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稻瘟病菌转录因子Moswi6的功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
上篇 文献综述第11-31页
 第一章 稻瘟病菌转录因子研究概况第11-23页
  1 真核生物转录因子概况第11-12页
  2 与DNA结合的转录因子家族第12-13页
   ·螺旋-转角-螺旋第12页
   ·锌指结构第12-13页
   ·亮氨酸拉链第13页
   ·螺旋-环-螺旋第13页
  3 转录因子在稻瘟病菌生长发育和致病性中的功能研究第13-17页
   ·螺旋-转角-螺旋类转录因子第14-15页
   ·锌指类转录因子第15页
   ·亮氨酸拉链类转录因子第15-16页
   ·螺旋-环-螺旋类转录因子第16页
   ·其他家族转录因子的研究第16-17页
  参考文献第17-23页
 第二章 植物病原真菌MAPK信号通路研究概况第23-31页
  1 植物病原真菌MAPK的种类和功能第23-25页
   ·调节交配信息素反应的MAPK信号途径第23-24页
   ·与细胞壁完整性相关的MAPK信号通路第24页
   ·与渗透压相关的MAPK信号通路第24-25页
  2 稻瘟病菌中MAPK信号途径相关研究第25-27页
   ·PMK1 MAPK信号通路第25-26页
   ·MPS1 MAPK信号通路第26页
   ·OSM1 MAPK信号通路第26-27页
  3 SLT2信号通路在其他植物病原真菌中的研究第27页
  参考文献第27-31页
下篇 研究内容第31-69页
 稻瘟病菌转录因子Moswi6的功能研究第33-69页
  1 材料与方法第34-43页
   ·稻瘟病菌供试菌株及培养条件第34-35页
   ·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成第35页
   ·Moswi6基因的克隆及序列分析第35-36页
     ·Moswi6基因的克隆第35页
     ·Moswi6基因的拷贝数分析第35页
     ·稻瘟病菌Moswi6蛋白的序列分析和系统发育分析第35-36页
   ·酵母双杂交实验第36-37页
     ·酵母菌株、质粒及培养条件第36页
     ·酵母双杂载体构建第36-37页
     ·共转化第37页
     ·β-半乳糖苷酶的定性分析第37页
   ·Moswi6基因敲除突变体的获得第37-39页
     ·Moswi6基因敲除载体的构建第37-38页
     ·Moswi6敲除突变体的筛选及验证第38页
     ·Moswi6敲除突变体的基因互补实验第38-39页
   ·Moswi6基因敲除转化子生长速率及孢子形态表型观察第39页
     ·不同培养条件下生长速率测定第39页
     ·Moswi6敲除突变体的产孢及孢子形态观察第39页
   ·Moswi6敲除突变体致病性测定第39-40页
     ·水稻叶片离体接种第39页
     ·水稻叶片喷雾接种第39-40页
     ·水稻叶鞘接种实验第40页
     ·洋葱表皮侵入实验第40页
   ·Moswi6敲除突变体菌丝形态观察第40页
   ·Moswi6敲除突变体对细胞壁完整性的影响第40-41页
     ·细胞壁胁迫因子敏感性分析第40页
     ·原生质体释放实验第40-41页
     ·Moswi6敲除突变体几丁质含量测定第41页
     ·几丁质合成酶表达量分析第41页
   ·Moswi6敲除突变体对漆酶的影响第41-42页
     ·Cu~(2+)胁迫敏感性分析第41-42页
     ·漆酶活性检测及含量测定第42页
     ·漆酶相关基因表达量分析第42页
   ·Moswi6敲除突变体对胞外过氧化物酶的影响第42-43页
     ·外源过氧化氢胁迫敏感性分析第42页
     ·胞外过氧化物酶活性检测第42页
     ·过氧化物酶基因表达量分析第42-43页
  2 结果与分析第43-62页
   ·Moswi6基因的克隆与序列分析第43页
   ·Moswi6基因的拷贝数分析第43-46页
   ·Moswi6与Mps1互作第46-47页
   ·Moswi6敲除载体的构建和突变体的获得第47-49页
   ·Moswi6敲除载体的生长表型分析第49-51页
     ·不同生长条件下生长速率分析第49-50页
     ·突变体菌丝形态观察第50-51页
   ·Moswi6敲除载体影响细胞壁完整性第51-55页
     ·突变体对细胞壁相关胁迫因子耐受性增强第51-53页
     ·突变体原生质体释放速率减慢第53页
     ·突变体菌株细胞壁几丁质含量升高第53-55页
   ·Moswi6敲除突变体致病力丧失第55-58页
   ·Moswi6敲除突变体漆酶活性降低第58-60页
   ·几丁质含量增加和色素减少导致菌丝形态改变第60页
   ·Moswi6敲除突变体胞外过氧化物酶活性降低第60-62页
  3 讨论第62-64页
   ·Moswi6敲除突变体导致致病性降低第62-63页
   ·含有APSES结构域的转录因子Moswi6影响菌丝形态第63页
   ·Moswi6是Mps1 MAPK信号通路下游的转录因子第63-64页
  参考文献第64-69页
附录1 试验常用培养基第69-71页
附录2 敲除载体构建及转化子验证引物序列第71-72页
附录3 荧光定量PCR引物序列第72-75页
攻读硕士学位期间发表的研究论文第75-77页
致谢第77页

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