| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-15页 |
| 第一章 子宫内膜细胞的研究进展 | 第15-25页 |
| ·子宫内膜的结构 | 第15-16页 |
| ·子宫内膜的功能 | 第16-20页 |
| ·为胚胎附植做准备 | 第16页 |
| ·参与免疫性疾病的发生 | 第16-17页 |
| ·子宫内膜细胞在子宫局部免疫调节中的作用 | 第17-20页 |
| ·子宫内膜细胞的体外培养 | 第20-25页 |
| ·原代子宫内膜细胞的分离培养 | 第20-23页 |
| ·子宫内膜细胞系 | 第23-25页 |
| 第二章 端粒及端粒酶与细胞永生化的研究进展 | 第25-36页 |
| ·端粒的结构和功能 | 第25-27页 |
| ·端粒的组成 | 第25页 |
| ·端粒的功能 | 第25-26页 |
| ·端粒与细胞衰老的关系 | 第26-27页 |
| ·端粒酶的结构和功能 | 第27-30页 |
| ·端粒酶的发现 | 第27-28页 |
| ·端粒酶的组成 | 第28-29页 |
| ·端粒酶的功能 | 第29-30页 |
| ·细胞的永生化 | 第30-34页 |
| ·细胞永生化的机制 | 第30-32页 |
| ·促使细胞永生化的方法 | 第32-34页 |
| ·端粒酶在细胞永生化中的优越性 | 第34-36页 |
| 第三章 山羊子宫内膜细胞的分离培养及其鉴定 | 第36-45页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·试验动物 | 第36页 |
| ·基础培养基 | 第36页 |
| ·血清 | 第36页 |
| ·缓冲液 | 第36页 |
| ·酶 | 第36-37页 |
| ·台盼兰染液 | 第37页 |
| ·抗生素液 | 第37页 |
| ·免疫组织化学试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·山羊子宫的采取 | 第37页 |
| ·山羊子宫内膜基质细胞的分离培养 | 第37-38页 |
| ·山羊子宫内膜上皮细胞的分离培养 | 第38页 |
| ·细胞的传代培养 | 第38页 |
| ·ESCs 生长曲线的测定 | 第38-39页 |
| ·EECs 生长曲线的测定 | 第39页 |
| ·角蛋白和波形蛋白的鉴定 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·ESCs 的形态和特征 | 第39-40页 |
| ·EECs 的形态和特征 | 第40-41页 |
| ·山羊ESCs 生长曲线 | 第41页 |
| ·山羊EECs 生长曲线 | 第41-42页 |
| ·细胞鉴定 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 hTERT 基因转染山羊子宫内膜基质细胞 | 第45-58页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·细胞与pCI-neo-hTERT 转化的感受态菌DH5α | 第45页 |
| ·工具酶和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器与设备 | 第45页 |
| ·方法与步骤 | 第45-52页 |
| ·溶液配制 | 第45-46页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒的提取与鉴定 | 第46-49页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒转染山羊子宫内膜基质细胞 | 第49-50页 |
| ·免疫组化法检测端粒酶催化亚基（hTERT） | 第50-51页 |
| ·PCR-ELISA 法分析细胞端粒酶活性 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-55页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒提取和酶切鉴定 | 第52页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒纯度和浓度 | 第52页 |
| ·新霉素（G418）对山羊子宫内膜基质细胞最佳筛选浓度的确定 | 第52页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后阳性克隆的获得 | 第52-53页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后细胞形态和特征 | 第53页 |
| ·阳性细胞的纯化及传代 | 第53-54页 |
| ·hTERT 亚基免疫细胞化学染色鉴定 | 第54-55页 |
| ·转染后细胞的端粒酶活性检测 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第五章 转染后子宫内膜基质细胞的理化性质鉴定 | 第58-67页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·细胞株 | 第58页 |
| ·试验动物 | 第58页 |
| ·工具酶和试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器及设备 | 第58页 |
| ·方法与步骤 | 第58-61页 |
| ·hTERT-ESCs 波形蛋白和角蛋白鉴定（具体方法同4.2.4） | 第58-59页 |
| ·hTERT-ESCs 生长曲线的测定 | 第59页 |
| ·软琼脂克隆试验 | 第59页 |
| ·裸鼠致瘤试验 | 第59-60页 |
| ·MTT 法检测细胞血清依赖性 | 第60页 |
| ·接触抑制性 | 第60页 |
| ·性腺激素对转染后子宫内膜基质细胞的刺激作用 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-64页 |
| ·hTERT-ESCs 的波形蛋白和角蛋白鉴定 | 第61页 |
| ·hTERT-ESCs 的生长曲线(图5-3) | 第61-62页 |
| ·软琼脂克隆试验结果 | 第62页 |
| ·致瘤性检测结果 | 第62-63页 |
| ·血清依赖性 | 第63页 |
| ·接触抑制性 | 第63-64页 |
| ·性腺激素对转染后子宫内膜基质细胞的刺激作用 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第六章 hTERT 基因转染山羊子宫内膜上皮细胞 | 第67-76页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-70页 |
| ·G418 最佳浓度筛选 | 第67页 |
| ·pCI-neo-hTERT 真核表达质粒转染山羊EECs | 第67-68页 |
| ·转染细胞的纯化 | 第68页 |
| ·转染后单克隆细胞的传代培养 | 第68页 |
| ·RT-PCR 检测转染细胞中外源性hTERT 的表达 | 第68-70页 |
| ·PCR-ELISA 法分析细胞端粒酶活性(具体方法同4.2.5） | 第70页 |
| ·hTERT 亚基检测（具体方法同4.2.4） | 第70页 |
| ·转染山羊EECs 角蛋白鉴定（具体方法同4.2.4） | 第70页 |
| ·结果 | 第70-73页 |
| ·G418 最佳浓度筛选 | 第70页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染山羊EEC 的结果 | 第70-71页 |
| ·阳性细胞的纯化及传代 | 第71页 |
| ·总RNA 鉴定结果 | 第71-72页 |
| ·总RNA 纯度鉴定结果 | 第72页 |
| ·转染细胞的hTERT 基因的RT-PCR 检测 | 第72页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第72-73页 |
| ·hTERT 检测结果 | 第73页 |
| ·转染后EECs 角蛋白鉴定 | 第73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 第七章 转染后子宫内膜上皮细胞的特性测定 | 第76-84页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·试验动物 | 第76页 |
| ·细胞株 | 第76页 |
| ·方法和步骤 | 第76-77页 |
| ·转染细胞生长曲线测定 | 第76页 |
| ·生长周期测定及细胞凋亡分析 | 第76页 |
| ·hTERT-EECs 倍体分析 | 第76-77页 |
| ·MTT 法检测细胞血清依赖性 | 第77页 |
| ·软琼脂克隆形成试验 | 第77页 |
| ·裸鼠致瘤试验 | 第77页 |
| ·接触抑制性 | 第77页 |
| ·转染细胞性腺激素反应性测定 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-82页 |
| ·转染细胞生长曲线 | 第77-78页 |
| ·hTERT-EECs 增殖周期 | 第78页 |
| ·细胞凋亡分析结果 | 第78-79页 |
| ·血清依赖性检测结果 | 第79页 |
| ·软琼脂克隆形成试验结果 | 第79-80页 |
| ·裸鼠致瘤试验检测结果 | 第80页 |
| ·接触抑制性观察结果 | 第80-81页 |
| ·转染细胞性腺激素反应性 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-97页 |
| 插图清单 | 第97-99页 |
| 缩略词 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
