摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-31页 |
第一章 稻瘟病菌转录因子研究概况 | 第11-23页 |
1 真核生物转录因子概况 | 第11-12页 |
2 与DNA结合的转录因子家族 | 第12-13页 |
·螺旋-转角-螺旋 | 第12页 |
·锌指结构 | 第12-13页 |
·亮氨酸拉链 | 第13页 |
·螺旋-环-螺旋 | 第13页 |
3 转录因子在稻瘟病菌生长发育和致病性中的功能研究 | 第13-17页 |
·螺旋-转角-螺旋类转录因子 | 第14-15页 |
·锌指类转录因子 | 第15页 |
·亮氨酸拉链类转录因子 | 第15-16页 |
·螺旋-环-螺旋类转录因子 | 第16页 |
·其他家族转录因子的研究 | 第16-17页 |
参考文献 | 第17-23页 |
第二章 植物病原真菌MAPK信号通路研究概况 | 第23-31页 |
1 植物病原真菌MAPK的种类和功能 | 第23-25页 |
·调节交配信息素反应的MAPK信号途径 | 第23-24页 |
·与细胞壁完整性相关的MAPK信号通路 | 第24页 |
·与渗透压相关的MAPK信号通路 | 第24-25页 |
2 稻瘟病菌中MAPK信号途径相关研究 | 第25-27页 |
·PMK1 MAPK信号通路 | 第25-26页 |
·MPS1 MAPK信号通路 | 第26页 |
·OSM1 MAPK信号通路 | 第26-27页 |
3 SLT2信号通路在其他植物病原真菌中的研究 | 第27页 |
参考文献 | 第27-31页 |
下篇 研究内容 | 第31-69页 |
稻瘟病菌转录因子Moswi6的功能研究 | 第33-69页 |
1 材料与方法 | 第34-43页 |
·稻瘟病菌供试菌株及培养条件 | 第34-35页 |
·稻瘟病菌DNA、RNA的提取和cDNA的合成 | 第35页 |
·Moswi6基因的克隆及序列分析 | 第35-36页 |
·Moswi6基因的克隆 | 第35页 |
·Moswi6基因的拷贝数分析 | 第35页 |
·稻瘟病菌Moswi6蛋白的序列分析和系统发育分析 | 第35-36页 |
·酵母双杂交实验 | 第36-37页 |
·酵母菌株、质粒及培养条件 | 第36页 |
·酵母双杂载体构建 | 第36-37页 |
·共转化 | 第37页 |
·β-半乳糖苷酶的定性分析 | 第37页 |
·Moswi6基因敲除突变体的获得 | 第37-39页 |
·Moswi6基因敲除载体的构建 | 第37-38页 |
·Moswi6敲除突变体的筛选及验证 | 第38页 |
·Moswi6敲除突变体的基因互补实验 | 第38-39页 |
·Moswi6基因敲除转化子生长速率及孢子形态表型观察 | 第39页 |
·不同培养条件下生长速率测定 | 第39页 |
·Moswi6敲除突变体的产孢及孢子形态观察 | 第39页 |
·Moswi6敲除突变体致病性测定 | 第39-40页 |
·水稻叶片离体接种 | 第39页 |
·水稻叶片喷雾接种 | 第39-40页 |
·水稻叶鞘接种实验 | 第40页 |
·洋葱表皮侵入实验 | 第40页 |
·Moswi6敲除突变体菌丝形态观察 | 第40页 |
·Moswi6敲除突变体对细胞壁完整性的影响 | 第40-41页 |
·细胞壁胁迫因子敏感性分析 | 第40页 |
·原生质体释放实验 | 第40-41页 |
·Moswi6敲除突变体几丁质含量测定 | 第41页 |
·几丁质合成酶表达量分析 | 第41页 |
·Moswi6敲除突变体对漆酶的影响 | 第41-42页 |
·Cu~(2+)胁迫敏感性分析 | 第41-42页 |
·漆酶活性检测及含量测定 | 第42页 |
·漆酶相关基因表达量分析 | 第42页 |
·Moswi6敲除突变体对胞外过氧化物酶的影响 | 第42-43页 |
·外源过氧化氢胁迫敏感性分析 | 第42页 |
·胞外过氧化物酶活性检测 | 第42页 |
·过氧化物酶基因表达量分析 | 第42-43页 |
2 结果与分析 | 第43-62页 |
·Moswi6基因的克隆与序列分析 | 第43页 |
·Moswi6基因的拷贝数分析 | 第43-46页 |
·Moswi6与Mps1互作 | 第46-47页 |
·Moswi6敲除载体的构建和突变体的获得 | 第47-49页 |
·Moswi6敲除载体的生长表型分析 | 第49-51页 |
·不同生长条件下生长速率分析 | 第49-50页 |
·突变体菌丝形态观察 | 第50-51页 |
·Moswi6敲除载体影响细胞壁完整性 | 第51-55页 |
·突变体对细胞壁相关胁迫因子耐受性增强 | 第51-53页 |
·突变体原生质体释放速率减慢 | 第53页 |
·突变体菌株细胞壁几丁质含量升高 | 第53-55页 |
·Moswi6敲除突变体致病力丧失 | 第55-58页 |
·Moswi6敲除突变体漆酶活性降低 | 第58-60页 |
·几丁质含量增加和色素减少导致菌丝形态改变 | 第60页 |
·Moswi6敲除突变体胞外过氧化物酶活性降低 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
·Moswi6敲除突变体导致致病性降低 | 第62-63页 |
·含有APSES结构域的转录因子Moswi6影响菌丝形态 | 第63页 |
·Moswi6是Mps1 MAPK信号通路下游的转录因子 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
附录1 试验常用培养基 | 第69-71页 |
附录2 敲除载体构建及转化子验证引物序列 | 第71-72页 |
附录3 荧光定量PCR引物序列 | 第72-75页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第75-77页 |
致谢 | 第77页 |