原表位多肽抗原指数分析验证 | 第34页 |
| ·多肽酶切割位点预测的分析验证 | 第34页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位Epi W-GST多肽的克隆,表达,纯化 | 第34-39页 |
| ·Epi W基因原核表达质粒的构建及鉴定 | 第34-37页 |
| ·Epi W-GST多肽的表达及鉴定 | 第37-38页 |
| ·Epi W-GST多肽的纯化 | 第38-39页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位EpiW-GST多肽的蛋白活性检测 | 第39-41页 |
| ·间接ELISA方法检测EpiW-GST多肽蛋白活性 | 第39-40页 |
| ·EpiW-GST多肽的Western-blot检测 | 第40-41页 |
| ·IBV EpiW-GST多肽疫苗的制备及免疫效果研究 | 第41-44页 |
| ·多肽疫苗的制备与检测 | 第41页 |
| ·实验动物分组及免疫 | 第41-42页 |
| ·特异性IBV血清抗体的检测 | 第42页 |
| ·CD_4+T、CD_8+T淋巴细胞亚类检测 | 第42页 |
| ·攻毒保护实验 | 第42-44页 |
| 5 结果 | 第44-53页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位多肽EpiW的验证分析结果 | 第44-46页 |
| ·多肽一级结构和识别率分析结果 | 第44页 |
| ·多肽空间结构预测分析结果 | 第44页 |
| ·多肽抗原性,疏水性,亲水性分析结果 | 第44-45页 |
| ·多肽蛋白酶切位点预测分析结果 | 第45-46页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位多肽EpiW-GST的表达、鉴定、纯化结果 | 第46-48页 |
| ·EpiW基因重组质粒的鉴定结果 | 第46页 |
| ·EpiW基因重组质粒的表达鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·EpiW-GST融合多肽的纯化结果 | 第47-48页 |
| ·IBV B,T细胞抗原表位多肽EpiW-GST蛋白活性检测结果 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA方法检测蛋白活性的结果 | 第48页 |
| ·多肽的Western-blot分析结果 | 第48-49页 |
| ·IBV EpiW-GST多肽疫苗的制备及免疫效果研究 | 第49-53页 |
| ·特异性IBV血清抗体的检测结果 | 第49页 |
| ·CD_4+、CD_8+T淋巴细胞亚类检测结果 | 第49-52页 |
| ·攻毒实验结果 | 第52-53页 |
| 6 讨论 | 第53-58页 |
| ·关于重组表位多肽 EpiW的分析验证 | 第53页 |
| ·关于载体选择与蛋白纯化 | 第53-54页 |
| ·关于多肽疫苗的制备 | 第54-55页 |
| ·关于多肽疫苗的免疫原性研究 | 第55-56页 |
| ·多肽疫苗免疫效果的优化 | 第56-57页 |
| ·表位多肽的应用前景 | 第57-58页 |
| 7 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录1:英汉缩略名词对照表 | 第67-68页 |
| 附录2:PGEX-4T-1质粒图谱 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第70页 |
