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鹅CYP7A1基因克隆、表达调节及表达规律的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
缩略语表第8-9页
1 文献综述第9-14页
   ·鹅肥肝的介绍第9-12页
     ·鹅肥肝的概念第9页
     ·鹅肥肝生产现状第9-10页
     ·形成鹅肥肝的机理研究进展第10-11页
     ·鹅生产肥肝性能差异原因的研究第11-12页
   ·胆汁酸代谢及其对胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)基因表达的调节第12-14页
     ·胆汁酸合成途径第12页
     ·CYP7A1基因的特点第12页
     ·胆汁酸对胆固醇7α-羟化酶的调节第12-14页
2 研究目的与意义第14-15页
3 材料与方法第15-36页
   ·实验材料第15-17页
     ·试验鹅的饲养和组织样品的采集第15页
     ·主要试剂来源与配制第15-16页
     ·载体与菌株第16页
     ·主要仪器和设备第16-17页
   ·实验方法第17-36页
     ·鹅肝脏差异表达基因的分离和鉴定第17-24页
     ·鹅肝CYP7A1的5′端和3′端未知序列扩增第24-30页
     ·cyp7a1基因的原核表达及Western blot检测第30-36页
4 结果与分析第36-48页
   ·鹅肝脏差异表达基因的分离和鉴定第36-40页
     ·总RNA的定量分析第36页
     ·鹅肝脏差异表达基因的分离第36-37页
     ·基因9302的克隆、鉴定、序列分析和组织表达特征分析第37-40页
   ·鹅肝CYP7A1的5′端和3′端未知序列扩增第40-44页
     ·总RNA的分析第40页
     ·已知序列验证第40-41页
     ·5′RACE PCR产物电泳检测及克隆测序第41-42页
     ·3′端同源序列扩增第42页
     ·3′端cDNA扩增第42-43页
     ·全长序列的获得及序列分析第43-44页
   ·cyp7A1基因的原核表达及Western blot检测第44-48页
     ·Cyp7a1基因全长CDS扩增和重组表达载体酶切鉴定第44-45页
     ·重组质粒的诱导表达及SDS-PAGE分析第45-46页
     ·重组pET-28(a)-cyp7a1表达蛋白的纯化第46页
     ·Western blot检测正常肝脏和肥肝CYP7A1的表达第46-48页
5 讨论第48-50页
6 结论第50-51页
参考文献第51-57页
附录第57-61页
致谢第61页

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