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用质粒pMG36e电转化保加利亚乳杆菌和乳酸乳球菌的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 引言第9-25页
   ·乳酸菌背景介绍第9-11页
     ·乳酸菌的定义和分类第9页
     ·乳酸益生菌的益生作用第9-11页
   ·乳酸菌分子生物学和基因工程的研究进展第11-14页
     ·乳球菌基因工程的研究进展第11-12页
     ·乳杆菌基因工程的研究进展第12-13页
     ·双歧杆菌基因工程研究进展第13-14页
   ·乳酸菌中的质粒载体第14-19页
     ·质粒载体的种类及构成元件第17页
     ·质粒载体的复制机制第17-18页
     ·质粒载体系统第18-19页
   ·乳酸菌载体和宿主的发展第19-20页
   ·乳酸菌电转化技术第20-23页
     ·电转化技术的研究进展第20页
     ·电转化的原理第20-21页
     ·影响电转化效率的因素第21-22页
     ·电转化的技术难点第22-23页
   ·乳酸菌质粒消除的概述第23页
   ·受体限制修饰系统的弱化第23-24页
   ·研究目的和意义第24-25页
     ·研究目的第24页
     ·研究意义第24-25页
2 材料与方法第25-33页
   ·菌种和质粒第25页
     ·菌株第25页
     ·质粒第25页
   ·培养基及缓冲液第25-26页
     ·培养基第25-26页
     ·缓冲液第26页
   ·主要试剂第26页
   ·主要仪器设备第26-27页
   ·试验试剂及药品的配制第27-28页
   ·试验方法第28-33页
     ·大肠杆菌DH5α中质粒(pMG36e)的提取及定量检测第28-29页
     ·筛选转化子的红霉素浓度的确定第29页
     ·感受态细胞的制备与电转化第29-31页
     ·转化子的鉴定第31-32页
     ·电转化效率的计算第32页
     ·质粒消除第32页
     ·统计分析方法第32-33页
3 结果和分析第33-47页
   ·受体菌不同培养状态对电转化效率的影响第33-38页
     ·受体菌株在含不同浓度甘氨酸的培养基中生长曲线的测定第33-35页
     ·受体菌株不同培养状态对电转化效率的影响第35-38页
   ·质粒浓度对电转化效率的影响第38-39页
   ·电转化参数对电转化效率的影响第39-41页
   ·再生培养基和再生培养时间对电转化效率的影响第41-43页
     ·再生培养基和培养时间对保加利亚乳杆菌Lb-MH 电转化效率的影响第41-42页
     ·再生培养基和培养时间对乳酸乳球菌ML23 电转化效率的影响第42-43页
   ·受体菌株限制修饰作用对电转化效率的影响第43-44页
   ·转化子的鉴定第44-47页
     ·保加利亚乳杆菌转化子的鉴定第44-45页
     ·乳酸乳球菌ML23 的鉴定第45-47页
4 讨论第47-51页
   ·乳酸菌感受态细胞的制备对电转化效率的影响第47-48页
   ·电转化参数对电转化效率的影响第48页
   ·质粒浓度对电转化效率的影响第48页
   ·再生培养基和培养时间对电转化效率的影响第48-49页
   ·受体菌的限制修饰系统对电转化效率的影响第49页
   ·其它因素对电转化效率的影响第49-51页
5 结论第51-52页
6 工作展望第52-53页
参考文献第53-59页
附录第59-60页
在校期间发表的学术论文第60-61页
作者简介第61-62页
致谢第62-63页

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