| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 研究背景 | 第13-17页 |
| 1.2.1 昆虫病原真菌 | 第13页 |
| 1.2.2 莱氏野村菌及微菌核 | 第13-14页 |
| 1.2.3 NADPH氧化酶简介 | 第14-16页 |
| 1.2.4 NADPH氧化酶的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第17页 |
| 1.4 研究内容 | 第17-19页 |
| 1.5 技术路线 | 第19页 |
| 1.6 本研究的创新之处 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 菌株、昆虫与载体 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂及试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.1.3 培养基及溶液的配制方法 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 2.1.5 常用生物学软件 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-38页 |
| 2.2.1 菌株的活化与保存 | 第23页 |
| 2.2.2 真菌基因组DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 真菌总RNA提取及反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 2.2.5 NADPH氧化酶家族基因在微菌核形成过程中的表达模式分析 | 第26-27页 |
| 2.2.6 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2.7 敲除载体的构建 | 第27-32页 |
| 2.2.8 敲除突变菌株的构建及筛选验证 | 第32-34页 |
| 2.2.9 敲除突变菌株基本生长情况 | 第34-35页 |
| 2.2.10 敲除突变菌株胁迫表型分析 | 第35-36页 |
| 2.2.11 敲除突变菌株对微菌核的影响及相关基因的表达模式分析 | 第36页 |
| 2.2.12 敲除突变菌株对不同浓度H_2O_2的敏感性 | 第36页 |
| 2.2.13 敲除突变菌株的毒力测定 | 第36-37页 |
| 2.2.14 数据分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-62页 |
| 3.1 NADPH氧化酶基因家族生物信息学分析 | 第38-45页 |
| 3.1.1 基因结构分析 | 第38页 |
| 3.1.2 生物信息学分析 | 第38-41页 |
| 3.1.3 同源序列比对及系统进化分析 | 第41-45页 |
| 3.2 NADPH氧化酶基因在微菌核诱导过程中的表达模式分析 | 第45-47页 |
| 3.3 敲除突变载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.4 敲除突变菌株的构建及筛选验证 | 第48-49页 |
| 3.5 敲除突变菌株的表型分析 | 第49-62页 |
| 3.5.1 敲除突变菌株的基本生长情况 | 第49-54页 |
| 3.5.2 敲除突变菌株在不同胁迫下的表型分析 | 第54-56页 |
| 3.5.3 敲除突变菌株在不同浓度H_2O_2下的敏感性 | 第56页 |
| 3.5.4 敲除突变菌株对微菌核的影响及相关基因的表达模式 | 第56-59页 |
| 3.5.5 敲除突变菌株对斜纹夜蛾毒力的分析 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| 4.1 NOX是莱氏野村菌正常生长发育所必需的 | 第62-63页 |
| 4.2 NOX调控微菌核的发育过程 | 第63-64页 |
| 4.3 NOX影响莱氏野村菌的毒力 | 第64-66页 |
| 5 主要结论与后续工作 | 第66-68页 |
| 5.1 主要结论 | 第66页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 附录 | 第76-81页 |
| A.作者在攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第76页 |
| B.作者在攻读硕士学位期间参与科研项目 | 第76页 |
| C.NoxA、NoxB与NoxR全长cDNA序列 | 第76-79页 |
| D.蛋白质序列名称与NCBI登录号 | 第79-81页 |
