| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 主要符号对照表 | 第16-18页 |
| 文献综述 | 第18-41页 |
| 第一章 哺乳动物卵巢的形成和发育 | 第18-33页 |
| 1.1 性腺的形成和分化 | 第18-22页 |
| 1.1.1 性腺的早期发育 | 第18-21页 |
| 1.1.2 性腺的决定和分化 | 第21-22页 |
| 1.2 卵泡的发育和闭锁 | 第22-29页 |
| 1.2.1 卵泡的发育 | 第22-26页 |
| 1.2.2 卵泡的闭锁 | 第26-27页 |
| 1.2.3 颗粒细胞和膜细胞的形成及作用 | 第27-29页 |
| 1.3 卵泡发育中类固醇激素的功能 | 第29-33页 |
| 1.3.1 卵泡发育中雄激素的功能 | 第30页 |
| 1.3.2 卵泡发育中孕酮的功能 | 第30-31页 |
| 1.3.3 卵泡发育中雌激素的功能 | 第31-33页 |
| 第二章 WT1的结构及在性腺发育和类固醇生成中的作用 | 第33-41页 |
| 2.1 WT1的结构 | 第33-34页 |
| 2.2 WT1基因在性腺发育及类固醇生成中的功能 | 第34-38页 |
| 2.2.1 性腺形成前WT1基因的功能 | 第34-35页 |
| 2.2.2 性腺决定前WT1基因的功能 | 第35-36页 |
| 2.2.3 性腺决定后WT1基因的功能 | 第36-37页 |
| 2.2.4 WT1基因突变和疾病 | 第37-38页 |
| 2.3 WT1对AKT和ERK信号通路的影响 | 第38-39页 |
| 2.4 研究目的和意义 | 第39-41页 |
| 试验研究 | 第41-105页 |
| 第三章 WT1在卵巢类固醇生成细胞中的表达和定位 | 第41-52页 |
| 3.1 材料和方法 | 第41-46页 |
| 3.1.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.2 方法 | 第42-46页 |
| 3.2 结果 | 第46-49页 |
| 3.2.1 WT1在不同阶段卵泡颗粒细胞及卵泡膜中的表达 | 第46-47页 |
| 3.2.2 卵泡颗粒细胞和膜细胞的纯度鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.3 WT1在卵泡颗粒细胞和膜细胞中的定位 | 第48-49页 |
| 3.3 讨论 | 第49-50页 |
| 3.3.1 WT1在牛不同发育阶段卵泡颗粒细胞和膜细胞中差异表达 | 第49-50页 |
| 3.3.2 WT1在牛卵泡颗粒细胞和膜细胞中的定位分析 | 第50页 |
| 3.4 小结 | 第50-52页 |
| 第四章 WT1下调对小腔卵泡颗粒细胞类固醇激素生成的影响 | 第52-66页 |
| 4.1 材料和方法 | 第52-57页 |
| 4.1.1 材料 | 第52-53页 |
| 4.1.2 方法 | 第53-57页 |
| 4.2 结果 | 第57-63页 |
| 4.2.1 FSH对颗粒细胞雌二醇分泌,CYP19A1和WT1mRNA表达的影响 | 第57-58页 |
| 4.2.2 WT1基因siRNA的筛选 | 第58-59页 |
| 4.2.3 WT1基因下调对牛颗粒细胞类固醇生成的影响 | 第59-61页 |
| 4.2.4 WT1基因下调对颗粒细胞类固醇生成相关基因及促性腺激素受体表达的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.5 健康和闭锁卵泡卵泡液中雌二醇和孕酮的分泌变化 | 第62-63页 |
| 4.2.6 健康和闭锁卵泡颗粒细胞中类固醇生成相关基因和促性腺激素受体mRNA的表达变化 | 第63页 |
| 4.3 讨论 | 第63-65页 |
| 4.4 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)的上调对小腔卵泡颗粒细胞类固醇激素生成的影响 | 第66-81页 |
| 5.1 材料和方法 | 第66-72页 |
| 5.1.1 材料 | 第66-67页 |
| 5.1.2 方法 | 第67-72页 |
| 5.2 结果 | 第72-79页 |
| 5.2.1 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)腺病毒过表达载体的构建 | 第72-73页 |
| 5.2.2 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)腺病毒过表达载体的腺病毒获取 | 第73-74页 |
| 5.2.3 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)腺病毒转染效率与定位 | 第74页 |
| 5.2.4 WT1(+KTS)或WT1(-KTS)上调对牛颗粒细胞类固醇生成的影响 | 第74-76页 |
| 5.2.5 WT1(+KTS)或WT1(-KTS)上调对牛颗粒细胞类固醇生成相关基因的表达及促性腺激素受体表达的影响 | 第76-77页 |
| 5.2.6 在卵泡发育过程中卵泡液中雌二醇和孕酮分泌量的变化 | 第77-78页 |
| 5.2.7 在卵泡发育过程中颗粒细胞中类固醇生成相关基因和促性腺激素受体mRNA表达变化 | 第78-79页 |
| 5.3 讨论 | 第79-80页 |
| 5.4 小结 | 第80-81页 |
| 第六章 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)上调对牛小腔卵泡膜细胞类固醇激素生成的影响 | 第81-91页 |
| 6.1 材料和方法 | 第81-84页 |
| 6.1.1 材料 | 第81-82页 |
| 6.1.2 方法 | 第82-84页 |
| 6.2 结果 | 第84-88页 |
| 6.2.1 WT1(+KTS)和WT1(-KTS)腺病毒过表达载体转染效率 | 第84-85页 |
| 6.2.2 WT1(+KTS)或WT1(-KTS)上调对牛膜细胞类固醇生成的影响 | 第85-86页 |
| 6.2.3 WT1(+KTS)或WT1(-KTS)上调对牛膜细胞类固醇生成相关基因的表达的影响 | 第86-87页 |
| 6.2.4 WT1(+KTS)或WT1(-KTS)上调对膜细胞LH应答的影响 | 第87-88页 |
| 6.3 讨论 | 第88-90页 |
| 6.3.1 WT1(+/-KTS)影响牛膜细胞类固醇激素分泌的解析 | 第88-89页 |
| 6.3.2 WT1(+/-KTS)影响牛膜细胞LH应答的解析 | 第89-90页 |
| 6.4 小结 | 第90-91页 |
| 第七章 WT1通过影响AKT和ERK信号通路调控颗粒细胞类固醇激素生成 | 第91-105页 |
| 7.1 材料和方法 | 第91-96页 |
| 7.1.1 材料 | 第91-92页 |
| 7.1.2 方法 | 第92-96页 |
| 7.2 结果 | 第96-102页 |
| 7.2.1 牛颗粒细胞中WT1对AKT和ERK1/2信号通路的影响 | 第96-99页 |
| 7.2.2 牛颗粒细胞中WT1对MKP3表达的影响 | 第99-100页 |
| 7.2.3 AKT和ERK1/2信号通路在WT1调控颗粒细胞类固醇生成中的作用 | 第100-102页 |
| 7.3 讨论 | 第102-103页 |
| 7.3.1 PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路在WT1调控牛颗粒细胞类固醇激素分泌中的作用解析 | 第102-103页 |
| 7.3.2 WT1调控颗粒细胞ERK1/2磷酸化水平的机制解析 | 第103页 |
| 7.4 小结 | 第103-105页 |
| 全文结论 | 第105-106页 |
| 创新点 | 第106-107页 |
| 不足之处和进一步研究计划 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-128页 |
| 附录 | 第128-130页 |
| 致谢 | 第130-131页 |
| 个人简历 | 第131页 |
