摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
符号说明 | 第9-10页 |
目录 | 第10-14页 |
第一章 引言 | 第14-16页 |
第二章 文献综述 | 第16-36页 |
·小麦白粉病 | 第16-17页 |
·植物抗病基因及作用机制 | 第17-20页 |
·根据保守结构域将抗病基因分类 | 第18-19页 |
·抗病基因的作用机制 | 第19-20页 |
·小麦抗白粉病基因的定位与抗病基因克隆 | 第20-21页 |
·抗白粉病基因的定位 | 第20页 |
·小麦白粉病抗病基因 | 第20-21页 |
·与植物抗病相关的信号转导途径 | 第21-23页 |
·SA-依赖性途径 | 第22页 |
·SA-非依赖性途径 | 第22页 |
·各信号途径的交叉 | 第22-23页 |
·抗病基因克隆技术和电子克隆技术 | 第23-26页 |
·抗病基因克隆技术 | 第23-26页 |
·电子克隆技术 | 第26页 |
·Real-time PCR技术 | 第26-33页 |
·Real-time PCR技术原理 | 第27页 |
·Real-time PCR分类 | 第27-33页 |
·内参基因的选择 | 第33页 |
·Real-time PCR的应用 | 第33页 |
·病毒介导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS) | 第33-36页 |
第三章 小麦抗白粉病相关基因的克隆 | 第36-55页 |
·材料与试剂 | 第36-37页 |
·主要仪器与生产厂家 | 第36-37页 |
·实验材料 | 第37页 |
·载体质粒与菌株 | 第37页 |
·生化试剂与试剂盒 | 第37页 |
·实验方法 | 第37-45页 |
·探针的选择 | 第37-38页 |
·电子克隆及引物设计 | 第38-41页 |
·材料处理 | 第41页 |
·RNA提取及检测 | 第41页 |
·反转录cDNA第一条链及检测 | 第41-42页 |
·目标基因的PCR扩增 | 第42页 |
·目标DNA片段的回收 | 第42-43页 |
·PCR产物加A | 第43页 |
·大肠杆菌(JM109)感受态的制备 | 第43-44页 |
·连接、快速转化、菌液PCR检测和测序 | 第44页 |
·两个重要基因(Mlo和Pm3HYM)的信息学分析 | 第44-45页 |
·实验结果 | 第45-52页 |
·材料接菌处理 | 第45页 |
·RNA提取与反转录 | 第45-46页 |
·目标基因克隆 | 第46-48页 |
·Mlo的相关信息学分析 | 第48-51页 |
·Pm3HYM的相关信息学分析 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-55页 |
第四章 小麦抗白粉病相关基因的表达模式分析 | 第55-67页 |
·材料与试剂 | 第56页 |
·主要仪器与生产厂家 | 第56页 |
·实验材料 | 第56页 |
·生化试剂与试剂盒 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-58页 |
·定量PCR引物设计 | 第56-57页 |
·RNA提取及检测 | 第57页 |
·反转录cDNA第一条链及检测 | 第57页 |
·定量表达分析 | 第57-58页 |
·实验结果 | 第58-64页 |
·RNA提取及cDNA合成 | 第58-59页 |
·定量PCR引物检测结果 | 第59-61页 |
·表达模式分析 | 第61-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
第五章 小麦抗白粉病同源基因Pm3HYM的VIGS载体构建 | 第67-76页 |
·材料与试剂 | 第67-68页 |
·主要仪器与生产厂家 | 第67-68页 |
·实验材料 | 第68页 |
·载体质粒与菌株 | 第68页 |
·生化试剂与试剂盒 | 第68页 |
·实验方法 | 第68-72页 |
·Pm3HYM沉默区域DNA片段的扩增 | 第68-69页 |
·VIGS载体构建 | 第69-72页 |
·实验结果 | 第72-74页 |
·Pm3HYM沉默区域DNA片段的克隆 | 第72页 |
·VIGS载体的构建 | 第72-74页 |
·讨论 | 第74-76页 |
第六章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
附录A 主要试剂和培养基配方 | 第84-85页 |
附录B 载体图 | 第85-86页 |
附录C DNA Marker | 第86-87页 |
个人简历 | 第87页 |
在学期间发表的学术论文 | 第87页 |