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芪黄汤及其提取成分抗大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型变异体作用及其机理研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
引言第16-17页
第一篇 文献综述第17-27页
   ·志贺样毒素II 型变异体的研究进展第17-18页
     ·志贺样毒素的结构及分类第17-18页
     ·SLT-Ⅱv 的致病机理第18页
   ·肠微血管内皮细胞是SLT-IIv作用的靶细胞第18-19页
   ·从微血管角度研究中兽医药第19-21页
   ·中兽药在猪水肿病中的应用第21-23页
   ·芪黄汤及其成分的研究进展第23-27页
     ·黄芪及其主要成分研究第23-24页
     ·大黄及其主要成分研究第24-25页
     ·茯苓及其主要成分研究第25-26页
     ·山楂及其主要成分研究第26-27页
第二篇 试验研究第27-99页
 第1章 芪黄汤对SLT-Ⅱv诱导MIMVECs基因表达谱的影响第27-51页
   ·材料第27-30页
     ·药品第27-28页
     ·试剂和药品配制第28-29页
       ·完全培养基第28页
       ·维持培养基第28页
       ·SLT-Ⅱv第28页
       ·芪黄汤的制备第28页
       ·制备RNA/T7-Oligo(dT) Primer Mix第28页
       ·制备Reverse Transcription Master Mix第28-29页
       ·制备Second Strand Master Mix(在冰上制备)第29页
       ·IVT Master Mix(室温)第29页
       ·制备片段化反应体系第29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·方法第30-35页
     ·细胞的分组处理第30页
     ·总RNA 的抽提第30-31页
     ·总RNA 的质检第31页
     ·总RNA 的纯化第31-32页
     ·First Strand cDNA 合成第32页
     ·Second Strand cDNA 合成第32页
     ·Double-Stranded cDNA 纯化第32-33页
     ·体外转录合成生物素标记cRNA第33页
     ·cRNA 纯化第33-34页
     ·cRNA 片段化第34页
     ·芯片杂交第34-35页
     ·芯片染色与扫描第35页
     ·数据分析第35页
   ·结果第35-47页
     ·总RNA 质量检测第35-36页
     ·差异表达基因第36-47页
   ·讨论第47-50页
     ·SLT-Ⅱv 对正常的MIMVECs 基因表达的影响第48-49页
     ·芪黄汤对正常的MIMVECs 基因表达的影响第49页
     ·SLT-IIv-芪黄汤对正常的MIMVECs 基因表达的影响第49-50页
     ·SLT-IIv-芪黄汤对SLT-IIv 刺激的MIMVECs 基因表达的影响第50页
   ·小结第50-51页
 第2章 芪黄汤对SLT-Ⅱv诱导MIMVECs的相关蛋白的影响第51-66页
   ·材料第51-53页
     ·试剂第51页
     ·溶液配制第51-53页
       ·细胞裂解液第51页
       ·1nmol/μl CyDye储存液第51-52页
       ·400 pmol/μl CyDye 工作液第52页
       ·水化上样缓冲液第52页
       ·2×sample buffer第52页
       ·SDS 分离胶配制置(12%) 15ml第52-53页
       ·平衡缓冲母液第53页
       ·琼脂糖封胶液配制第53页
       ·10×电泳缓冲液配制(用时稀释成1×电泳缓冲液)第53页
   ·方法第53-56页
     ·蛋白提取第53页
     ·样品标记第53-54页
     ·第一向等电聚焦第54页
     ·第二向SDS 电泳第54-55页
     ·图像分析第55-56页
     ·胶内酶解第56页
     ·质谱鉴定第56页
   ·结果第56-62页
   ·讨论第62-64页
   ·小结第64-66页
 第3章 芪黄汤水溶性成分的分离制备及初步鉴定第66-76页
   ·材料第66页
     ·主要试剂与药品第66页
     ·主要仪器设备第66页
   ·方法第66-68页
     ·芪黄汤的制备第66-67页
     ·色谱试验第67-68页
       ·色谱条件第67-68页
     ·质谱条件第68页
   ·结果第68-73页
     ·芪黄汤的HPLC 分析第68页
     ·芪黄汤的HPLC 制备分析第68-69页
     ·提取成分纯度分析第69页
     ·提取成分鉴定第69-73页
       ·分析色谱第70-71页
       ·ESI-MS 分析第71-73页
   ·讨论第73-75页
   ·小结第75-76页
 第4章 芪黄汤及其提取成分对SLT-IIv诱导的MIMVECs损伤的影响第76-91页
   ·材料第76页
     ·试剂第76页
     ·药物制备第76页
   ·方法第76-77页
     ·试验分组第76-77页
     ·LDH、SOD、MDA 与GSH-Px 检测方法第77页
     ·微血管内皮细胞通透性的测定第77页
     ·统计学处理第77页
   ·结果第77-85页
     ·中药成分对LDH 活性的影响第77-79页
     ·中药成分对SOD 活力的影响第79-80页
     ·中药成分对GSH-Px 活力的影响第80-81页
     ·中药成分对MDA 含量的影响第81-82页
     ·NO 含量的变化第82-83页
     ·ET-1 含量的变化第83-85页
   ·讨论第85-90页
     ·芪黄汤及其提取成分对LDH 活力的影响第86页
     ·芪黄汤及其提取成分对SOD 活力的影响第86-87页
     ·芪黄汤及其提取成分对GSH-Px 活力的影响第87页
     ·芪黄汤及其提取成分对MDA 含量的影响第87-88页
     ·芪黄汤及其提取成分对NO 分泌的影响第88页
     ·芪黄汤及其提取成分对ET-1 分泌的影响第88-89页
     ·QHD 对 MIMVECs 通透性的影响第89-90页
   ·小结第90-91页
 第5章 芪黄汤及其提取成分对三阴交穴位区微血管振幅的影响第91-99页
   ·材料与方法第91-92页
     ·观察对象第91页
     ·试验仪器第91页
     ·药物组成及剂量原则第91页
     ·穴位选取第91页
     ·试验数据记录第91-92页
   ·结果第92-97页
   ·讨论第97-98页
   ·小结第98-99页
结论第99-100页
参考文献第100-114页
导师简历第114-116页
作者简历第116-118页
致谢第118页

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