摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-25页 |
·乳酸菌背景介绍 | 第9-11页 |
·乳酸菌的定义和分类 | 第9页 |
·乳酸益生菌的益生作用 | 第9-11页 |
·乳酸菌分子生物学和基因工程的研究进展 | 第11-14页 |
·乳球菌基因工程的研究进展 | 第11-12页 |
·乳杆菌基因工程的研究进展 | 第12-13页 |
·双歧杆菌基因工程研究进展 | 第13-14页 |
·乳酸菌中的质粒载体 | 第14-19页 |
·质粒载体的种类及构成元件 | 第17页 |
·质粒载体的复制机制 | 第17-18页 |
·质粒载体系统 | 第18-19页 |
·乳酸菌载体和宿主的发展 | 第19-20页 |
·乳酸菌电转化技术 | 第20-23页 |
·电转化技术的研究进展 | 第20页 |
·电转化的原理 | 第20-21页 |
·影响电转化效率的因素 | 第21-22页 |
·电转化的技术难点 | 第22-23页 |
·乳酸菌质粒消除的概述 | 第23页 |
·受体限制修饰系统的弱化 | 第23-24页 |
·研究目的和意义 | 第24-25页 |
·研究目的 | 第24页 |
·研究意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-33页 |
·菌种和质粒 | 第25页 |
·菌株 | 第25页 |
·质粒 | 第25页 |
·培养基及缓冲液 | 第25-26页 |
·培养基 | 第25-26页 |
·缓冲液 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·试验试剂及药品的配制 | 第27-28页 |
·试验方法 | 第28-33页 |
·大肠杆菌DH5α中质粒(pMG36e)的提取及定量检测 | 第28-29页 |
·筛选转化子的红霉素浓度的确定 | 第29页 |
·感受态细胞的制备与电转化 | 第29-31页 |
·转化子的鉴定 | 第31-32页 |
·电转化效率的计算 | 第32页 |
·质粒消除 | 第32页 |
·统计分析方法 | 第32-33页 |
3 结果和分析 | 第33-47页 |
·受体菌不同培养状态对电转化效率的影响 | 第33-38页 |
·受体菌株在含不同浓度甘氨酸的培养基中生长曲线的测定 | 第33-35页 |
·受体菌株不同培养状态对电转化效率的影响 | 第35-38页 |
·质粒浓度对电转化效率的影响 | 第38-39页 |
·电转化参数对电转化效率的影响 | 第39-41页 |
·再生培养基和再生培养时间对电转化效率的影响 | 第41-43页 |
·再生培养基和培养时间对保加利亚乳杆菌Lb-MH 电转化效率的影响 | 第41-42页 |
·再生培养基和培养时间对乳酸乳球菌ML23 电转化效率的影响 | 第42-43页 |
·受体菌株限制修饰作用对电转化效率的影响 | 第43-44页 |
·转化子的鉴定 | 第44-47页 |
·保加利亚乳杆菌转化子的鉴定 | 第44-45页 |
·乳酸乳球菌ML23 的鉴定 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
·乳酸菌感受态细胞的制备对电转化效率的影响 | 第47-48页 |
·电转化参数对电转化效率的影响 | 第48页 |
·质粒浓度对电转化效率的影响 | 第48页 |
·再生培养基和培养时间对电转化效率的影响 | 第48-49页 |
·受体菌的限制修饰系统对电转化效率的影响 | 第49页 |
·其它因素对电转化效率的影响 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
6 工作展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录 | 第59-60页 |
在校期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |