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拟态弧菌靶向表位基因疫苗的设计、构建及其免疫效果评价

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
本论文常用中英文缩写词第15-16页
文献综述第16-21页
引言第21-23页
1 材料与方法第23-36页
    1.1 质粒与菌株第23页
    1.2 实验动物第23页
    1.3 酶类及主要试剂(盒)第23页
    1.4 检测用抗体第23-24页
    1.5 主要培养基及溶液的配制第24-25页
    1.6 主要仪器第25页
    1.7 拟态弧菌表位基因疫苗靶点的设计第25-26页
    1.8 拟态弧菌靶向表位基因疫苗的构建第26-30页
        1.8.1 外靶向表位基因疫苗的构建第26-29页
        1.8.2 内靶向表位基因疫苗的构建第29页
        1.8.3 双靶向表位基因疫苗的构建第29-30页
    1.9 拟态弧菌靶向表位基因疫苗的免疫效果评价第30-36页
        1.9.1 实验草鱼的饲养第30页
        1.9.2 疫苗的安全性检测第30页
        1.9.3 实验鱼的分组与免疫第30页
        1.9.4 组织中免疫相关基因的mRNA表达水平检测第30-32页
        1.9.5 免疫血清与肠黏液中非特异性免疫因子活性检测第32-33页
        1.9.6 免疫血清与肠黏液中抗体效价检测第33页
        1.9.7 外周血与肠上皮淋巴细胞增殖活性检测第33-35页
        1.9.8 免疫保护率检测第35-36页
2 结果与分析第36-53页
    2.1 重组真核表达质粒的鉴定与表位基因疫苗的制备第36页
    2.2 大肠杆菌DH5a菌蜕的装载量与靶向表位基因疫苗的制备第36-37页
    2.3 拟态弧菌四种表位基因疫苗的安全性第37页
    2.4 免疫相关基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第37-46页
        2.4.1 荧光定量PCR标准曲线的建立第37-39页
        2.4.2 IL-6基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第39-41页
        2.4.3 TNF-α基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第41-42页
        2.4.4 Iclp基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第42-43页
        2.4.5 MHC-Iα基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第43-44页
        2.4.6 MHC-Ⅱβ基因在免疫草鱼不同组织中的转录表达水平第44-46页
    2.5 免疫血清及肠黏液中非特异性免疫因子的活性与含量第46-49页
        2.5.1 免疫血清中SOD活性第46页
        2.5.2 肠黏液中SOD活性第46-47页
        2.5.3 免疫血清中LZM活性第47页
        2.5.4 肠黏液中LZM活性第47页
        2.5.5 免疫血清中C3含量第47-48页
        2.5.6 肠黏液中C3含量第48-49页
    2.6 免疫血清及肠黏液中抗原特异性抗体水平的动态变化第49-51页
        2.6.1 免疫血清中抗原特异性抗体的水平动态变化第49-50页
        2.6.2 肠黏液中抗原特异性抗体水平的动态变化第50-51页
    2.7 外周血及肠上皮淋巴细胞的增殖活性第51页
    2.8 拟态弧菌四种表位基因疫苗对实验鱼的相对免疫保护率第51-53页
讨论第53-56页
结论第56-57页
参考文献第57-62页
附录第62-71页
作者简介第71页

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