摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-14页 |
·鹅肥肝的介绍 | 第9-12页 |
·鹅肥肝的概念 | 第9页 |
·鹅肥肝生产现状 | 第9-10页 |
·形成鹅肥肝的机理研究进展 | 第10-11页 |
·鹅生产肥肝性能差异原因的研究 | 第11-12页 |
·胆汁酸代谢及其对胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)基因表达的调节 | 第12-14页 |
·胆汁酸合成途径 | 第12页 |
·CYP7A1基因的特点 | 第12页 |
·胆汁酸对胆固醇7α-羟化酶的调节 | 第12-14页 |
2 研究目的与意义 | 第14-15页 |
3 材料与方法 | 第15-36页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·试验鹅的饲养和组织样品的采集 | 第15页 |
·主要试剂来源与配制 | 第15-16页 |
·载体与菌株 | 第16页 |
·主要仪器和设备 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-36页 |
·鹅肝脏差异表达基因的分离和鉴定 | 第17-24页 |
·鹅肝CYP7A1的5′端和3′端未知序列扩增 | 第24-30页 |
·cyp7a1基因的原核表达及Western blot检测 | 第30-36页 |
4 结果与分析 | 第36-48页 |
·鹅肝脏差异表达基因的分离和鉴定 | 第36-40页 |
·总RNA的定量分析 | 第36页 |
·鹅肝脏差异表达基因的分离 | 第36-37页 |
·基因9302的克隆、鉴定、序列分析和组织表达特征分析 | 第37-40页 |
·鹅肝CYP7A1的5′端和3′端未知序列扩增 | 第40-44页 |
·总RNA的分析 | 第40页 |
·已知序列验证 | 第40-41页 |
·5′RACE PCR产物电泳检测及克隆测序 | 第41-42页 |
·3′端同源序列扩增 | 第42页 |
·3′端cDNA扩增 | 第42-43页 |
·全长序列的获得及序列分析 | 第43-44页 |
·cyp7A1基因的原核表达及Western blot检测 | 第44-48页 |
·Cyp7a1基因全长CDS扩增和重组表达载体酶切鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE分析 | 第45-46页 |
·重组pET-28(a)-cyp7a1表达蛋白的纯化 | 第46页 |
·Western blot检测正常肝脏和肥肝CYP7A1的表达 | 第46-48页 |
5 讨论 | 第48-50页 |
6 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57-61页 |
致谢 | 第61页 |